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羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究: 1; 作者沈悦郑红范新炯《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第8期1365-1372,共8页; 目的探究提升羰基还原酶ChKRED20可溶性的方法并测定其酶学性质。方法合成ChKRED20基因并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中进行异源表达,通过增减和改变His-tag位置、改变发酵条件等研究蛋白可溶性,并进一步优化诱导时间、温度及异丙基硫代... 展开更多; 关键词羰基还原酶 ChKRED20 HIS-TAG 酶学性质大肠埃希菌蛋白可溶性; 在线阅读下载PDF 职称材料

产菊酯降解酶重组菌的高密度发酵工艺优化被引量：2: 2; 作者范新炯莫忠兴 +3 位作者张曼曼裴生斌刘玉焕刘孝龙《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期108-119,共12页; 为提高菊酯降解酶的产量,利用单因素和正交实验法对重组菌Escherichia coli BL21(DE3)/p ET-28a(+)-sys410的发酵培养基组成和发酵条件进行优化。结果显示最优培养基含有20.0 g·L-1甘油、20.0 g·L-1酵母粉、8.0 g·L-1硫... 展开更多; 关键词农药降解酶高密度发酵拟除虫菊酯生物降解; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型拟除虫菊酯降解酶的分子改造及降解特性被引量：2: 3; 作者刘孝龙刘玉焕范新炯《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期111-117,共7页; 为了获得稳定性和酶活性提高的拟除虫菊酯类降解酶,利用易错PCR技术对来源于海底泥宏基因组文库的新型酯酶基因(est825)进行体外定向进化,获得了一个酶活性和热稳定性均提高的突变酶(Est M46)。与野生型相比其酶活力提高1.5倍;最适反应... 展开更多; 关键词拟除虫菊酯农药降解酶定向进化生物降解; 在线阅读下载PDF 职称材料

宏基因组来源的酯酶酶学性质及对邻苯二甲酸酯的降解: 4; 作者刘艳艳刘孝龙 +1 位作者赵萌范新炯《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期41-50,共10页; 邻苯二甲酸酯(PAEs)是一类全球性的重要环境污染物。找到广谱高效降解PAEs且具有良好环境适应性的降解酶尤为重要。利用宏基因组学技术,从土壤中克隆出一种新型酯酶基因est924,与已报道的来源于Synechococcus sp.CC9311的alpha/beta-水... 展开更多; 关键词酯酶邻苯二甲酸酯宏基因组学; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究: 1; 作者沈悦郑红范新炯; 机构安徽医科大学基础医学院干细胞与组织研究中心; 出处《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第8期1365-1372,共8页; 基金国家自然科学基金项目(编号:82173725、31400680) 高校中青年教师培养行动项目(编号:DTR2024005)。; 文摘目的探究提升羰基还原酶ChKRED20可溶性的方法并测定其酶学性质。方法合成ChKRED20基因并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中进行异源表达,通过增减和改变His-tag位置、改变发酵条件等研究蛋白可溶性,并进一步优化诱导时间、温度及异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度等以提升重组蛋白的表达,随后研究重组酶的酶学性质。结果利用ChKRED20原核表达菌株,在大肠埃希菌表达体系内去除His-tag并进行发酵条件优化,以获得最优可溶蛋白表达;无His-tag ChKRED20比携带N端和C端His-tag的蛋白酶活性分别提高了0.77和1.28倍;最适温度为55℃,最适pH为8.0;且该酶在较高温度下、碱性环境中仍具有较好的适应性。结论去除His-tag及优化发酵条件可以大大提升ChKRED20在大肠埃希菌中的可溶性。; 关键词羰基还原酶 ChKRED20 HIS-TAG 酶学性质大肠埃希菌蛋白可溶性; Keywords carbonyl reductase ChKRED20 His-tag enzymatic properties Escherichia coli protein solubility; 分类号 R34 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产菊酯降解酶重组菌的高密度发酵工艺优化被引量：2: 2; 作者范新炯莫忠兴张曼曼裴生斌刘玉焕刘孝龙; 机构安徽医科大学基础医学院中山大学生命科学学院; 出处《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期108-119,共12页; 基金国家自然科学基金(31400680) 安徽医科大学校科研基金(2017Xkj007); 文摘为提高菊酯降解酶的产量,利用单因素和正交实验法对重组菌Escherichia coli BL21(DE3)/p ET-28a(+)-sys410的发酵培养基组成和发酵条件进行优化。结果显示最优培养基含有20.0 g·L-1甘油、20.0 g·L-1酵母粉、8.0 g·L-1硫酸铵、100.0 mmol·L-1磷酸盐、5.0 mmol·L-1硫酸镁,以及1.5 m L·L-1的微量元素;发酵条件为装液量50 m L/250 m L、初始培养基pH 7.0、接种量2%,接种培养8 h后乳糖诱导6 h。在7.5 L发酵罐上,使用低浓度碳氮源进行培养,前期恒速补料,对数中后期进行乳糖诱导,后期恒溶氧补料,最终菌体密度和酶活力分别为142.6和3 105.1 U·m L-1,较摇瓶发酵分别提高13.7倍和31.9倍。发酵液经破碎和冷冻干燥后酶活力达到119 426.9 U·g-1,且该酶对菊酯的降解率高于95%。; 关键词农药降解酶高密度发酵拟除虫菊酯生物降解; Keywords pesticide degradation enzyme high density fermentation pyrethroids biodegradation; 分类号 Q815 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型拟除虫菊酯降解酶的分子改造及降解特性被引量：2: 3; 作者刘孝龙刘玉焕范新炯; 机构安徽医科大学基础医学院中山大学生命科学学院; 出处《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期111-117,共7页; 基金国家自然科学基金(31400680) 安徽医科大学博士启动基金(XJ201322) +2 种基金 2013B010404044) 广东省教育项目(2013KJCX0107); 文摘为了获得稳定性和酶活性提高的拟除虫菊酯类降解酶,利用易错PCR技术对来源于海底泥宏基因组文库的新型酯酶基因(est825)进行体外定向进化,获得了一个酶活性和热稳定性均提高的突变酶(Est M46)。与野生型相比其酶活力提高1.5倍;最适反应温度提高了5℃,同时热稳定性明显增强。此外,Est M46对氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯的降解率分别提升至92.21%、99.75%、93.21%和89.48%。这对降低酶的生产成本、促进工业化发展和环境保护有重要意义。; 关键词拟除虫菊酯农药降解酶定向进化生物降解; Keywords pyrethroids pesticide degradation enzyme directed evolution biological degradation; 分类号 Q556.1 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名宏基因组来源的酯酶酶学性质及对邻苯二甲酸酯的降解: 4; 作者刘艳艳刘孝龙赵萌范新炯; 机构安徽医科大学基础医学院中国科学技术大学化学与材料科学学院中山大学生命科学学院; 出处《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期41-50,共10页; 基金国家自然科学基金(31400680) 校企合作项目(0108034202) +1 种基金省级大学生创新创业项目(20810366039)。; 文摘邻苯二甲酸酯(PAEs)是一类全球性的重要环境污染物。找到广谱高效降解PAEs且具有良好环境适应性的降解酶尤为重要。利用宏基因组学技术,从土壤中克隆出一种新型酯酶基因est924,与已报道的来源于Synechococcus sp.CC9311的alpha/beta-水解酶同源性最高,为62.42%。特异性扩增酯酶基因est924,与质粒载体pET-41a(+)连接,然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,获得重组酯酶Est924,并研究其酶学性质和对PAEs的降解作用。研究表明该酶是一个具有良好稳定性和环境适应性的耐碱酯酶,并对邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPrP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)以及邻苯二甲酸二己酯(DnHP)等多种PAEs均具有较好的降解活性。因此,酯酶Est924对PAEs污染环境具有巨大的修复潜能。; 关键词酯酶邻苯二甲酸酯宏基因组学; Keywords esterase phthalate metagenomics; 分类号 Q815 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	羰基还原酶ChKRED20可溶性表达的提升及酶学性质研究	沈悦郑红范新炯	《安徽医科大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	产菊酯降解酶重组菌的高密度发酵工艺优化	范新炯莫忠兴张曼曼裴生斌刘玉焕刘孝龙	《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2018	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	新型拟除虫菊酯降解酶的分子改造及降解特性	刘孝龙刘玉焕范新炯	《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2017	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	宏基因组来源的酯酶酶学性质及对邻苯二甲酸酯的降解	刘艳艳刘孝龙赵萌范新炯	《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料