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过氧化还原蛋白1的K197位点乳酸化修饰促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移
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作者 段国良 韩庆亮 范仕兵 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期219-229,共11页
目的:探讨过氧化还原蛋白1(peroxiredoxin 1,PRDX1)的K197位点乳酸化修饰对胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:(1)通过免疫荧光和乳酸化泛抗体技术,对比胶质母细胞瘤组织与癌旁组织间PRDX1乳酸化修饰水平的差异,并结合高通量质谱... 目的:探讨过氧化还原蛋白1(peroxiredoxin 1,PRDX1)的K197位点乳酸化修饰对胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:(1)通过免疫荧光和乳酸化泛抗体技术,对比胶质母细胞瘤组织与癌旁组织间PRDX1乳酸化修饰水平的差异,并结合高通量质谱与修饰组学分析,筛选出PRDX1蛋白及其K197位点作为研究焦点。(2)用乳酸(5、10和15 mmol/L)、葡萄糖(5、10和25 mmol/L)或糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG;1、5、10和15 mmol/L)处理人胶质母细胞瘤U87MG和LN229细胞,用EdU增殖染色法检测细胞增殖。取U87MG、LN229细胞和神经胶质细胞,用免疫沉淀和Western blot法检测PRDX1的表达。对10 mmol/L乳酸组和未加乳酸组细胞用免疫沉淀和Western blot法检测PRDX1表达及乳酸化修饰水平。(3)构建乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)siRNA(si-LDHA)质粒和阴性对照质粒si-Con,转染U87MG和LN229细胞,免疫沉淀和Western blot法分别检测PRDX1乳酸化修饰水平。(4)构建PRDX1 shRNA(sh-PRDX1)质粒和阴性对照质粒sh-Con,转染U87MG和LN229细胞,Western blot法检测PRDX1的表达。(5)构建PRDX1 K197R(突变型)质粒、PRDX1 WT(野生型)质粒和sh-PRDX1质粒,转染U87MG和LN229细胞,用免疫沉淀和Western blot法检测PRDX1表达与乳酸化修饰水平。取PRDX1 K197R和PRDX1 WT转染U87MG和LN229细胞后,CCK-8法和EdU法检测细胞活力和增殖,Transwell法检测细胞迁移。(6)构建裸鼠成瘤模型,将PRDX1基因K197R突变及未处理的LN229细胞进行裸鼠体内成瘤实验,每组6只裸鼠,18 d后处死裸鼠,取肿瘤组织。用HE染色法观察组织变化,免疫荧光法检测乳酸化修饰水平,免疫组化法检查肿瘤组织内增殖标志物Ki67的表达。结果:胶质母细胞瘤组织中的PRDX1乳酸化修饰水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。在细胞实验中,乳酸和葡萄糖的添加显著促进了胶质母细胞瘤的增殖和迁移,并增加了PRDX1的乳酸化修饰水平(P<0.05);相反,糖酵解抑制剂2-DG则抑制了这些效应。si-LDHA转染实验显示,LDHA的敲减降低了PRDX1的乳酸化修饰水平(P<0.05)。重要的是,PRDX1的K197点突变显著降低了PRDX1的乳酸化修饰水平,并抑制了胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移(P<0.05)。裸鼠致瘤实验进一步验证了PRDX1 K197R组的肿瘤生长显著减缓,Ki67增殖指数和乳酸化修饰水平降低(P<0.05)。结论:PRDX1的K197位点可发生乳酸化修饰,并促进胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 过氧化还原蛋白1 乳酸化 点突变 细胞增殖 细胞迁移
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蛛网膜下腔出血患者继发症状性脑血管痉挛的相关危险因素分析 被引量:8
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作者 张铃铛 宋毅 +5 位作者 冯清林 刘明冬 范仕兵 杜江峰 张鹏 冯梅 《中国卒中杂志》 2014年第5期394-398,共5页
目的研究探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)继发症状性脑血管痉挛(symptomatic cerebral vasospasm,SCVS)的相关危险因素,为SCVS的防治提供参考。方法回顾性分析96例SAH患者临床资料,对性别、年龄、高血压史、... 目的研究探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)继发症状性脑血管痉挛(symptomatic cerebral vasospasm,SCVS)的相关危险因素,为SCVS的防治提供参考。方法回顾性分析96例SAH患者临床资料,对性别、年龄、高血压史、糖尿病史、Fisher分级等影响因素进行统计学分析。结果 96例患者中发生SCVS的患者共39例,单因素分析结果显示SCVS组与非SCVS组在年龄、高血压、吸烟、脑室内积血、Hunt-Hess分级、Fisher分级、数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)显示血管痉挛程度、尼莫地平使用等方面差异有显著性;多因素Logistic回归分析结果显示:低龄、高血压史、Fisher分级是发生SCVS的危险因素,其比值比(odds ratio,OR)分别为0.567、1.982和2.713;而尼莫地平的使用是SCVS发生的保护因素,OR为0.799。结论 SAH后SCVS是多种因素共同作用的结果,其中低年龄、高血压史、Fisher分级是SCVS的独立危险因素,尼莫地平使用为保护因素。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 症状性脑血管痉挛 危险因素
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术前血清白蛋白与球蛋白比值与脑胶质母细胞瘤预后的相关性 被引量:6
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作者 范仕兵 冉住国 +1 位作者 李骥 冯清林 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期412-417,共6页
目的探讨术前外周血清中白蛋白与球蛋白比值(albumin-to-globulin ratio,AGR)对脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)生存预后的评估价值。方法回顾性分析2012年1月至2015年12月重庆市三峡中心医院88例脑胶质母细胞瘤手术患者的临床资料,... 目的探讨术前外周血清中白蛋白与球蛋白比值(albumin-to-globulin ratio,AGR)对脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)生存预后的评估价值。方法回顾性分析2012年1月至2015年12月重庆市三峡中心医院88例脑胶质母细胞瘤手术患者的临床资料,经排除后61例GBM患者纳入研究,设为GBM组,按1:2比例匹配年龄、性别、体质指数的健康体检者设为对照组;采用工作特征曲线(ROC)分析计算AGR的截断值,按截断值分为AGR≥1.55和AGR<1.55高低两组,Kaplan-Meier分析两组GBM的总生存时间(overall survival time,OS)及术前AGR对GBM行辅助治疗患者预后的关系的亚组分析;COX比例风险模型单因素及多因素分析OS的预后因素。结果 GBM与对照组比较,术前TP、ALB、AGR低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC确定AGR=1.55为GBM患者预后的最佳截点;Kaplan-Meier分析两组OS比较有统计学意义(P<0.05);Cox多因素分析提示:术前KPS、肿瘤大小、切除范围、AGR、辅助治疗为影响预后的独立因素。Kaplan-Meier分析术前AGR高低对GBM行辅助治疗患者OS有统计学意义(P<0.05)。结论术前AGR比值与脑胶质母细胞瘤预后正相关,可作为潜在的预后标志物。 展开更多
关键词 清蛋白与球蛋白比值 胶质母细胞瘤 生存分析 预后
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腰大池持续引流在创伤性蛛网膜下隙出血中的应用 被引量:7
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作者 范仕兵 刘明东 李骥 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2012年第4期470-472,共3页
住院治疗的104例蛛网膜下隙出血患者随机分为常规治疗组和Medtronic EDM系统持续外引流组。治疗24h后,分别对两组患者脑积水发生率、头痛持续时间、意识障碍持续时间、颅内压和红细胞计数恢复至正常水平的时间等指标进行比较,差异均有... 住院治疗的104例蛛网膜下隙出血患者随机分为常规治疗组和Medtronic EDM系统持续外引流组。治疗24h后,分别对两组患者脑积水发生率、头痛持续时间、意识障碍持续时间、颅内压和红细胞计数恢复至正常水平的时间等指标进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。表明采用Medtronic EDM系统行腰大池持续外引流术治疗蛛网膜下隙出血有效。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血 创伤性 引流术
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多术式综合治疗顽固性癫痫38例临床分析
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作者 冉住国 张鹏 +3 位作者 范仕兵 杜江峰 刘明冬 周待令 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期2459-2460,共2页
关键词 顽固性癫痫 多术式
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