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禽流感检测方法研究进展
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作者 范万红 张彩虹 《动物医学进展》 CSCD 2007年第B08期84-87,共4页
禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广,病毒容易发生变异和重组,该病毒可以突破种间障碍感染人,具有重要的公共卫生学意义。近年来禽流感的发不仅给养禽业造成了毁灭性打击,而且该病的快速诊断与防... 禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广,病毒容易发生变异和重组,该病毒可以突破种间障碍感染人,具有重要的公共卫生学意义。近年来禽流感的发不仅给养禽业造成了毁灭性打击,而且该病的快速诊断与防治也提到了前所未有的高度。文章就近年来禽流感检测方法的发展概况进行了简单的综述,主要包括传统的病毒分离与鉴定、血清学诊断方法,以及为了满足快速检测的需要所发展起来的分子生物学检测方法。 展开更多
关键词 禽流感 检测方法 研究进展
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鲤春病毒血症病毒糖蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的初步表达 被引量:13
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作者 付峰 刘荭 +2 位作者 范万红 江育林 黄倢 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2007年第4期72-76,共5页
根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。... 根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物,在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT-PCR方法扩增该段糖蛋白基因,将所得的基因片段(517和521)克隆至穿梭载体pGAPZαA/B之GAP启动子下游位点,构建含α信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZαA-517和pGAPZαB-521经线性化后,电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株,构建分泌型表达SVCV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明,已成功构建分泌表达SVCV糖蛋白的酵母基因工程菌株,斑点印迹法进一步分析表明有目的蛋白的成功表达。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒 糖蛋白 克隆 毕赤酵母 分泌表达
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深圳出入境检验检疫局动检实验室禽流感检测情况与分析 被引量:4
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作者 秦智锋 范万红 +4 位作者 吕建强 林庆燕 陈书琨 曾少灵 毕英佐 《动物医学进展》 CSCD 2006年第1期108-110,共3页
通过深入分析深圳出入境检验检疫局动检实验室对禽流感开展的病原学检测方法和血清学检测方法,系统总结了目前动物检疫实验室禽流感检测与监测过程中常用的方法。在病原学检测方面,比较了鸡胚病毒分离鉴定方法、实时荧光PCR检测方法和... 通过深入分析深圳出入境检验检疫局动检实验室对禽流感开展的病原学检测方法和血清学检测方法,系统总结了目前动物检疫实验室禽流感检测与监测过程中常用的方法。在病原学检测方面,比较了鸡胚病毒分离鉴定方法、实时荧光PCR检测方法和乳胶凝集试验检测方法的优劣,提出了适合本实验室的病毒快速鉴定方法。鉴于生物安全的要求,对禽流感病毒检测采用施实时荧光RT-PCR,同时不断开展新的检测方法。在血清学检测方面,全面总结了在常规的HA和HI检测中的注意事项,并对近年来深圳出入境检验检疫局的血清学检测数据进行了分析。 展开更多
关键词 禽流感 抗原检测 抗体检测
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应用多重PCR同时检测牛、羊源性成分 被引量:16
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作者 宗卉 范万红 温燕辉 《中国草食动物》 2006年第6期21-23,共3页
我们选择了3对引物A,B,C。A可扩增大多数脊椎动物(哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类)细胞色素b基因上一个371bp的区段,B可扩增位于牛mtDNAD-loop区段内的一个274bp的区段,C可扩增羊mtDNA基因上一个199bp的区段。由于3对引物扩增的产... 我们选择了3对引物A,B,C。A可扩增大多数脊椎动物(哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类)细胞色素b基因上一个371bp的区段,B可扩增位于牛mtDNAD-loop区段内的一个274bp的区段,C可扩增羊mtDNA基因上一个199bp的区段。由于3对引物扩增的产物分别相差约100bp左右,可通过琼脂糖凝胶电泳分离来并观察结果,建立了基于内对照的同时检测牛、羊源性成分的三重PCR方法。 展开更多
关键词 牛羊源性成分 内对照 多重PCR
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H5N1亚型禽流感疫苗对供港鸡免疫效果评价
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作者 秦智锋 钟安清 +10 位作者 林庆燕 罗焕全 姚绵鹏 范万红 陈书琨 许保柱 阮周曦 吕建强 曾少灵 毕英佐 田国彬 《动物医学进展》 CSCD 2007年第4期39-42,共4页
针对供港活鸡饲养周期长(85日龄~105日龄),禽流感抗体滴度要求高(21/28检测样品抗体滴度需≥4log2)的特点,在原有H5N2疫苗对供港活禽免疫效果不理想的情况下,对哈尔滨兽医研究所研制的H5N1亚型禽流感疫苗进行了免疫效果评估。... 针对供港活鸡饲养周期长(85日龄~105日龄),禽流感抗体滴度要求高(21/28检测样品抗体滴度需≥4log2)的特点,在原有H5N2疫苗对供港活禽免疫效果不理想的情况下,对哈尔滨兽医研究所研制的H5N1亚型禽流感疫苗进行了免疫效果评估。结果显示,H5N1疫苗免疫效果明显高于原有的H5N2疫苗,初步推荐该禽流感灭活疫苗对供港鸡场的免疫程序为:首免7日龄~10日龄,0.3mL/只,皮下注射;二免45日龄,0.5mL/只,肌肉注射。 展开更多
关键词 H5N1亚型禽流感疫苗 免疫程序 免疫评价
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鹧鸪线粒体COII、ATPase8和3个tRNA基因序列分析及物种鉴别研究 被引量:4
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作者 王静 宗卉 +4 位作者 刘丑生 张利平 范万红 吴建平 杨联 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第4期52-56,共5页
线粒体DNA是真核生物核外遗传物质,其结构简单,发生变异的机率相对稳定,被广泛用于系统起源、进化、亲缘关系及物种鉴别的研究中。为了挖掘禽类(源性成分)鉴别的分子生物学数据,探讨线粒体不同基因发育信息及鉴别的可信度和灵敏度。本... 线粒体DNA是真核生物核外遗传物质,其结构简单,发生变异的机率相对稳定,被广泛用于系统起源、进化、亲缘关系及物种鉴别的研究中。为了挖掘禽类(源性成分)鉴别的分子生物学数据,探讨线粒体不同基因发育信息及鉴别的可信度和灵敏度。本研究扩增鹧鸪线粒体基因组中COⅡ、ATPase8区域,克隆出1138 bp片段,测序结果分析表明,在所克隆的片段中,含有COⅠ基因部分序列、tRNASer基因、tRNAAsp基因、COⅡ基因、tRNALeu基因、ATPase8基因全序列和ATPase6基因部分序列。分析COⅡ、ATPase8和tRNA基因显示其与鹌鹑、鸡、火鸡、鹅、鸵鸟5种禽类的序列均具有较高的同源性,基于它们用MEGA3.1构建系统进化树,探讨了它们所含的信息量及在鹧鸪和其它禽类鉴别方面的应用潜力,发现COⅡ比AT-Pase8和tRNA基因含有更多的鉴别信息。 展开更多
关键词 鹧鸪 线粒体DNA 克隆 序列分析 物种鉴别
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