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斑马鱼id4基因在心脏发育功能及其转基因模型构建中的作用
1
作者
芮宇梦
王宏杰
+2 位作者
何修宴
吕文超
祖尧
《生物学杂志》
北大核心
2025年第3期74-80,共7页
为探究id4基因在斑马鱼早期心脏发育中的作用,挖掘id4基因与心脏发育关键基因之间潜在的调控关系,研究首先预测分析得到id4基因的启动子序列,构建id4启动子载体并进行双萤光素酶报告实验(Luciferase)。结合Tol2转座酶系统构建其转基因...
为探究id4基因在斑马鱼早期心脏发育中的作用,挖掘id4基因与心脏发育关键基因之间潜在的调控关系,研究首先预测分析得到id4基因的启动子序列,构建id4启动子载体并进行双萤光素酶报告实验(Luciferase)。结合Tol2转座酶系统构建其转基因斑马鱼鱼系为后续的深入研究提供实验材料。启动子分析结果显示,在启动子克隆区域无甲基化CpG岛,并且有多个转录因子结合位点。双萤光素酶报告基因实验显示,转染id4启动子的293T细胞比空载对照组的萤光素酶活性有7.3倍的激活作用(P<0.0001),表明克隆的id4启动子具有很好的表达活性,并且发现心脏发育关键基因nkx2.5和gata5分别对id4启动子有显著激活和抑制作用。对注射Tol2-id4-EGFP与Tol2转座酶的斑马鱼胚胎进行观察,发现2 dpf和3 dpf时荧光表达在斑马鱼心脏区域。实验结果表明,id4基因在早期心脏发育中存在调控作用,为进一步揭示其分子网络调控机制奠定基础,同时为先天性心脏病的致病机理提供斑马鱼模型。
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关键词
ID4
斑马鱼
心脏发育
启动子
Tol2转座子
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职称材料
题名
斑马鱼id4基因在心脏发育功能及其转基因模型构建中的作用
1
作者
芮宇梦
王宏杰
何修宴
吕文超
祖尧
机构
上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心
上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室
临港新片区海洋生物医药科技创新型平台
出处
《生物学杂志》
北大核心
2025年第3期74-80,共7页
基金
国家自然科学基金项目(32170423,31501166)
临港海洋生物医药平台项目(ZY-2023-0001)。
文摘
为探究id4基因在斑马鱼早期心脏发育中的作用,挖掘id4基因与心脏发育关键基因之间潜在的调控关系,研究首先预测分析得到id4基因的启动子序列,构建id4启动子载体并进行双萤光素酶报告实验(Luciferase)。结合Tol2转座酶系统构建其转基因斑马鱼鱼系为后续的深入研究提供实验材料。启动子分析结果显示,在启动子克隆区域无甲基化CpG岛,并且有多个转录因子结合位点。双萤光素酶报告基因实验显示,转染id4启动子的293T细胞比空载对照组的萤光素酶活性有7.3倍的激活作用(P<0.0001),表明克隆的id4启动子具有很好的表达活性,并且发现心脏发育关键基因nkx2.5和gata5分别对id4启动子有显著激活和抑制作用。对注射Tol2-id4-EGFP与Tol2转座酶的斑马鱼胚胎进行观察,发现2 dpf和3 dpf时荧光表达在斑马鱼心脏区域。实验结果表明,id4基因在早期心脏发育中存在调控作用,为进一步揭示其分子网络调控机制奠定基础,同时为先天性心脏病的致病机理提供斑马鱼模型。
关键词
ID4
斑马鱼
心脏发育
启动子
Tol2转座子
Keywords
id4
zebrafish
heart development
promoter
Tol2 transposon
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
斑马鱼id4基因在心脏发育功能及其转基因模型构建中的作用
芮宇梦
王宏杰
何修宴
吕文超
祖尧
《生物学杂志》
北大核心
2025
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