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水稻草状矮化病毒外壳蛋白CP自身互作研究: 1; 作者胡昱颛程淑媛 +6 位作者王全兴杜磊张金艺高欣语刘冰蒋军喜熊桂红《江西农业大学学报》北大核心 2025年第1期32-40,共9页; 【目的】明确水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)外壳蛋白CP的自身互作,为揭示CP蛋白在RGSV侵染中的功能提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交(Y2H)技术鉴定RGSV CP与CP蛋白之间的互作。提取感染RGSV水稻叶片的总RNA,通过... 展开更多; 关键词水稻草状矮化病毒外壳蛋白载体构建酵母双杂交亚细胞定位双分子荧光互补蛋白互作; 在线阅读下载PDF 职称材料

13种杀菌剂对柑橘毛色二孢的室内毒力测定: 2; 作者彭臻袁信恩 +4 位作者韩振武胡昱颛刘冰蒋军喜熊桂红《中国南方果树》北大核心 2025年第4期25-26,32,共3页; 柑橘毛色二孢(Lasiodiplodia citricola)是近年发现在中国柑橘上引起枝干病害的菌物。为筛选出有效防治药剂,采用菌丝生长速率法,测定了13种杀菌剂对分离自江西南昌的柑橘毛色二孢菌株NCGJ18的室内毒力。结果表明,50%氟啶胺悬浮剂对菌株... 展开更多; 关键词柑橘枝干真菌病害柑橘毛色二孢杀菌剂毒力测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

水稻草状矮化病毒和水稻锯齿叶矮缩病毒的分子检测被引量：2: 3; 作者胡昱颛宋水林 +2 位作者宋东海刘玥熊桂红《生物灾害科学》 2022年第4期469-474,共6页; 【目的】明确采自福州水稻基地中水稻的病毒种类,为生产上有效防控水稻病毒病提供科学依据。【方法】从福建省福州市仓山区水稻基地采集有矮缩、黄化、分蘖增多等症状的水稻样品共9株,采用RT-PCR方法对其病原进行鉴定。根据水稻草状矮化... 展开更多; 关键词水稻草状矮化病毒水稻锯齿叶矮缩病毒 RT-PCR 病毒检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

南方水稻黑条矮缩病毒P7-2基因的克隆与原核表达: 4; 作者胡昱颛王全兴 +3 位作者张金艺宋水林蒋军喜熊桂红《生物灾害科学》 2023年第4期432-437,共6页; 【目的】为克隆获得南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的P7-2基因并实现其原核表达。【方法】利用RT-PCR技术从感染SRBSDV的水稻叶片中扩增出P7-2基因。利用Gateway重组技术将基因P7-2整合到原核... 展开更多; 关键词南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV) RT-PCR P7-2基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用酵母双杂交系统筛选本氏烟中与RGSV P5互作的蛋白被引量：2: 5; 作者熊桂红胡昱颛吴祖建《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期404-412,共9页; 【目的】水稻草状矮化病是由水稻草状矮化病毒引起的,给粮食产量造成了严重威胁。RGSV P5是该病毒的沉默抑制子,在抵抗寄主RNA沉默中发挥重要作用。筛选、鉴定与水稻草状矮缩病毒(RGSV)沉默抑制子P5互作的寄主蛋白,为揭示水稻草状矮化... 展开更多; 关键词水稻草状矮化病毒 P5蛋白酵母双杂交蛋白互作; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻草状矮化病毒外壳蛋白CP自身互作研究: 1; 作者胡昱颛程淑媛王全兴杜磊张金艺高欣语刘冰蒋军喜熊桂红; 机构江西农业大学农学院; 出处《江西农业大学学报》北大核心 2025年第1期32-40,共9页; 基金国家自然科学基金项目(31960533) 江西省自然科学基金项目(20192BAB214004)。; 文摘【目的】明确水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)外壳蛋白CP的自身互作,为揭示CP蛋白在RGSV侵染中的功能提供理论依据。【方法】利用酵母双杂交(Y2H)技术鉴定RGSV CP与CP蛋白之间的互作。提取感染RGSV水稻叶片的总RNA,通过RT-PCR扩增得到CP基因。将CP基因分别构建到酵母表达载体pGBKT7和pGADT7上,利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将酵母质粒组合pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照pGADT7-T/pGBKT7-53、阴性对照pGADT7-T/pGBKT7-Lam分别转化到酵母感受态细胞Y2HGold中,先后涂布于缺陷型培养基SD/-Leu/-Trp和SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上。通过观察酵母细胞在缺陷培养基上的生长和显色情况鉴定CP蛋白的毒性、自激活活性和自身互作关系。利用亚细胞定位和双分子荧光互补(BiFC)鉴定CP在本氏烟中的定位及互作。将CP构建到植物瞬时表达载体pEarleyGate101(101)、pEarleyGate202-YN(YN)、pEarleyGate202-YC(YC)上,并利用菌液PCR鉴定阳性克隆。将阳性克隆101-CP、YN-CP、YC-CP、空载体YN、YC分别转化到农杆菌GV3101中。将含阳性质粒101-CP的农杆菌单独注射本氏烟叶片;将含阳性质粒YN-CP/YC-CP、阴性对照YN-CP/YC、YN/YC-CP的农杆菌共注射本氏烟叶片;利用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的发光和定位。【结果】RT-PCR扩增得到CP基因,其大小为978bp。成功构建酵母表达载体pGBKT7-CP和pGADT7-CP。含质粒pGBKT7-CP/pGADT7、pGBKT7-CP/pGADT7-CP、阳性对照和阴性对照的酵母菌均能在缺陷培养基SD/-Leu/-Trp平板上生长,且含质粒pGBKT7-CP/pGADT7的酵母菌的生长情况与对照一致,说明CP蛋白对酵母菌无毒性。但仅含质粒pGBKT7-CP/pGADT7-CP的酵母菌和阳性对照可在缺陷培养基SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal平板上生长并显色,表明CP蛋白无自激活活性,且CP蛋白在酵母细胞中能够自身互作。成功构建CP基因的植物表达载体;亚细胞定位结果显示,CP蛋白主要定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜上。BiFC结果显示CP存在自身互作,且互作也定位于本氏烟细胞的细胞核和细胞膜。【结论】水稻草状矮化病是由水稻草状矮化病毒引起的,给粮食产量造成了严重威胁。RGSVCP是该病毒的外壳蛋白,可能在病毒复制、装配、侵染等过程中发挥着重要的作用。通过亚细胞定位、Y2H和BiFC鉴定了RGSVCP的定位和自身互作,为CP蛋白的功能研究提供参考,为解析RGSV的致病机制提供依据。; 关键词水稻草状矮化病毒外壳蛋白载体构建酵母双杂交亚细胞定位双分子荧光互补蛋白互作; Keywords rice grassy stunt virus coat protein vector construction yeast two-hybrid subcellular localization BiFC protein interaction; 分类号 S511 [农业科学—作物学] S435.111.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名13种杀菌剂对柑橘毛色二孢的室内毒力测定: 2; 作者彭臻袁信恩韩振武胡昱颛刘冰蒋军喜熊桂红; 机构江西农业大学农学院江西省薯芋生物学重点实验室; 出处《中国南方果树》北大核心 2025年第4期25-26,32,共3页; 基金国家自然科学基金(31460452,31960533) 江西省科技计划项目(20181ACF60017)资助。; 文摘柑橘毛色二孢(Lasiodiplodia citricola)是近年发现在中国柑橘上引起枝干病害的菌物。为筛选出有效防治药剂,采用菌丝生长速率法,测定了13种杀菌剂对分离自江西南昌的柑橘毛色二孢菌株NCGJ18的室内毒力。结果表明,50%氟啶胺悬浮剂对菌株NCGJ18的毒力强,EC_(50)值仅为0.0093μg/mL;22.5%啶氧菌酯悬浮剂的毒力弱,EC_(50)值高达147.6798μg/mL;其他11种杀菌剂的EC_(50)值介于0.0743~6.2170μg/mL之间。除22.5%啶氧菌酯悬浮剂外,对50%氟啶胺悬浮剂等其他12种杀菌剂可开展田间药效试验。; 关键词柑橘枝干真菌病害柑橘毛色二孢杀菌剂毒力测定; Keywords citrus stem fungal disease Lasiodiplodia citricola fungicide toxicity test; 分类号 S436.66 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻草状矮化病毒和水稻锯齿叶矮缩病毒的分子检测被引量：2: 3; 作者胡昱颛宋水林宋东海刘玥熊桂红; 机构江西农业大学农学院江西农业大学江西省薯芋生物学重点实验室; 出处《生物灾害科学》 2022年第4期469-474,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31960533) 江西省自然科学基金项目(20192BAB214004) 江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ170293)。; 文摘【目的】明确采自福州水稻基地中水稻的病毒种类,为生产上有效防控水稻病毒病提供科学依据。【方法】从福建省福州市仓山区水稻基地采集有矮缩、黄化、分蘖增多等症状的水稻样品共9株,采用RT-PCR方法对其病原进行鉴定。根据水稻草状矮化病RGSV P6和水稻锯齿叶矮缩病RRSV P10的基因序列分别设计一对特异性引物,提取感病水稻样品和健康水稻叶片的总RNA,并进行RT-PCR扩增和测序。【结果】在9株水稻样品中,均扩增到500 bp左右的片段,与RGSV预期片段大小一致;有1株同时扩增到750 bp左右的片段,与RRSV预期片段大小一致,而健康水稻中均未扩增到相关条带。【结论】水稻病毒田间的毒源种类比较多,也常常出现复合侵染和隐症现象,因此仅通过病害症状表现很难诊断病毒病,需借助分子生物学手段才能作出正确的诊断。RT-PCR鉴定结果表明采集的9株矮缩水稻样品均感染RGSV,有一株复合感染RRSV。水稻病毒病病原的鉴定将为水稻病害的防治提供参考依据。; 关键词水稻草状矮化病毒水稻锯齿叶矮缩病毒 RT-PCR 病毒检测; Keywords Rice grassy stunt virus Rice ragged stunt virus RT-PCR virus detection; 分类号 S432.1 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名南方水稻黑条矮缩病毒P7-2基因的克隆与原核表达: 4; 作者胡昱颛王全兴张金艺宋水林蒋军喜熊桂红; 机构江西农业大学农学院江西农业大学江西省薯芋生物学重点实验室; 出处《生物灾害科学》 2023年第4期432-437,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31960533) 江西省自然科学基金项目(20192BAB214004) 江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ170293)。; 文摘【目的】为克隆获得南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)的P7-2基因并实现其原核表达。【方法】利用RT-PCR技术从感染SRBSDV的水稻叶片中扩增出P7-2基因。利用Gateway重组技术将基因P7-2整合到原核表达载体pDEST17上,获得重组原核表达载体pDEST17-P7-2。随后将原核表达载体pDEST17-P7-2转化到原核表达菌株Rosetta中。利用IPTG诱导P7-2蛋白表达并优化其诱导条件。【结果】利用RT-PCR技术扩增得到基因P7-2,其大小为930 bp。测序结果表明获得原核表达载体pDEST17-P7-2。菌液PCR鉴定了原核表达阳性菌株。在温度为28℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L诱导表达8 h,可获得大量大小约为42 kDa含HIS标签的融合蛋白。【结论】克隆获得了SRBSDVP7-2的基因序列,实现了该基因的原核表达并探索其最佳诱导条件,为南方水稻黑条矮缩病的田间诊断、预测预报及P7-2的功能研究奠定了基础。; 关键词南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV) RT-PCR P7-2基因原核表达; Keywords SRBSDV RT-PCR P7-2 gene prokaryotic expression; 分类号 S432.1 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用酵母双杂交系统筛选本氏烟中与RGSV P5互作的蛋白被引量：2: 5; 作者熊桂红胡昱颛吴祖建; 机构江西农业大学农学院/江西省薯芋生物学重点实验室福建农林大学植物病毒研究所; 出处《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期404-412,共9页; 基金国家自然科学基金项目(31960533,31870150) 江西省自然科学基金(20192BAB214004); 文摘【目的】水稻草状矮化病是由水稻草状矮化病毒引起的,给粮食产量造成了严重威胁。RGSV P5是该病毒的沉默抑制子,在抵抗寄主RNA沉默中发挥重要作用。筛选、鉴定与水稻草状矮缩病毒(RGSV)沉默抑制子P5互作的寄主蛋白,为揭示水稻草状矮化病毒致病的分子机制提供理论基础,为该病毒病的防治提供有效策略。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与水稻草状矮化病毒P5互作的寄主蛋白。提取感染水稻草状矮化病毒的水稻叶片的总RNA。依据P5基因的CDS序列设计特异性引物。利用RT-PCR技术获得P5基因,将P5基因构建到酵母诱饵表达载体pGBKT7上,利用双酶切鉴定诱饵质粒。将诱饵载体pGBKT7、pGBKT7-P5、重组质粒pGBKT7-P5/pGADT7分别转化到酵母感受态细胞Y2H Gold中,通过观察其在缺陷培养基SD/-Trp、SD/-Leu-Trp/上的生长情况及在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上的显色情况检测诱饵质粒的毒性和自激活活性。将烟草酵母cDNA文库质粒转化到含诱饵载体pGBKT7-P5的酵母感受态细胞中,先后用不同缺陷型培养基SD/-Leu/-Trp、SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp和SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal筛选后获得阳性克隆。经酵母质粒提取、转化、测序和Blast等分子生物学方法最终获得互作蛋白的序列。【结果】RT-PCR扩增得到P5基因,其大小为576 bp。成功构建诱饵载体pGBKT7-P5。表达的诱饵蛋白P5对酵母菌没有毒性和自激活活性。诱饵蛋白P5从本氏烟酵母cDNA文库中进行大量筛选,获得15个阳性克隆,分析后最终得到7个与P5互作的本氏烟蛋白。经生物信息学分析它们分别为线粒体孔蛋白VDAC、ADP核糖基化因子GTP水解酶激活蛋白ArfGAP、囊泡突触结合蛋白Syt-2、延伸因子eEF1A、脯氨酸合成酶共转录的细菌同源蛋白PROSC、非特征蛋白C9orf78及一种未知蛋白。【结论】本研究成功筛选到7个与水稻草状矮化病毒P5互作的寄主因子。这些互作的寄主因子主要参与转运、生物或非生物胁迫、胁迫应答等生物学过程。深入研究这些互作因子将为解析寄主蛋白参与调控病毒的复制、运动、致病等分子机制提供理论基础,为水稻草状矮化病毒病的防治提供新的思路。; 关键词水稻草状矮化病毒 P5蛋白酵母双杂交蛋白互作; Keywords Rice grassy stunt virus P5 protein yeast two-hybrid proteins interaction; 分类号 S435.111.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] S432.1 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	水稻草状矮化病毒外壳蛋白CP自身互作研究	胡昱颛程淑媛王全兴杜磊张金艺高欣语刘冰蒋军喜熊桂红	《江西农业大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	13种杀菌剂对柑橘毛色二孢的室内毒力测定	彭臻袁信恩韩振武胡昱颛刘冰蒋军喜熊桂红	《中国南方果树》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	水稻草状矮化病毒和水稻锯齿叶矮缩病毒的分子检测	胡昱颛宋水林宋东海刘玥熊桂红	《生物灾害科学》	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	南方水稻黑条矮缩病毒P7-2基因的克隆与原核表达	胡昱颛王全兴张金艺宋水林蒋军喜熊桂红	《生物灾害科学》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	利用酵母双杂交系统筛选本氏烟中与RGSV P5互作的蛋白	熊桂红胡昱颛吴祖建	《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	2	在线阅读下载PDF 职称材料