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高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸 被引量:10
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作者 肖乐东 唐爱国 +2 位作者 莫喜明 罗昔波 皮兰敢 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期220-223,共4页
建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8... 建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25mol/L醋酸锌-50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min。在0~10min时间段,在激发波长和发射波长分别为365nm和480nm时检测Kyn;10min后,在激发波长和发射波长分别变换为344nm和404nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1min,线性范围为98~19 600nmol/L,最低检出浓度为50nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差(RSD)均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0min,线性范围为2.62~1 047nmol/L,最低检出浓度为0.11nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为(1.40±0.34)μmol/L和(24.22±8.67)nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 荧光检测 犬尿氨酸 犬尿喹啉酸 色氨酸 在线衍生 血清
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高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸 被引量:9
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作者 罗昔波 唐爱国 +4 位作者 皮兰敢 肖乐东 敖翔 卜艳红 王瑞 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期60-63,共4页
建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱(300mm×6.0mm,10μm),流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min,荧光检测激... 建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱(300mm×6.0mm,10μm),流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%(v/v)高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098-19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%-96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 荧光检测 犬尿氨酸 人血清
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HPLC-FD法测定重性抑郁障碍患者血清酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺 被引量:3
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作者 穆萨 李影 +1 位作者 唐爱国 肖乐东 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期161-164,共4页
目的建立一种高效液相色谱-荧光法(HPLC-FD)同时测定重性抑郁障碍(MDD)患者血清中酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)和5-羟色胺(5-HT)的含量,并探讨其应用价值。方法血清标本去蛋白质后,取上清液直接测定。色谱柱采用AtlantisC18(4.6 mm×15... 目的建立一种高效液相色谱-荧光法(HPLC-FD)同时测定重性抑郁障碍(MDD)患者血清中酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)和5-羟色胺(5-HT)的含量,并探讨其应用价值。方法血清标本去蛋白质后,取上清液直接测定。色谱柱采用AtlantisC18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为0.1 mol/L KH2PO4∶甲醇(85∶15);流速为1.0 mL/min;荧光检测器激发波长和发射波长0~4 min分别为228 nm和306 nm,4~7.5 min为278 nm和338 nm,7.5 min后为285 nm和353 nm。用建立的方法检测MDD患者和健康人对照组血清Tyr、Trp和5-HT含量。结果 Tyr、5-HT和Trp的保留时间约为3、5和9 min,3者分离良好(R>1.5);线性范围分别为0.55~275.00、0.094~47.03和0.049~49.00μmol/L;最低检测限分别为0.014、0.024和0.005μmol/L;平均回收率分别为100.6%、99.3%和97.0%;日内、日间精密度均<5%。苯丙氨酸(Phe)、犬尿氨酸(Kyn)、犬尿喹啉酸(Kyna)等物质无干扰。MDD患者血清Tyr、Trp和5-HT含量均低于健康人对照组,5-HT/Trp比值明显降低,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论建立的HPLC-FD方法简便、快速、特异性好,适用于临床检验与研究。测定血清中Tyr、Trp和5-HT含量对MDD的辅助诊断有一定价值。 展开更多
关键词 色谱法 高压液相 荧光检测 酪氨酸 色氨酸 5-羟色胺 重性抑郁障碍
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