期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系
1
作者 王楠 杜伟伟 +7 位作者 王婉洁 王悦 袁茂莎 聂雨欣 孙亚茹 刘志国 吴添文 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页
【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因... 【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因与公猪精液品质性状之间的关系奠定基础。【方法】利用CRISPOR在线网站在猪WIP 1基因g.37536832 C>A位点附近区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX458-GFP载体;通过T7E1酶切试验检测3条sgRNA活性,选择效率较高的sgRNA。构建Donor载体,并将其与sgRNA载体共同转染至ST细胞,采用流式细胞术将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的阳性细胞进行富集和单克隆细胞筛选,并对筛选出的单克隆细胞进行基因型鉴定。【结果】质粒测序结果表明,成功将3条sgRNA连接至pX458-GFP载体上;T7E1酶切结果显示,转染pX458-GFP-sgRNA1和pX458-GFP-sgRNA2质粒组产生了切割,效率分别为24%和27%,而转染pX458-GFP-sgRNA3质粒组未检测到切割,因此选择pX458-GFP-sgRNA2质粒进行试验。成功构建Donor载体,并将pX458-GFP-sgRNA2和Donor载体共转染至ST细胞。基因型鉴定结果显示,获得的269株单克隆中有205株细胞发生了基因编辑,基因编辑效率为76%,其中9株为WIP 1基因g.37536832 C>A位点纯合突变的ST细胞,精确突变效率为3%。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得了WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系,为深入研究WIP 1基因对公猪精液品质的影响提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 WIP 1基因 ST细胞系
在线阅读 下载PDF
普光气田桁架施工技术 被引量:3
2
作者 张锡洲 聂雨欣 +1 位作者 于会景 王晶 《油气田地面工程》 北大核心 2010年第1期62-63,共2页
普光气田集输管网沿线通过冲沟、河流等地段,因此在管道的设计中使用桁架跨越这些地段。桁架施工的实践应用证明,该技术可行,施工安全可靠,易操作,费用成本低,工艺一次成功率100%,单项工程合格率100%,大大节约了资金,缩短了施工工期,取... 普光气田集输管网沿线通过冲沟、河流等地段,因此在管道的设计中使用桁架跨越这些地段。桁架施工的实践应用证明,该技术可行,施工安全可靠,易操作,费用成本低,工艺一次成功率100%,单项工程合格率100%,大大节约了资金,缩短了施工工期,取得了较好的经济效益及社会效益。 展开更多
关键词 桁架 施工技术 应用
在线阅读 下载PDF
LWB型混输泵在油田的使用 被引量:1
3
作者 高敏 高峰 +1 位作者 杨明飞 聂雨欣 《石油矿场机械》 2005年第2期87-88,共2页
为降低油田部分井站集输管线的回压,提高抽油泵泵效,延长检泵周期,减少管线穿孔,提高原油产量,使用LWB型混输泵改造油气集输系统。文章介绍了LWB型混输泵的结构、工作原理及性能特点,详述了现场使用情况及其经济效益。
关键词 LWB型混输泵 结构 原理 特点 应用
在线阅读 下载PDF
降低异戊烷酸值的工艺方法与措施 被引量:1
4
作者 刘光 王军 +2 位作者 张修申 张树显 聂雨欣 《油气田地面工程》 北大核心 2004年第6期50-50,共1页
关键词 异戊烷 乙烯 酸值 制冷剂 精馏塔 发泡剂
在线阅读 下载PDF
抗战时期贵州茶政及其影响研究 被引量:2
5
作者 马国君 聂雨欣 《古今农业》 2021年第1期66-75,107,共11页
贵州省境温暖湿润,素号山国,历史上茶业经济发达。1840年后,由于列强入侵,社会动荡,茶树多被放置或采伐,导致茶叶产量顿减。民国时期抗战军兴,茶叶成了政府维护国家安全和换取外汇的重要输出产品,在此前提下,民国政府积极要求发展茶叶... 贵州省境温暖湿润,素号山国,历史上茶业经济发达。1840年后,由于列强入侵,社会动荡,茶树多被放置或采伐,导致茶叶产量顿减。民国时期抗战军兴,茶叶成了政府维护国家安全和换取外汇的重要输出产品,在此前提下,民国政府积极要求发展茶叶。贵州省府采取了促进茶树栽培、改良制茶法,开办茶叶讲习所,以及与高校院所及研究机构合作等积极的茶业举措,一定程度促进了黔茶的发展,使曾经的荒山变成了金山银山,为贵州茶业发展留下了珍贵的历史文献资料,故系统梳理这些文献并总结其间的经验教训,对今天贵州民族山区经济发展和生态建设有着积极意义。 展开更多
关键词 民国时期 贵州茶政 茶业 民族山区
在线阅读 下载PDF
Zebularine和Scriptaid对绵羊卵丘细胞重编程的影响
6
作者 刘梦蝶 李志斌 +4 位作者 房晓欢 王卓 聂雨欣 石霖静 李俊杰 《黑龙江动物繁殖》 2020年第5期14-18,共5页
为研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid和DNA甲基转移酶抑制剂Zebularine对卵丘细胞重编程的影响,试验分别采用5 nmol/L Zebularine、0.2μmol/L Scriptaid单独或联合处理绵羊卵丘细胞12 h,用MTT法检测两种药物对卵丘细胞增殖的影响,... 为研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid和DNA甲基转移酶抑制剂Zebularine对卵丘细胞重编程的影响,试验分别采用5 nmol/L Zebularine、0.2μmol/L Scriptaid单独或联合处理绵羊卵丘细胞12 h,用MTT法检测两种药物对卵丘细胞增殖的影响,用荧光定量PCR法检测Oct4、Sox2、GDF9、BMP15和DNMT1基因的表达情况。结果表明:Zebularine和Scriptaid联合处理和单独处理卵丘细胞后增殖率差异不显著(P>0.05);单独Zebularine或Scriptaid处理卵丘细胞后Oct4表达量显著增加(P<0.05),联合处理对Oct4表达量无影响(P>0.05);而对于转化生长因子BMP15、GDF9和多潜能基因Sox2,除Zebularine单独处理的卵丘细胞GDF9表达量显著增加(P<0.05)外,其他处理间均差异不显著(P>0.05);两种药物单独及联合处理后卵丘细胞DNMT1表达量均显著降低(P<0.05)。说明Zebularine和Scriptaid单独及联合处理绵羊卵丘细胞对细胞增殖无显著影响(P>0.05),但可提高多潜能基因(Oct4、Sox2)、细胞分化相关基因(BMP15、GDF9)表达量,降低DNMT1基因表达量。 展开更多
关键词 绵羊 卵丘细胞 ZEBULARINE Scriptaid 细胞重编程
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部