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酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白
被引量：
3
1
作者
李香雨
于漫
+4 位作者
聂梓陶
陈彦如
王嘉会
韩喜彬
赵微
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期491-495,共5页
目的筛选人星状病毒(HAstV)衣壳蛋白ORF2与宿主细胞互作的蛋白质。方法构建HAstV ORF2蛋白的重组载体pGBKT77-ORF2,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从人结肠癌细胞Caco-2 cDNA文库中筛选与ORF2蛋白互作的蛋白。以HAstV-1病毒株的...
目的筛选人星状病毒(HAstV)衣壳蛋白ORF2与宿主细胞互作的蛋白质。方法构建HAstV ORF2蛋白的重组载体pGBKT77-ORF2,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从人结肠癌细胞Caco-2 cDNA文库中筛选与ORF2蛋白互作的蛋白。以HAstV-1病毒株的衣壳蛋白为模板,通过PCR扩增定向克隆构建诱饵载体pGBKT7-ORF2。通过菌落PCR和测序验证质粒在酵母细胞Y2H中正确表达。明确ORF2蛋白对酵母细胞无毒性,无自激活活性。将含有pGBKT7-ORF2的酵母菌株与靶标Caco-2 cDNA文库进行杂交、筛选、验证及测序。结果获得15个与ORF2互作的宿主蛋白,分别为FN1、COMMD1、RASAL2、BMP4、RPL11、RBM8A、SUMO1、WWC2、NGDN、HINFP、RPS7、IMMT、UBE2I、EEF1A1和FTL。结论成功筛选出15个与HAstV ORF2互作的蛋白,为研究星状病毒与宿主相互作用、ORF2蛋白功能及病毒的致病机制奠定了基础。
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关键词
星状病毒
酵母双杂交
ORF2蛋白
蛋白互作
cDNA文库筛选
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职称材料
题名
酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白
被引量：
3
1
作者
李香雨
于漫
聂梓陶
陈彦如
王嘉会
韩喜彬
赵微
机构
锦州医科大学基础医学院实验动物学教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期491-495,共5页
基金
国家自然科学基金(81201285)
辽宁省自然科学基金(20170540346)
+1 种基金
辽宁省教育厅青年育苗项目(JYTQN201925)
辽宁省大学生创新创业计划(201810160004)。
文摘
目的筛选人星状病毒(HAstV)衣壳蛋白ORF2与宿主细胞互作的蛋白质。方法构建HAstV ORF2蛋白的重组载体pGBKT77-ORF2,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从人结肠癌细胞Caco-2 cDNA文库中筛选与ORF2蛋白互作的蛋白。以HAstV-1病毒株的衣壳蛋白为模板,通过PCR扩增定向克隆构建诱饵载体pGBKT7-ORF2。通过菌落PCR和测序验证质粒在酵母细胞Y2H中正确表达。明确ORF2蛋白对酵母细胞无毒性,无自激活活性。将含有pGBKT7-ORF2的酵母菌株与靶标Caco-2 cDNA文库进行杂交、筛选、验证及测序。结果获得15个与ORF2互作的宿主蛋白,分别为FN1、COMMD1、RASAL2、BMP4、RPL11、RBM8A、SUMO1、WWC2、NGDN、HINFP、RPS7、IMMT、UBE2I、EEF1A1和FTL。结论成功筛选出15个与HAstV ORF2互作的蛋白,为研究星状病毒与宿主相互作用、ORF2蛋白功能及病毒的致病机制奠定了基础。
关键词
星状病毒
酵母双杂交
ORF2蛋白
蛋白互作
cDNA文库筛选
Keywords
astrovirus
yeast two-hybrid
ORF2 protein
protein interaction
screening of cDNA library
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
酵母双杂交筛选与星状病毒衣壳蛋白ORF2互作的宿主蛋白
李香雨
于漫
聂梓陶
陈彦如
王嘉会
韩喜彬
赵微
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
3
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