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题名小鼠胚胎干细胞克隆形成和传代的影响因素
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作者
孔慧娟
孙莹璞
耿嘉暄
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机构
郑州大学第一附属医院生殖医学中心
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出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2012年第1期36-40,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目30771105
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文摘
目的:探讨昆明小鼠胚胎干细胞(ESC)分离后克隆形成和细胞传代的几种影响因素,对其特性作初步鉴定。方法:对比超排卵和自然受孕2种囊胚获取方法、囊胚培养液和高糖DMEM培养液2种培养液对其克隆形成和细胞传代的影响。对贴壁后形成的原代ESC克隆进行评分。稳定传代的一株ESC进行鉴定。结果:超排卵组、自然受孕组的内细胞团形成率(64.9%vs68.2%)和原代ECS克隆形成率(10.1%vs14.5%)比较,差异均无统计学意义(χ2=0.345和1.385,P=0.557和0.239)。囊胚培养液组24h囊胚孵出率明显高于DMEM培养液组(56.8%vs17.1%)(χ2=33.026,P=0.001),原代ESC克隆形成率明显低于DMEM培养液组(35.2%vs15.9%)(χ2=9.021,P=0.002)。ICM的评分与ESC克隆传代能力相关(r=0.531,P<0.001),直径70～100μm、周边规则、隆起明显的ICM,ESC克隆传代持久。结论:高糖DMEM培养液对克隆的分离和传代有利。对ICM贴壁后形成的ESC克隆进行评分有助于确定挑选克隆传代的时机。
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关键词
小鼠
胚胎干细胞
培养液
内细胞团
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Keywords
mouse
embryonic stem cell
culture medium
inner cell mass
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分类号
R321
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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