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应用巢式PCR对猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法
1
作者
刘龑
徐蕴博
+4 位作者
张琦
徐倩倩
尹智
刘忠华
翁晓刚
《东北农业大学学报》
北大核心
2025年第4期47-55,共9页
为建立1种准确可靠的猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法,将不同数量细胞样本进行DNA提取纯化后进行PCR扩增,结果表明:当使用纯化的DNA模板进行1轮PCR扩增时,SRY/ZFX引物可在10个细胞中有效扩增,而AMEL和SUSY/SUS12S引物仅在50个细胞以上有...
为建立1种准确可靠的猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法,将不同数量细胞样本进行DNA提取纯化后进行PCR扩增,结果表明:当使用纯化的DNA模板进行1轮PCR扩增时,SRY/ZFX引物可在10个细胞中有效扩增,而AMEL和SUSY/SUS12S引物仅在50个细胞以上有效。与纯化DNA模板相比,使用细胞裂解液进行PCR扩增的效果更优,但单次PCR中SUSY/SUS12S和AMEL引物在1或10个细胞样本中未检测到特异性条带。通过设计巢式PCR引物,成功在单细胞中扩增目标基因,特别是AMEL引物效果最佳,并通过Y染色体DNA-FISH检测验证PCR结果准确性。此外,通过在体外受精囊胚中测试建立的巢式PCR方法,表现出良好特异性。
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关键词
猪
胚胎
单细胞
巢式PCR
性别鉴定
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职称材料
重组人碱性磷酸酶表达及其调节人白细胞释放TNF-α活性研究
被引量：
2
2
作者
惠觅宙
秦璐楠
+6 位作者
高辰哲
薄乐
刘天奇
吴书音
韩建春
翁晓刚
双宝
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期53-60,共8页
为获得高纯度糖化蛋白人肠碱性磷酸酶(IAP)并研究其新生物活性和药学意义,采用黑曲菌和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达嵌合人肠碱性磷酸酶(recAP),获得稳定表达细胞株和高纯度recAP。recAP呈剂量依赖型灭活内毒素(LPS),使致炎物质ATP脱磷产...
为获得高纯度糖化蛋白人肠碱性磷酸酶(IAP)并研究其新生物活性和药学意义,采用黑曲菌和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达嵌合人肠碱性磷酸酶(recAP),获得稳定表达细胞株和高纯度recAP。recAP呈剂量依赖型灭活内毒素(LPS),使致炎物质ATP脱磷产生终产物腺苷。利用新鲜提取的人类白细胞和脐静脉内皮细胞系(HUVECs)建立抗炎生物活性模型。ELISA结果表明,recAP在LPS存在或不存在情况下均明显抑制TNF-α分泌,ATP脱磷终产物腺苷明显抑制TNF-α分泌。非LPS依赖的recAP抑制人类白细胞TNF-α分泌是一种碱性磷酸酶新活性测定方法。
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关键词
肠碱性磷酸酶
炎症
LPS
ATP
TNF-Α
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职称材料
巴马小型猪高脂诱导模型建立及其肝脏转录组学研究
3
作者
尹智
蔡铭铭
+3 位作者
翁晓刚
牟彦双
刘忠华
张贵学
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期36-44,共9页
利用高脂饲料诱导建立巴马小型猪代谢疾病模型并分析肝脏转录组变化。选取1月龄巴马小型猪24头,随机分为对照组与高脂诱导组,对照组饲喂普通饲料,高脂诱导组饲喂含2.0%胆固醇饲料,定时监测体重、血常规及生化指标,6个月后试验结束,作心...
利用高脂饲料诱导建立巴马小型猪代谢疾病模型并分析肝脏转录组变化。选取1月龄巴马小型猪24头,随机分为对照组与高脂诱导组,对照组饲喂普通饲料,高脂诱导组饲喂含2.0%胆固醇饲料,定时监测体重、血常规及生化指标,6个月后试验结束,作心脏冠状动脉造影、器官组织学检测及肝脏转录组分析。结果表明,高脂诱导组个体饲喂4个月体重显著高于对照组,诱导期后血液生化指标中甘油三酯显著高于对照组,饲喂6个月时冠状动脉造影及器官组织切片未见显著病变,肝脏转录组分析显示高脂诱导组与对照组相比有2 468个差异表达基因,主要与代谢途径相关。为期6个月的高脂饲喂未致巴马小型猪明显代谢性疾病及心血管病变,但血液甘油三酯水平显著升高,显著影响肝脏代谢途径相关基因表达。文章系统探讨高脂诱导模型,结合血液生化、组织学、冠脉造影及肝脏转录组分析,进一步获得代谢通路相关潜在标记基因,为建立理想小型猪代谢疾病模型提供参考。
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关键词
巴马小型猪
高脂诱导
代谢疾病
转录组分析
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职称材料
题名
应用巢式PCR对猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法
1
作者
刘龑
徐蕴博
张琦
徐倩倩
尹智
刘忠华
翁晓刚
机构
东北农业大学生命科学学院
北方寒区猪智能化繁育与养殖教育部工程研究中心(东北农业大学)
出处
《东北农业大学学报》
北大核心
2025年第4期47-55,共9页
基金
国家自然科学基金项目(32072733)。
文摘
为建立1种准确可靠的猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法,将不同数量细胞样本进行DNA提取纯化后进行PCR扩增,结果表明:当使用纯化的DNA模板进行1轮PCR扩增时,SRY/ZFX引物可在10个细胞中有效扩增,而AMEL和SUSY/SUS12S引物仅在50个细胞以上有效。与纯化DNA模板相比,使用细胞裂解液进行PCR扩增的效果更优,但单次PCR中SUSY/SUS12S和AMEL引物在1或10个细胞样本中未检测到特异性条带。通过设计巢式PCR引物,成功在单细胞中扩增目标基因,特别是AMEL引物效果最佳,并通过Y染色体DNA-FISH检测验证PCR结果准确性。此外,通过在体外受精囊胚中测试建立的巢式PCR方法,表现出良好特异性。
关键词
猪
胚胎
单细胞
巢式PCR
性别鉴定
Keywords
porcine
embryo
single cell
nested PCR
sex identification
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
S828 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
重组人碱性磷酸酶表达及其调节人白细胞释放TNF-α活性研究
被引量：
2
2
作者
惠觅宙
秦璐楠
高辰哲
薄乐
刘天奇
吴书音
韩建春
翁晓刚
双宝
机构
东北农业大学生命科学学院
东北农业大学食品学院
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期53-60,共8页
基金
黑龙江省自然科学基金面上项目(C2017035)。
文摘
为获得高纯度糖化蛋白人肠碱性磷酸酶(IAP)并研究其新生物活性和药学意义,采用黑曲菌和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达嵌合人肠碱性磷酸酶(recAP),获得稳定表达细胞株和高纯度recAP。recAP呈剂量依赖型灭活内毒素(LPS),使致炎物质ATP脱磷产生终产物腺苷。利用新鲜提取的人类白细胞和脐静脉内皮细胞系(HUVECs)建立抗炎生物活性模型。ELISA结果表明,recAP在LPS存在或不存在情况下均明显抑制TNF-α分泌,ATP脱磷终产物腺苷明显抑制TNF-α分泌。非LPS依赖的recAP抑制人类白细胞TNF-α分泌是一种碱性磷酸酶新活性测定方法。
关键词
肠碱性磷酸酶
炎症
LPS
ATP
TNF-Α
Keywords
intestinal alkaline phosphatase
inflammation
LPS
ATP
TNF-α
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
巴马小型猪高脂诱导模型建立及其肝脏转录组学研究
3
作者
尹智
蔡铭铭
翁晓刚
牟彦双
刘忠华
张贵学
机构
东北农业大学动物科学技术学院
东北农业大学生命科学学院
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期36-44,共9页
基金
转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08009003-006-008)
国家重点基础研究发展计划项目(2011CBA01006)
文摘
利用高脂饲料诱导建立巴马小型猪代谢疾病模型并分析肝脏转录组变化。选取1月龄巴马小型猪24头,随机分为对照组与高脂诱导组,对照组饲喂普通饲料,高脂诱导组饲喂含2.0%胆固醇饲料,定时监测体重、血常规及生化指标,6个月后试验结束,作心脏冠状动脉造影、器官组织学检测及肝脏转录组分析。结果表明,高脂诱导组个体饲喂4个月体重显著高于对照组,诱导期后血液生化指标中甘油三酯显著高于对照组,饲喂6个月时冠状动脉造影及器官组织切片未见显著病变,肝脏转录组分析显示高脂诱导组与对照组相比有2 468个差异表达基因,主要与代谢途径相关。为期6个月的高脂饲喂未致巴马小型猪明显代谢性疾病及心血管病变,但血液甘油三酯水平显著升高,显著影响肝脏代谢途径相关基因表达。文章系统探讨高脂诱导模型,结合血液生化、组织学、冠脉造影及肝脏转录组分析,进一步获得代谢通路相关潜在标记基因,为建立理想小型猪代谢疾病模型提供参考。
关键词
巴马小型猪
高脂诱导
代谢疾病
转录组分析
Keywords
Bama minipig
high fat induction
metabolic disease
transcriptome analysis
分类号
R-332 [医药卫生]
R544.1 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用巢式PCR对猪胚胎微量细胞性别的鉴定方法
刘龑
徐蕴博
张琦
徐倩倩
尹智
刘忠华
翁晓刚
《东北农业大学学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
重组人碱性磷酸酶表达及其调节人白细胞释放TNF-α活性研究
惠觅宙
秦璐楠
高辰哲
薄乐
刘天奇
吴书音
韩建春
翁晓刚
双宝
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
巴马小型猪高脂诱导模型建立及其肝脏转录组学研究
尹智
蔡铭铭
翁晓刚
牟彦双
刘忠华
张贵学
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
0
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职称材料
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