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一株无内源质粒短乳杆菌的电转化条件
被引量：
1
1
作者
杨涓
吕常江
+5 位作者
罗麦琪
胡升
黄俊
雷引林
王进波
梅乐和
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期584-590,共7页
以质粒pMG36e,pNZ8148,pNZ9530和无内源质粒的短乳杆菌（Lactobacillus brevis CGMCC1306）为材料,通过对短乳杆菌感受态制备及电转化过程中各影响因素的考察,建立了最佳的电转化实验条件。结果表明：添加质量分数1%甘氨酸作为细胞壁弱...
以质粒pMG36e,pNZ8148,pNZ9530和无内源质粒的短乳杆菌（Lactobacillus brevis CGMCC1306）为材料,通过对短乳杆菌感受态制备及电转化过程中各影响因素的考察,建立了最佳的电转化实验条件。结果表明：添加质量分数1%甘氨酸作为细胞壁弱化剂,于MRS培养基中37℃静置培养至对数中期（OD600=0.4-0.6）,以0.5 mol/L蔗糖、5 mmol/L KH2PO4、0.5 mmol/L MgCl2（pH 7.4）为洗涤剂,以1 mol/L蔗糖、3 mmol/L MgCl2为电击缓冲液制成感受态细胞,加入400 ng的质粒DNA,调节电场强度为10 kV/cm,电击3.5 ms,于含有0.3 mol/L蔗糖的MRS培养基中复苏培养3 h,获得最佳转化率。为外源基因电转化短乳杆菌提供了实验依据,也为短乳杆菌遗传改造及基因功能探究奠定了实践基础。
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关键词
短乳杆菌
电转化
质粒
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职称材料
题名
一株无内源质粒短乳杆菌的电转化条件
被引量：
1
1
作者
杨涓
吕常江
罗麦琪
胡升
黄俊
雷引林
王进波
梅乐和
机构
浙江大学宁波理工学院生物与化学工程分院
浙江大学化学工程与生物工程学院
浙江科技学院生物与化学工程分院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期584-590,共7页
基金
国家自然科学基金项目(21176220
31470793)
+2 种基金
浙江省自然科学基金项目(Z13B060008)
宁波市自然科学基金项目(2013A610087
2011A610023)
文摘
以质粒pMG36e,pNZ8148,pNZ9530和无内源质粒的短乳杆菌（Lactobacillus brevis CGMCC1306）为材料,通过对短乳杆菌感受态制备及电转化过程中各影响因素的考察,建立了最佳的电转化实验条件。结果表明：添加质量分数1%甘氨酸作为细胞壁弱化剂,于MRS培养基中37℃静置培养至对数中期（OD600=0.4-0.6）,以0.5 mol/L蔗糖、5 mmol/L KH2PO4、0.5 mmol/L MgCl2（pH 7.4）为洗涤剂,以1 mol/L蔗糖、3 mmol/L MgCl2为电击缓冲液制成感受态细胞,加入400 ng的质粒DNA,调节电场强度为10 kV/cm,电击3.5 ms,于含有0.3 mol/L蔗糖的MRS培养基中复苏培养3 h,获得最佳转化率。为外源基因电转化短乳杆菌提供了实验依据,也为短乳杆菌遗传改造及基因功能探究奠定了实践基础。
关键词
短乳杆菌
电转化
质粒
Keywords
Lactobacillus brevis, electrotransformation, plasmids
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一株无内源质粒短乳杆菌的电转化条件
杨涓
吕常江
罗麦琪
胡升
黄俊
雷引林
王进波
梅乐和
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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