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补阳还五汤对全脑缺血模型大鼠再灌注不同时点皮质神经细胞钙超载的影响 被引量:20
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作者 关莉 闫福曼 +4 位作者 张哓东 苏文 李小英 周乐全 罗荣敬 《安徽中医学院学报》 CAS 2008年第4期45-49,共5页
目的:采用膜片钳技术和离子图像分析技术,同步观察补阳还五汤预干预对全脑缺血大鼠皮质神经细胞L型Ca2+通道及细胞内Ca2+浓度的影响,探讨Ca2+信号异常参与缺血性神经细胞损伤的机制及补阳还五汤抗脑缺血的分子机制,为临床应用本方防治... 目的:采用膜片钳技术和离子图像分析技术,同步观察补阳还五汤预干预对全脑缺血大鼠皮质神经细胞L型Ca2+通道及细胞内Ca2+浓度的影响,探讨Ca2+信号异常参与缺血性神经细胞损伤的机制及补阳还五汤抗脑缺血的分子机制,为临床应用本方防治缺血性脑病提供理论基础,并为中药复方研究探索新的思路和方法。方法:参照改良的Pulsinelli四血管闭塞法复制全脑缺血大鼠模型,缺血后大鼠分别在存活2,12,24,48及72 h后进行皮质神经细胞急性分离,负载荧光指示剂Fura-2/AM,用钙离子成像系统检测单个神经细胞内Ca2+浓度。单通道电流经EPC-9膜片钳放大器放大,用Pulsefit+Pulse采集至计算机。用分析软件TAC进行测量。结果:补阳还五汤预干预除再灌注12 h外,可显著降低其他各时点大脑皮质神经细胞内Ca2+浓度,对缺血再灌后两次Ca2+堆积均表现明显的抑制作用。补阳还五汤再灌注72 h,皮质神经细胞L型Ca2+通道平均开放时间显著降低,再灌注2 h,皮质神经细胞L型Ca2+通道开放概率显著降低。结论:降低缺血再灌注不同时点皮质神经细胞内Ca2+浓度及在缺血再灌注不同时点分别降低L型Ca2+通道开放概率和开放时间是补阳还五汤抗脑缺血的重要机制。补阳还五汤预干预对缺血性神经细胞损伤的预防和治疗有非常积极的意义。 展开更多
关键词 脑卒中 缺血再灌注 全脑皮质 神经细胞 钙离子信号 补阳还五汤
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TGF-β_1对糖尿病肾病早期ECM沉积影响的实验研究 被引量:3
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作者 苏宁 罗荣敬 +4 位作者 邝枣园 邢婷文 何彦丽 朱锦锦 陈晓瑜 《中国实用医药》 2007年第31期57-60,共4页
目的研究TGF-β1对糖尿病肾病早期ECM沉积的影响。方法制作清洁级雄性SD大鼠DN模型,饲养14周后取肾脏进行HE染色、PAS染色,用免疫组化方法检测FN、IV-C含量及TGF-β1活性,并进行图像分析;同时设立正常对照组。结果①DN组大鼠肾小管TGF-... 目的研究TGF-β1对糖尿病肾病早期ECM沉积的影响。方法制作清洁级雄性SD大鼠DN模型,饲养14周后取肾脏进行HE染色、PAS染色,用免疫组化方法检测FN、IV-C含量及TGF-β1活性,并进行图像分析;同时设立正常对照组。结果①DN组大鼠肾小管TGF-β1高表达,与正常组比较有较明显的区别;②DN组大鼠镜下见肾小球体积增大,部分以基底膜增厚及系膜物质增多为主,部分以毛细血管管腔扩张为主,肾小管上皮细胞水肿,间质少量纤维组织增生伴炎细胞浸润;③DN组大鼠PAS染色肾小球阳性物质含量明显增加,与正常组比较差别有统计学意义,P<0.05;④DN组肾小球内FN阳性表达高于正常组,差别有统计学意义,P<0.05;⑤DN组肾小管IV-C强阳性表达,与正常组比较差别有统计学意义,P<0.05。结论DN早期肾小球ECM增加主要与FN大量沉积有关,肾小管ECM增加主要与IV-C大量沉积有关。TGF-β1在肾小管区域的高表达是促使IV-C沉积的主要原因,而肾小球FN的增加可能还有TGF-β1以外的促ECM沉积因素的参与。 展开更多
关键词 糖尿病肾病早期 大鼠 肾小管 肾单位 DN 近曲小管 TGF ECM 肾疾病 肾小球硬化 毛细血管 实验研究
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葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响
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作者 唐瑜 罗荣敬 周乐全 《四川生理科学杂志》 2006年第2期60-62,共3页
目的:观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道的作用。方法:采用酶加机械分离的方法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单... 目的:观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道的作用。方法:采用酶加机械分离的方法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果:低浓度葛根素(1.2,2.4mmol·L-1)对L型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8,9.6mmol·L-1时,L型钙离子通道平均开放时间由对照组的11.773±4.838ms分别减少到7.948±2.513ms和4.533±0.828ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol·L-1时,通道平均开放时间降至3.042±0.792ms(P<0.05)。当葛根素达到一定浓度(4.8,9.6mmol·L-1)时,通道开放概率由对照组的0.0011±0.0001分别减小到0.00053±0.00018和0.00032±0.00013(P<0.05),随着浓度的进一步增加(19.2mmol·L-1),开放概率降至0.00021±0.00009(P<0.05)。总体而言,葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。结论:葛根素可以抑制大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道,减少通道开放时间,降低通道开放概率,并成浓度依赖性。提示临床上葛根素治疗缺血性中风可能与其抑制神经细胞L型钙离子通道的开放,防止钙超载有关。 展开更多
关键词 葛根素 L-型钙离子通道 膜片钳单通道记录 海马CA1区锥体元细胞
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