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动物疫苗及其合理使用(一) 被引量:5
1
作者 罗满林 邵定勇 +1 位作者 裴仉福 陈瑞爱 《中国兽药杂志》 2009年第6期55-58,共4页
关键词 动物疫苗 合理使用 免疫学理论 机体免疫系统 细菌疫苗 病毒疫苗 动物传染病 特异性免疫
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动物疫苗的科学免疫(二) 被引量:2
2
作者 罗满林 邵定勇 +1 位作者 裴仉福 陈瑞爱 《中国兽药杂志》 2009年第7期57-60,共4页
关键词 动物疫苗 科学免疫 产品使用说明书 免疫程序 疫苗接种 疫病种类 流行情况 免疫计划
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细菌菌蜕的研究进展 被引量:1
3
作者 罗满林 裴党帅 徐家华 《中国兽药杂志》 2010年第11期50-54,共5页
菌蜕是通过基因灭活的方法,利用噬菌体PhiX174的裂解蛋白E在革兰氏阴性菌细胞膜上形成一个跨膜孔道结构使其胞质内容物由孔道排出所形成的细菌空壳结构。这种空壳结构因其保留了细菌的完整结构,不仅可用作疫苗制备的抗原物质,还可作为... 菌蜕是通过基因灭活的方法,利用噬菌体PhiX174的裂解蛋白E在革兰氏阴性菌细胞膜上形成一个跨膜孔道结构使其胞质内容物由孔道排出所形成的细菌空壳结构。这种空壳结构因其保留了细菌的完整结构,不仅可用作疫苗制备的抗原物质,还可作为药物、异源抗原、核酸等的递送载体,具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 细菌 菌蜕 疫苗 递送载体
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细胞因子在疫苗中的免疫增强作用 被引量:1
4
作者 罗满林 唐明森 鲁俊鹏 《中国兽药杂志》 2010年第4期55-58,共4页
细胞因子是免疫活性细胞和其它细胞分泌的具有多种生物活性的多肽或蛋白质,这些细胞因子是重要的信息传递物质,特别在免疫、炎症和造血系统等生物学反应过程中具有重要的作用。细胞因子用于重组疫苗上的研究已成为生物学研究中最活跃的... 细胞因子是免疫活性细胞和其它细胞分泌的具有多种生物活性的多肽或蛋白质,这些细胞因子是重要的信息传递物质,特别在免疫、炎症和造血系统等生物学反应过程中具有重要的作用。细胞因子用于重组疫苗上的研究已成为生物学研究中最活跃的领域之一。在基因工程疫苗研制中,常把细胞因子基因(如IL-2、IL-1等)和保护抗原基因连接在一起,构成融合蛋白,以增强疫苗的抗体产生和细胞免疫水平。以干扰素和白细胞介素为例,叙述了细胞因子在免疫增强剂和免疫治疗剂、构建新型基因工程苗等方面的主要研究进展。 展开更多
关键词 细胞因子 疫苗 免疫水平
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副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立 被引量:14
5
作者 朱杰仪 谭实勇 +4 位作者 曾小娜 刘健 刘中勇 朱道中 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期204-207,共4页
本研究旨在建立检测副猪嗜血杆菌(Hps)的新方法。根据GenBank上发表的不同血清型Hps的16S rRNA序列,找出高度保守区域,再针对该区域设计了4条特异性引物,建立了Hps环介导等温扩增法(LAMP)。试验结果表明,LAMP方法在恒温(63℃)条件下特... 本研究旨在建立检测副猪嗜血杆菌(Hps)的新方法。根据GenBank上发表的不同血清型Hps的16S rRNA序列,找出高度保守区域,再针对该区域设计了4条特异性引物,建立了Hps环介导等温扩增法(LAMP)。试验结果表明,LAMP方法在恒温(63℃)条件下特异性强,比PCR方法敏感100倍,鉴于目前副猪嗜血杆菌分离培养和鉴定的复杂性,LAMP操作简单、成本低,整个扩增反应在1 h内即可完成,为检测Hps提供了一个快速简便的分子生物学方法。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 16S RRNA 环介导等温扩增技术
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牛结核病两种检测方法的比较 被引量:4
6
作者 鲁俊鹏 罗满林 +2 位作者 邹潍力 李立霞 李瑞亭 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第10期30-31,共2页
关键词 牛结核病 检测 变态反应 结核菌素 迟发性 标准方法 国际贸易 诱导产生
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猪瘟病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 被引量:10
7
作者 刘中勇 曾小娜 +4 位作者 朱道中 房红莹 蒋启荣 吴志强 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期71-74,共4页
本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的存在,检测PRV、PRRSV、PCV-2等病... 本研究设计了4条针对猪瘟病毒6个位点的特异性引物,建立了一种灵敏、特异、快速的猪瘟病毒体外等温扩增(RT-LAMP)检测方法,所建立的方法能够特异地检测出猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的存在,检测PRV、PRRSV、PCV-2等病毒均为阴性;灵敏度高,所建立的CSFV-RT-LAMP方法灵敏度为10-5,总RNA的检测阈值约为1pg;反应快速,整个扩增反应可在1h内完成;操作简单,不需要PCR仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察及电泳检测。本试验为猪瘟的现场快速检测提供更加简便、快速的方法,可以满足基层检疫的需要。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 环介导等温扩增技术
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副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量:9
8
作者 郑念广 谭实勇 +3 位作者 何玲 夏芳 高娟 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期185-188,共4页
本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10μg/mL,37℃包被2h;封闭液选择含20g/L脱脂奶粉... 本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10μg/mL,37℃包被2h;封闭液选择含20g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30min;底物显色时间为15min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 抗体 间接酶联免疫吸附试验
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猪圆环病毒2型疫苗研究进展 被引量:6
9
作者 黄红亮 邵定勇 +1 位作者 罗满林 陈瑞爱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期90-95,共6页
猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄~12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为... 猪圆环病毒2型(PCV-2)感染是一种新发现的猪传染病,以5周龄~12周龄仔猪高发病率、高死亡率及导致机体淋巴系统损伤与免疫缺陷为主要特征。PCV-2感染在世界各养猪国家广泛流行,给各国养猪业造成了巨大的经济损失。PCV-2疫苗研究已成为国内外学者的研究焦点。迄今为止,西欧与美国已有PCV-2疫苗注册上市,主要为灭活疫苗与亚单位疫苗。由于灭活疫苗与亚单位疫苗成本高,且注射次数多,容易造成机体应激,因此,弱毒疫苗、活载体疫苗及核酸疫苗等新型疫苗是目前研究的重点,并取得了长足的进展。论文主要概述了PCV-2疫苗研究的最新进展,以期为PCV-2疫苗研究提供一定的参考资料。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 2型 疫苗 种类
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牛结核病诊断方法研究进展 被引量:8
10
作者 鲁俊鹏 邹潍力 +2 位作者 林彦星 常孝勇 罗满林 《动物医学进展》 CSCD 2006年第11期25-28,共4页
牛结核病主要是由牛分支杆菌引起的一种人兽共患传染病,近年来发病率有所上升,给奶牛养殖业造成了巨大的危害。目前,牛结核病的诊断仍然以传统的迟发性变态反应试验为主,其他诊断方法有根据临床症状和病理变化诊断、抗酸染色法、细菌分... 牛结核病主要是由牛分支杆菌引起的一种人兽共患传染病,近年来发病率有所上升,给奶牛养殖业造成了巨大的危害。目前,牛结核病的诊断仍然以传统的迟发性变态反应试验为主,其他诊断方法有根据临床症状和病理变化诊断、抗酸染色法、细菌分离培养法、PCR法、血清学方法、淋巴细胞转化试验、γ-干扰素试验和菌体成分检测法等。为了净化该病,必须提高诊断方法的敏感性和特异性。文章对这些诊断方法及其优缺点做了概述,并指出结核病普查检测时,比较合理的诊断方式是迟发性变态反应试验和间接ELISA法同时运用。 展开更多
关键词 牛结核病 牛分支杆菌 诊断方法
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胸膜肺炎放线杆菌的实时荧光PCR检测 被引量:3
11
作者 李树清 易建平 +7 位作者 李健 胡永强 王巧全 陈志飞 周筱华 潘晓钟 罗满林 陈敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期969-973,共5页
Primers FP/ RP and TaqMan-MGB Probe were designed from sequence of apxIVA gene specific to all serotypes of Actinobacillus pleuropneumoniae. A real-time PCR method was developed for detecting Actinobacillus pleuropneu... Primers FP/ RP and TaqMan-MGB Probe were designed from sequence of apxIVA gene specific to all serotypes of Actinobacillus pleuropneumoniae. A real-time PCR method was developed for detecting Actinobacillus pleuropneumoniae, which can amplify all strains of APP. The sensitivity is 12fg DNA or 5.1CFU bacteria. This method can be directly used for detection of APP without DNA extraction. 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 实时荧光PCR 检测
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鸽Ⅰ型副黏病毒与沙门氏菌、大肠杆菌混合感染的诊断 被引量:4
12
作者 牛森 陈建红 +1 位作者 张济培 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期155-160,共6页
从珠三角某鸽场病死鸽中无菌操作采取心血、肝脏、脑、脾脏,接种于麦氏培养基和木糖—赖氨酸—脱氧胆酸琼脂培养基,经细菌纯化、镜检、生化试验、PCR检测和药敏试验,结果显示30只病鸽有8只分离到沙门氏菌,阳性率为26.7%;10只分离到大肠... 从珠三角某鸽场病死鸽中无菌操作采取心血、肝脏、脑、脾脏,接种于麦氏培养基和木糖—赖氨酸—脱氧胆酸琼脂培养基,经细菌纯化、镜检、生化试验、PCR检测和药敏试验,结果显示30只病鸽有8只分离到沙门氏菌,阳性率为26.7%;10只分离到大肠杆菌,阳性率为33.3%;其中6只同时分离到沙门氏菌和大肠杆菌,混合感染率为20.0%。经病毒分离培养、PCR检测,结果显示从6个混合样品中分离到5株副黏病毒,分离率为83.3%。结果表明,该鸽场鸽群发生了副黏病毒、沙门氏菌、大肠杆菌混合感染。本试验对珠三角鸽场近年较常发生的、以乳鸽较严重发病死亡的典型疫情作了较明确的诊断。 展开更多
关键词 Ⅰ型副黏病毒 沙门氏菌 大肠杆菌 混合感染
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5株猪圆环病毒2型全基因克隆和序列分析 被引量:5
13
作者 唐志玲 肖建雄 +1 位作者 陈瑞爱 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期14-18,共5页
为了解广东地区猪圆环病毒2型(PCV2)流行势态及毒株的基因变异情况,从广东珠三角地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)患病死亡猪中采集淋巴结,将PCR鉴定为阳性的病料在PK-15细胞上进行增殖培养,成功分离到5株猪圆环病毒2型毒株,分... 为了解广东地区猪圆环病毒2型(PCV2)流行势态及毒株的基因变异情况,从广东珠三角地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)患病死亡猪中采集淋巴结,将PCR鉴定为阳性的病料在PK-15细胞上进行增殖培养,成功分离到5株猪圆环病毒2型毒株,分别标记为GD-jm、GD-sz、GD-pz、GD-gj和GD-ss。再从细胞培养物中提取病毒基因组DNA,对5株PCV2分离株全基因组进行PCR扩增并克隆到pMD18-T Simple Vector进行测序,测序结果提交GenBank,登录号分别为JX912914、JX912915、JX945575、JX945576和JX945577。借助相关生物学软件作同源性分析,这5株PCV2基因组长度均为1767bp,其中3株为PCV2b亚型,2株为PCV2d亚型。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 全基因克隆 序列分析
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猪β干扰素的基因改造及真核表达 被引量:3
14
作者 唐明森 陈瑞爱 +3 位作者 刘健 裴党帅 郑念广 罗满林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期125-129,共5页
本试验选择高表达密码子重新设计合成猪β干扰素成熟肽核苷酸,通过设计特异的引物,在毕赤酵母表达系统中表达PoIFN-β,获得分泌表达的高活性重组PoIFN-β,并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水泡性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法测定重组... 本试验选择高表达密码子重新设计合成猪β干扰素成熟肽核苷酸,通过设计特异的引物,在毕赤酵母表达系统中表达PoIFN-β,获得分泌表达的高活性重组PoIFN-β,并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水泡性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法测定重组猪β干扰素的效价,为指导重组PoIFN-β的临床使用和研究其生物学功能提供基础。 展开更多
关键词 猪β干扰素 酵母表达 高活性
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戊型肝炎病毒研究新进展 被引量:8
15
作者 窦守强 唐延平 +2 位作者 蓝赐华 李和平 罗满林 《中国兽药杂志》 2007年第3期32-34,共3页
关键词 戊型肝炎病毒 发展中国家 暴发流行 发达国家 发病症状 人类健康 病死率
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胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展 被引量:2
16
作者 宣春玲 王贵平 +1 位作者 李春玲 罗满林 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第6期82-85,共4页
猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(App)引起的一种呼吸道传染性疾病。根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位不同,将胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型,不同血清型的菌株毒力大小不同,致病性也有强弱之别。研究发现与App致病性有关的毒力因... 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(App)引起的一种呼吸道传染性疾病。根据荚膜多糖和脂多糖抗原表位不同,将胸膜肺炎放线杆菌分为15个血清型,不同血清型的菌株毒力大小不同,致病性也有强弱之别。研究发现与App致病性有关的毒力因子包括荚膜多糖、脂多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、溶血外毒素等,其中溶血外毒素是App引起猪致病最主要的毒力因子,也是主要的保护性抗原。论文从猪传染性胸膜肺炎溶血外毒素的分子结构、致病机制、免疫原性几个方面对其进行综述,为获得以Apx为抗原制备减毒活疫苗提供参考资料。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 外毒素 免疫
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口蹄疫病毒VP1基因和免疫串联片段F的克隆及其在Vero细胞中的表达 被引量:1
17
作者 黄桂菊 罗满林 +2 位作者 刘镇明 贺东生 耿忠海 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期62-66,共5页
用RT-PCR方法扩增口蹄疫病毒VP1基因,并克隆到pgem-t easy 载体中,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-VP1.根据获得的口蹄疫病毒VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成免... 用RT-PCR方法扩增口蹄疫病毒VP1基因,并克隆到pgem-t easy 载体中,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-VP1.根据获得的口蹄疫病毒VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成免疫串联片段F,F含有VP1基因的主要抗原位点141位~160位及200位~213位的氨基酸序列,将F片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-F.在脂质体介导下,重组质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F转染Vero细胞.间接免疫荧光分析表明VP1基因和F基因均在Vero细胞中成功进行了瞬时表达,为进一步研制FMD基因疫苗奠定了基础. 展开更多
关键词 VERO细胞 VP1基因 口蹄疫病毒 片段 串联 RT-PCR方法 真核表达载体 重组质粒 间接免疫荧光 氨基酸序列 脂质体介导 easy 文献资料 设计合成 抗原位点 瞬时表达 基因疫苗 亚克隆 F基因 分析表 FMD 酶切
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广东省猪群口蹄疫免疫抗体水平调查 被引量:4
18
作者 崔克 罗满林 +2 位作者 贺东生 刘镇明 黄毓茂 《中国兽药杂志》 2007年第11期17-19,共3页
采集广东省不同地区11个猪场的不同类型猪的血清样品3 108份,采用液相阻断-酶联免疫吸附法,以口蹄疫结构蛋白抗体滴度作为评估疫苗效力的指标。本试验共采集种公猪血清样品77份,结果显示平均抗体滴度为(1.859 1±0.078 1,1∶72);仔... 采集广东省不同地区11个猪场的不同类型猪的血清样品3 108份,采用液相阻断-酶联免疫吸附法,以口蹄疫结构蛋白抗体滴度作为评估疫苗效力的指标。本试验共采集种公猪血清样品77份,结果显示平均抗体滴度为(1.859 1±0.078 1,1∶72);仔猪血清样品514份,平均抗体滴度为(1.793 3±0.027 9,1∶62);经产母猪血清样品604份,平均抗体滴度为(1.967 2±0.024 2,1∶92);后备母猪血清样品有1 913份,平均抗体滴度为(1.790 8±0.015 2,1∶61)。从统计结果来看,经产母猪的免疫状态是最好的,但总的来说,猪群的整体免疫水平不高,免疫形势不容乐观,口蹄疫的防治水平仍须提高。 展开更多
关键词 口蹄疫 抗体滴度 液相阻断-酶联免疫吸附试验
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口蹄疫病毒3ABC基因的克隆与测序 被引量:1
19
作者 邬苏晓 刘镇明 +1 位作者 罗满林 戚一达 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期91-93,共3页
参考 Gen Bank中发表的猪源 O型口蹄疫病毒 3 ABC的基因序列 ,设计一对特异引物 ,以猪源 FMDV/ O/ CC株基因组 RNA为模板 ,RT-PCR扩增 3 ABC基因 ,并克隆到 p MD1 8-T载体中。测序结果显示 ,FMDV/ O/ CC株 3 ABC基因 c DNA长 1 2 81 bp... 参考 Gen Bank中发表的猪源 O型口蹄疫病毒 3 ABC的基因序列 ,设计一对特异引物 ,以猪源 FMDV/ O/ CC株基因组 RNA为模板 ,RT-PCR扩增 3 ABC基因 ,并克隆到 p MD1 8-T载体中。测序结果显示 ,FMDV/ O/ CC株 3 ABC基因 c DNA长 1 2 81 bp,编码为 42 7个氨基酸残基组成的多肽。核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性比较发现 ,FMDV/ O/ CC株和 FMDV/O/ TW/ 99株 3 ABC基因亲缘关系密切。核苷酸同源性为 97% ,推导氨基酸序列同源性为96.3 %。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3ABC基因 基因克隆 序列分析
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PCR对猪全血、血清、尿液和粪便中PCV2的检测 被引量:1
20
作者 梁红虎 罗满林 刘镇明 《动物医学进展》 CSCD 2004年第1期74-76,共3页
根据已发表的基因序列 ,选取 PCV2保守的基因片段 ,利用计算机软件设计的一对引物对某猪场的 7只患病仔猪的全血、血清、尿液、和粪便进行 PCR扩增 ,再对扩增产物酶切鉴定 ,并将 PCR产物连接到 p MD1 8-T载体上 ,然后转化到大肠杆菌 DH... 根据已发表的基因序列 ,选取 PCV2保守的基因片段 ,利用计算机软件设计的一对引物对某猪场的 7只患病仔猪的全血、血清、尿液、和粪便进行 PCR扩增 ,再对扩增产物酶切鉴定 ,并将 PCR产物连接到 p MD1 8-T载体上 ,然后转化到大肠杆菌 DH5α感受态细胞中 ,抽提重组质粒 ,对重组质粒 PCVp MD1 8进行 PCR、酶切鉴定及测序。结果表明 :全血、血清、尿、粪便阳性率分别为 85.7% (6/7)、71 .4% (5/7)、42 .9%(3 /7)、2 8.6% (2 /7)。通过比较 ,全血的阳性率最高 。 展开更多
关键词 PCR 猪全血 血清 尿液 粪便 PCV2 检测技术 基因序列 基因片段
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