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钢琴演奏中情与理的统一分析——以《黄河愤》为例
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作者 罗思思 《戏剧之家》 2025年第4期84-86,共3页
钢琴演奏者需要将自己复杂的心理状态和思维活动呈现出来,演奏中,演奏者需要应用多样化的演奏技巧,也需要有对其演奏作品的有深刻的理解和感悟,这样才能具备良好的音乐表现力,出色完成钢琴演奏。《黄河愤》作为钢琴协奏曲黄河的第三乐章... 钢琴演奏者需要将自己复杂的心理状态和思维活动呈现出来,演奏中,演奏者需要应用多样化的演奏技巧,也需要有对其演奏作品的有深刻的理解和感悟,这样才能具备良好的音乐表现力,出色完成钢琴演奏。《黄河愤》作为钢琴协奏曲黄河的第三乐章,在整个曲式中其音乐形式以及内涵都极为丰富。因此,本文就《黄河愤》钢琴演奏中的情理进行分析,旨在为演奏者更好地理解该曲提供一些参考。 展开更多
关键词 钢琴演奏 情与理 统一 《黄河愤》
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素质教育背景下的音乐教育模式改革探究
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作者 罗思思 《戏剧之家》 2025年第5期178-180,共3页
随着社会的发展,教育领域大力倡导实施素质教育,音乐教育在培养高素质人才中具有重要作用。然而,当前我国高校音乐教育存在一些问题,不利于学生全面发展。因此,有必要探究素质教育背景下的音乐教育模式改革路径,以推动高校音乐教育的发... 随着社会的发展,教育领域大力倡导实施素质教育,音乐教育在培养高素质人才中具有重要作用。然而,当前我国高校音乐教育存在一些问题,不利于学生全面发展。因此,有必要探究素质教育背景下的音乐教育模式改革路径,以推动高校音乐教育的发展,为国家培养全面发展的高素质人才。 展开更多
关键词 素质教育 高校音乐教育 改革路径
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多元化音乐教育对传承民族音乐文化的价值探析
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作者 罗思思 《当代音乐》 2025年第6期177-179,共3页
民族音乐文化作为我国传统文化的重要组成部分,承载着一个国家、一个民族的历史、传统和文化,并通过音符传递着世代相传的记忆,是中华民族宝贵的文化遗产。在全球化、商业化趋势日益明显的今天,民族音乐文化传承面临着诸多挑战。为此,... 民族音乐文化作为我国传统文化的重要组成部分,承载着一个国家、一个民族的历史、传统和文化,并通过音符传递着世代相传的记忆,是中华民族宝贵的文化遗产。在全球化、商业化趋势日益明显的今天,民族音乐文化传承面临着诸多挑战。为此,学校要充分发挥其文化传承、文化教育功能,通过教育手段让民族音乐文化得到保护和传承。而多元化音乐教育恰恰是传承民族音乐文化的有效途径,因此本文探讨多元化音乐教育如何提升当代学生的内在素养,推动民族音乐的进步和发展。 展开更多
关键词 多元化音乐教育 民族音乐文化 传承价值
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禽呼肠孤病毒抗体检测胶体金试纸条的研制
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作者 杨冰怡 谢芝勋 +5 位作者 黄娇玲 韦悠 谢丽基 谢志勤 罗思思 任红玉 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期33-38,共6页
为建立禽呼肠孤病毒抗体的特异快速检测方法,用兔抗鸡IgG标记胶体金制作金标垫,将禽呼肠孤病毒(ARV)μNS蛋白和羊抗兔IgG分别划膜作为检测线(T线)和质控线(C线),优化试验条件,制备检测禽呼肠孤病毒血清抗体的胶体金试纸条,并检验试纸条... 为建立禽呼肠孤病毒抗体的特异快速检测方法,用兔抗鸡IgG标记胶体金制作金标垫,将禽呼肠孤病毒(ARV)μNS蛋白和羊抗兔IgG分别划膜作为检测线(T线)和质控线(C线),优化试验条件,制备检测禽呼肠孤病毒血清抗体的胶体金试纸条,并检验试纸条的特异性、敏感性、重复性和稳定性。通过对90份临床血清样品进行检测并与商品化ARV抗体ELISA检测试剂盒进行比较,以评价该试纸条的准确性和实用性。结果显示,该试纸条能够特异性检出禽呼肠孤病毒阳性血清抗体,且对其他常见禽病病原血清抗体检测为阴性。敏感性试验表明禽呼肠孤病毒血清抗体的检测限为1∶160,不同批次的试纸条检测同一份样品结果均一致。试纸条保存4周后,其检测结果与新鲜制备的试纸条检测结果一致。研制的试纸条与商品化ELISA试剂盒检测临床血清样品的符合率为94.4%。表明研制的胶体金试纸条能特异准确地检测ARV抗体,且操作简便、快捷,灵敏度较高,重复性和稳定性良好,可应用于禽呼肠孤病毒抗体的检测。 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 μNS蛋白 胶体金试纸条 抗体检测
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H3 、 N2和N8亚型禽流感病毒三重RT-LAMP检测方法的建立与应用
5
作者 黄青红 谢芝勋 +5 位作者 李孟 李丹 罗思思 张民秀 谢丽基 余丹 《动物医学进展》 北大核心 2025年第2期1-9,共9页
为快速鉴别检测H3、N2和N8亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV),建立了一种可同时检测H3、N2、N8亚型AIV的三重RT-LAMP(triplex reverse transcript loop-mediated isothermal amplification,tRT-LAMP)方法。根据NCBI中H3、N2和N... 为快速鉴别检测H3、N2和N8亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV),建立了一种可同时检测H3、N2、N8亚型AIV的三重RT-LAMP(triplex reverse transcript loop-mediated isothermal amplification,tRT-LAMP)方法。根据NCBI中H3、N2和N8亚型AIV的NA基因保守序列分别设计3套LAMP引物,同时还设计了与FIP的F1c反向互补的荧光探针(FD),并通过退火的方式将FD结合到标记淬灭基团的FIP(FIP)上,形成FIP-FD复合探针后的荧光被淬灭,当FD与FIP分离后,可检测到荧光信号。通过优化反应温度、特异性、敏感性、干扰性和临床样品检测等成功建立了同时检测H3、N2、N8亚型AIV的tRT-LAMP方法。该方法只需要67℃恒温条件就能准确检测和鉴别AIV的3种不同目的基因,且检测其他相关的禽类病原时不产生非特异性扩增;每反应管检测H3、N2和N8亚型AIV最低限度分别为756、735、790 copies/μL,不同浓度模板之间互不干扰;临床样品检测结果显示,tRT-LAMP结果与RT-qPCR及测序结果完全一致。结果表明该方法具有快速、经济、灵敏和特异的优点,扩增结果还可直接肉眼观察,可应用于临床同时检测H3、N2和N8亚型禽流感病毒。 展开更多
关键词 三重荧光RT-LAMP H3N8亚型禽流感 H3N2亚型禽流感 复合探针
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Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达 被引量:17
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作者 罗思思 谢芝勋 +5 位作者 邓显文 刘加波 庞耀珊 谢志勤 谢丽基 彭宜 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期154-157,共4页
根据GenBank中I群禽腺病毒(AAV)基因组序列,设计了1对特异性引物。以CELO毒株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出结构蛋白五邻体基因(penton),将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的EcoR I和Xho I位点,构建了原核表达载体pGEX-penton。将其转... 根据GenBank中I群禽腺病毒(AAV)基因组序列,设计了1对特异性引物。以CELO毒株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出结构蛋白五邻体基因(penton),将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1的EcoR I和Xho I位点,构建了原核表达载体pGEX-penton。将其转化到感受态细胞DH5α中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,获得了45.9 ku的融合蛋白。用不同的IPTG浓度和时间诱导表达,得出诱导的最佳IPTG浓度为1.5 mmol/L,最佳时间为4 h。用尿素提取包涵体表达产物,得到penton纯化蛋白,浓度为2.98 mg/mL。经Western-bolt分析,该蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 克隆 PENTON 原核表达
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鸡毒支原体LAMP可视化检测方法的建立 被引量:3
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作者 罗思思 谢芝勋 +6 位作者 邓显文 谢志勤 庞耀珊 谢丽基 刘加波 范晴 彭宜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期30-33,共4页
为建立一种鸡毒支原体(MG)的快速检测方法,本研究根据GenBank中MG的基因保守序列,设计1套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应条件,建立了MG LAMP的可视化检测方法。该方法的敏感性可达10fg/μL,高于常规PCR方法100倍;其特异性好,... 为建立一种鸡毒支原体(MG)的快速检测方法,本研究根据GenBank中MG的基因保守序列,设计1套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应条件,建立了MG LAMP的可视化检测方法。该方法的敏感性可达10fg/μL,高于常规PCR方法100倍;其特异性好,对其他的鸡常见病原体的检测结果均为阴性。MG LAMP反应只需一个可控温的水浴锅,在1h内完成全部反应,通过肉眼观察颜色直接判定结果。本研究建立的LAMP方法具有灵敏度高、特异性好、操作简便的优点,可用于MG感染的快速检测。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 环介导等温扩增 可视化检测
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舰船电子设备的抗强冲击试验分析 被引量:2
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作者 罗思思 《舰船科学技术》 北大核心 2018年第7X期115-117,共3页
采用传统方法分析抗强冲击试验对设备质量研究较为单一,造成分析结果不准确。依据高强度冲击特点对舰船电子设备抗强冲击试验进行分析,可提高分析结果精准度。根据高强度冲击特点,将设备质量分为3个等级,并在这3个等级下对轻量级、中量... 采用传统方法分析抗强冲击试验对设备质量研究较为单一,造成分析结果不准确。依据高强度冲击特点对舰船电子设备抗强冲击试验进行分析,可提高分析结果精准度。根据高强度冲击特点,将设备质量分为3个等级,并在这3个等级下对轻量级、中量级和水下爆炸等冲击行为进行试验研究,根据研究结果获取舰船电子设备抗强冲击程度。通过试验分析结果可知,依据高强度冲击特点试验分析方法结果较为准确,最高可达到89%,为舰船电子设备安装提供支持。 展开更多
关键词 舰船 电子设备 抗强冲击 设备质量 水下爆炸
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当代工笔花鸟画中宋代花鸟画构图技巧的延续和发展 被引量:4
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作者 罗思思 《艺术科技》 2015年第3期98-98,共1页
工笔花鸟画在中国的历史非常悠久,从战国开始就有它的踪影,而工笔花鸟画的鼎盛时期应该是在宋代,当时宋徽宗的提倡,成就"宣和画院"的辉煌时期。构图技巧是工笔画中比较重要的一个步骤,了解宋代花鸟画构图特点和技巧,对当代工... 工笔花鸟画在中国的历史非常悠久,从战国开始就有它的踪影,而工笔花鸟画的鼎盛时期应该是在宋代,当时宋徽宗的提倡,成就"宣和画院"的辉煌时期。构图技巧是工笔画中比较重要的一个步骤,了解宋代花鸟画构图特点和技巧,对当代工笔花鸟画的延续和发展有非常重要的作用。 展开更多
关键词 当代工笔花鸟画 宋代花鸟画构图技巧 延续和发展
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中国画花鸟画的“意写观”的辨析 被引量:2
10
作者 罗思思 罗涛 《艺术家》 2021年第4期26-27,共2页
花鸟画是中国画的一种,主要以花、鸟、虫等为描绘对象。花鸟画的画法有工笔、写意、兼工带写三种,工笔花鸟画通过线条勾勒所描绘的对象,再分层着色,当然也有没骨画法,即不用线条勾勒,用直接着色的方式进行绘画创作;写意花鸟画主要利用... 花鸟画是中国画的一种,主要以花、鸟、虫等为描绘对象。花鸟画的画法有工笔、写意、兼工带写三种,工笔花鸟画通过线条勾勒所描绘的对象,再分层着色,当然也有没骨画法,即不用线条勾勒,用直接着色的方式进行绘画创作;写意花鸟画主要利用水墨或色墨,采用简练概括的手法来描绘对象;工笔和写意两种技法相互结合称为兼工带写。中国花鸟画集中体现了国人与审美客体中自然生物的审美关系,具备较强的抒情性,能在一定程度上体现时代精神、间接地反映社会实践生活,具有鲜明的特点。花鸟画经过漫长的历史发展,积累了非常丰富的创作经验,是世界艺术格局中非常璀璨的明珠。本文对中国花鸟画的"意写观"展开了探析,希望能为花鸟画的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 中国画 花鸟画 意写观
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中国大专高校工笔花鸟画教学的有效方法研究 被引量:4
11
作者 罗思思 《美术教育研究》 2015年第11期147-148,共2页
作为中国传统文化的代表,工笔花鸟画不仅在中国文化领域有着重要地位,在我国高等院校中也是传承中国传统文化的重要课程。然而,对于怎样提高工笔花鸟画教学效果,更好地让学生传承我国这一传统文化,不同的学者存在不同的看法。文章基于... 作为中国传统文化的代表,工笔花鸟画不仅在中国文化领域有着重要地位,在我国高等院校中也是传承中国传统文化的重要课程。然而,对于怎样提高工笔花鸟画教学效果,更好地让学生传承我国这一传统文化,不同的学者存在不同的看法。文章基于为高等专科学校的工笔花鸟画教学提供更有效的教学方法的目的,在深入分析了中国工笔花鸟画的特点之后,提出了相应可实践的教学方法,并就高校工笔画教学中的最重要方面——写生展开论述。 展开更多
关键词 大专高校 工笔花鸟画 教学 有效方法
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浅谈中国古代工笔花鸟画体现的中国画构图 被引量:1
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作者 罗思思 罗涛 《艺术家》 2021年第5期36-37,共2页
构图在我国传统绘画中被称为经营位置或布局、章法,好的构图能够影响绘画作品的艺术感染力、节奏以及气韵,其和审美表现相互影响、共同发展。中国历代画家在艺术创作实践过程中总结出的构图方法,构成了中国画独具特色的构图程式法则,且... 构图在我国传统绘画中被称为经营位置或布局、章法,好的构图能够影响绘画作品的艺术感染力、节奏以及气韵,其和审美表现相互影响、共同发展。中国历代画家在艺术创作实践过程中总结出的构图方法,构成了中国画独具特色的构图程式法则,且中国构图讲究法度的严谨性,还要求绘画的艺术性与审美性有效结合。笔者通过研究、分析不同时期的中国古代工笔花鸟画的构图,总结提炼了中国古代工笔花鸟画中构图的基本程式,以期运用在自己的绘画创作中。 展开更多
关键词 中国画 工笔花鸟画 构图
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论齐白石花鸟画自然形成与创造 被引量:1
13
作者 罗思思 《艺海》 2015年第5期74-75,共2页
齐白石的花鸟画具备诗意,表达着其独特的精神感悟。齐白石早期的乡村生活体验深深的影响了他的审美意识,从而使其在花鸟画中突破了以往文化花鸟画的局限性,将乡村的生活气息与花鸟的独特情态与意趣融入到花鸟画中,创作出具备时代特色和... 齐白石的花鸟画具备诗意,表达着其独特的精神感悟。齐白石早期的乡村生活体验深深的影响了他的审美意识,从而使其在花鸟画中突破了以往文化花鸟画的局限性,将乡村的生活气息与花鸟的独特情态与意趣融入到花鸟画中,创作出具备时代特色和充满个人主义的写意花鸟画。 展开更多
关键词 齐白石 花鸟画 简约多样
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船载电子设备的兼容维护方法研究
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作者 罗思思 《舰船科学技术》 北大核心 2018年第4X期73-75,共3页
船载电子设备受到使用环境的影响,需要进行多方位的维护检测,传统船载电子设备维护方法无法实现针对性的电磁干扰维护,为此提出船载电子设备的兼容维护方法。将船载电子设备分类,制定类别兼容维护流程,通过类别要素筛选确立维护方式,利... 船载电子设备受到使用环境的影响,需要进行多方位的维护检测,传统船载电子设备维护方法无法实现针对性的电磁干扰维护,为此提出船载电子设备的兼容维护方法。将船载电子设备分类,制定类别兼容维护流程,通过类别要素筛选确立维护方式,利用排除法确定电子设备电磁干扰源;对敏感电子设备以及高耦合电子设备进行兼容电磁干扰维护,实现船载电子设备的兼容维护。实验数据表明,设计的兼容维护方法比传统维护方法的设备替换率低25%,说明设计的兼容维护方法具备极高的有效性。 展开更多
关键词 船载电子设备 兼容维护方法 设备维护 设备干扰源
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二重荧光RT-LAMP方法鉴别检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒 被引量:14
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作者 范晴 谢芝勋 +8 位作者 谢志勤 谢丽基 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 邓显文 刘加波 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期996-1004,共9页
口蹄疫和水泡性口炎是牛常见高度急性病毒传染病,在全球范围内广泛存在。本研究旨在建立一种可同时鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据口蹄疫病毒(FMDV)3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列,设计了... 口蹄疫和水泡性口炎是牛常见高度急性病毒传染病,在全球范围内广泛存在。本研究旨在建立一种可同时鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测方法。根据口蹄疫病毒(FMDV)3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列,设计了2套特异性引物,在每条内引物的5′端标记荧光基团,通过扩增产物颜色判断检测结果。优化反应条件,建立了可同时检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP方法。结果显示,该方法灵敏性高,每个反应最低能够检测到100个拷贝混合模板;特异性好,能在同一个反应管里检测到两种病毒,对其他牛病原体无扩增;干扰性小,扩增效率不受模板浓度影响。本研究建立的口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒二重荧光RT-LAMP方法具有简便、快速、特异、敏感等优点,可用于FMDV和VSV的临床检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 水泡性口炎病毒 二重荧光RT-LAMP 检测
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牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA方法的建立 被引量:20
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作者 范晴 谢芝勋 +5 位作者 谢志勤 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢丽基 罗思思 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期21-24,共4页
用兔抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)多抗作为包被抗体,BVDV NS3单克隆抗体作为捕获抗体,建立了检测BVDV抗原的捕获ELISA方法,对各项反应条件进行优化,最终获得最佳工作条件为兔多抗1∶1 600稀释包被,NS3单抗1∶2 000稀释,酶标抗体工作浓度为1... 用兔抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)多抗作为包被抗体,BVDV NS3单克隆抗体作为捕获抗体,建立了检测BVDV抗原的捕获ELISA方法,对各项反应条件进行优化,最终获得最佳工作条件为兔多抗1∶1 600稀释包被,NS3单抗1∶2 000稀释,酶标抗体工作浓度为1∶4 000稀释。特异性和敏感性试验结果表明,该方法对牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛分支杆菌无特异性交叉反应,其最低可检测7.9×103个TCID50的病毒量,与RT-PCR方法的相比较,符合率为100%。所建立的BVDV抗原捕获ELISA方法快速、特异、敏感,可用于BVDV抗原的检测。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 NS3单克隆抗体 ELISA
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牛支原体、牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒三重二温式PCR检测方法的建立及应用 被引量:10
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作者 范晴 谢芝勋 +10 位作者 谢志勤 谢丽基 黄莉 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 邓显文 刘加波 庞耀珊 《动物医学进展》 北大核心 2018年第2期43-48,共6页
为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性支气管炎病毒(IBRV)的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5′端非编码区(5′-UTR)和GB基因,分别设计了3对特异引物,将三温式... 为建立一种可同时检测牛支原体(MB)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性支气管炎病毒(IBRV)的三重二温式PCR检测方法。根据GenBank中MB、BVDV和IBRV的保守基因Uvrc基因、5′端非编码区(5′-UTR)和GB基因,分别设计了3对特异引物,将三温式PCR扩增程序简化为两个温度梯度,优化反应条件建立了用于同时检测MB、BVDV以及IBRV 3种常见牛呼吸道传染病病原的三重二温式PCR。结果显示,该方法特异性好,只对MB、BVDV和IBRV模板进行扩增,扩增的目的片段长度分别为412、170、727bp,对其他牛病原体无特异性扩增;灵敏度高,最低能同时检测到10 000拷贝的目的核酸;干扰性小,能同时检测3个不同浓度的模板。研究所建立的MB、BVDV和IBRV三重二温式PCR检测方法,具有特异性好、灵敏度高、方便快速等优点,可用于临床鉴别诊断和流行病学调查,具有很高的临床应用价值。 展开更多
关键词 三重二温式PCR 牛支原体 牛病毒性腹泻病毒 传染性鼻气管炎病毒 检测
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禽流感病毒RT-LAMP检测技术的建立 被引量:10
18
作者 彭宜 谢芝勋 +6 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 罗思思 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第12期43-46,共4页
根据GenBank中禽流感病毒(AIV)M基因序列,设计针对所有亚型AIV的通用检测引物,并对反应条件进行优化,建立了检测AIV的逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化检测方法。结果表明,建立的检测方法对禽流感病毒总RNA最小检出限为10fg,灵敏度... 根据GenBank中禽流感病毒(AIV)M基因序列,设计针对所有亚型AIV的通用检测引物,并对反应条件进行优化,建立了检测AIV的逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化检测方法。结果表明,建立的检测方法对禽流感病毒总RNA最小检出限为10fg,灵敏度为RT-PCR的1 000倍,能特异地检测出所有不同的HA亚型禽流感病毒,对其他禽呼吸道病原体无扩增反应;本方法快速,在常规水浴锅或金属恒温槽中50min就可完成,反应结束后不需开盖即可直接用肉眼根据反应液的颜色变化对结果进行判定。本研究建立的禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法具有操作简便、仪器设备要求简单、灵敏、快速、特异等优点,适合在基层进行AIV的快速早期筛检。 展开更多
关键词 逆转录-环介导等温扩增 禽流感病毒 检测
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小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒多重荧光RT-LAMP鉴别检测方法的建立及应用 被引量:9
19
作者 范晴 谢芝勋 +8 位作者 谢志勤 谢丽基 黄娇玲 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 邓显文 刘加波 《动物医学进展》 北大核心 2020年第4期1-7,共7页
旨在建立一种可视化多重荧光RT-LAMP方法用于检测小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒的核酸,并初步应用于小反刍兽疫和蓝舌病临床样品的检测。比对GenBank中小反刍兽疫N基因和蓝舌病NS3基因保守区域,设计2套LAMP引物,在每条内引物FIP的5′端标... 旨在建立一种可视化多重荧光RT-LAMP方法用于检测小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒的核酸,并初步应用于小反刍兽疫和蓝舌病临床样品的检测。比对GenBank中小反刍兽疫N基因和蓝舌病NS3基因保守区域,设计2套LAMP引物,在每条内引物FIP的5′端标记荧光基团。对反应条件进行优化,验证方法的特异性、灵敏度和干扰性,同时应用该方法检测168份临床样品。结果表明,该方法对小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒高度特异,与口蹄疫病毒、鹿流行性出血热病毒、牛瘟病毒、山羊痘病毒等其他反刍动物病毒均无交叉反应,检测灵敏度为200 copies/μL,干扰性小,可同时检测两个不同浓度的模板。对168份样品的检测结果显示,小反刍兽疫病毒的感染率为3.6%,蓝舌病病毒的感染率为13.1%,无两种病毒混合感染;与荧光RT-PCR方法相比,此多重荧光RT-LAMP方法敏感性为91.7%~100%,特异性为100%。表明建立的多重荧光RT-LAMP可快速、准确地检测小反刍兽疫病毒和蓝舌病病毒,具有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 蓝舌病病毒 多重荧光RT-LAMP 检测
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肠炎沙门菌fliC蛋白的表达及ELISA检测方法的建立 被引量:8
20
作者 邓显文 谢芝勋 +5 位作者 刘加波 谢志勤 庞耀珊 谢丽基 范晴 罗思思 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第6期21-25,共5页
为了给临床检测肠炎沙门菌提供一种切实可行的血清学方法,本研究根据肠炎沙门菌(SE)鞭毛蛋白基因(fliC)序列设计一对引物,利用PCR扩增出fliC基因大小为285bp,克隆到表达载体pGEX-4T-1中,成功构建重组质粒pGEX-4T-fliC。将重组质粒pGEX-f... 为了给临床检测肠炎沙门菌提供一种切实可行的血清学方法,本研究根据肠炎沙门菌(SE)鞭毛蛋白基因(fliC)序列设计一对引物,利用PCR扩增出fliC基因大小为285bp,克隆到表达载体pGEX-4T-1中,成功构建重组质粒pGEX-4T-fliC。将重组质粒pGEX-fliC转化大肠埃希菌DH5诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,表达的水溶性重组蛋白大小为37ku,有较好的反应原性。以重组蛋白GST-fliC为包被抗原建立间接ELISA检测肠炎沙门菌抗体的方法,为肠炎沙门菌的检测提供一种敏感度高、特异性强的检测方法。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 fliC鞭毛蛋白 间接ELISA
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