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基于BAF/GM细胞株法检测生长激素生物活性研究
被引量：
1
1
作者
罗燕飞
热衣兰木.包尔汉
+2 位作者
米热古丽.买买提
李静
史兆龙
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第29期3567-3570,共4页
目的探讨基于BAF/GM细胞株法检测生长激素(GH)生物活性的可行性,为临床检测GH生物活性提供参考方法。方法选取2011年7月—2013年12月新疆医科大学第一附属医院儿科收治的特发性身材矮小(ISS)患儿42例(ISS组),另选取同期本院预防保健科...
目的探讨基于BAF/GM细胞株法检测生长激素(GH)生物活性的可行性,为临床检测GH生物活性提供参考方法。方法选取2011年7月—2013年12月新疆医科大学第一附属医院儿科收治的特发性身材矮小(ISS)患儿42例(ISS组),另选取同期本院预防保健科体检健康儿童52例(对照组)。建立BAF/GM细胞株,常规培养于DMEM高糖培养基。培养液洗涤后转移到含10%马血清的培养基中培养16 h。采用含10%马血清的培养基重悬细胞,调整细胞浓度为3×10~5个/ml,混匀后取100μl滴在96孔板中。稀释标准GH溶液至终浓度为0.01~1 000.00μg/L,取10μl标准GH溶液滴加到96孔板中,培养22 h。每孔加入22μl反应液,继续培养3 h,在490 nm处测定吸光度(OD)值。绘制OD值与GH生物活性当量关系的标准曲线。采用含10%马血清的培养基配制促甲状腺激素(100 m U/L)、黄体生成素(10 000 U/L)、卵泡刺激素(10 000 U/L)、催乳素(100 U/L)、成纤维细胞生长因子(1 000μg/L)、表皮生长因子(100μg/L)、人类胰岛素样生长因子1(IGF-1,10μg/L)、氢化可的松(100μg/L)、诺和灵R(1.0 U/L)、L-甲状腺素钠(643.5 nmol/L),同时每孔加标准GH溶液5μl(20μg/L)进行干扰实验。采集两组受试者空腹静脉血,采用放射免疫分析法(IRMA)测定血清GH水平;灭活血清标本,以MTS法测定490 nm处OD值,代入标准曲线计算血清GH生物学活性当量。结果 GH生物活性当量与OD值关系的标准曲线为Y=0.8520ln(X)+0.498 8,R^2=0.969 8,其中X为GH生物活性当量,Y为OD值。加入促甲状腺激素、黄体生成素、卵泡刺激素、催乳素、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、IGF-1、氢化可的松、诺和灵R和L-甲状腺素钠后测得OD值分别与标准GH溶液比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组受试者GH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ISS组GH生物活性当量、GH生物活性低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论基于BAF/GM细胞株法是潜在的检测GH生物活性的良好方法,且具有一定的抗干扰能力。
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关键词
生长激素
生物活性
BAF/GM细胞株
特发性身材矮小
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职称材料
题名
基于BAF/GM细胞株法检测生长激素生物活性研究
被引量：
1
1
作者
罗燕飞
热衣兰木.包尔汉
米热古丽.买买提
李静
史兆龙
机构
新疆医科大学第一附属医院儿科
出处
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第29期3567-3570,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81360139)
文摘
目的探讨基于BAF/GM细胞株法检测生长激素(GH)生物活性的可行性,为临床检测GH生物活性提供参考方法。方法选取2011年7月—2013年12月新疆医科大学第一附属医院儿科收治的特发性身材矮小(ISS)患儿42例(ISS组),另选取同期本院预防保健科体检健康儿童52例(对照组)。建立BAF/GM细胞株,常规培养于DMEM高糖培养基。培养液洗涤后转移到含10%马血清的培养基中培养16 h。采用含10%马血清的培养基重悬细胞,调整细胞浓度为3×10~5个/ml,混匀后取100μl滴在96孔板中。稀释标准GH溶液至终浓度为0.01~1 000.00μg/L,取10μl标准GH溶液滴加到96孔板中,培养22 h。每孔加入22μl反应液,继续培养3 h,在490 nm处测定吸光度(OD)值。绘制OD值与GH生物活性当量关系的标准曲线。采用含10%马血清的培养基配制促甲状腺激素(100 m U/L)、黄体生成素(10 000 U/L)、卵泡刺激素(10 000 U/L)、催乳素(100 U/L)、成纤维细胞生长因子(1 000μg/L)、表皮生长因子(100μg/L)、人类胰岛素样生长因子1(IGF-1,10μg/L)、氢化可的松(100μg/L)、诺和灵R(1.0 U/L)、L-甲状腺素钠(643.5 nmol/L),同时每孔加标准GH溶液5μl(20μg/L)进行干扰实验。采集两组受试者空腹静脉血,采用放射免疫分析法(IRMA)测定血清GH水平;灭活血清标本,以MTS法测定490 nm处OD值,代入标准曲线计算血清GH生物学活性当量。结果 GH生物活性当量与OD值关系的标准曲线为Y=0.8520ln(X)+0.498 8,R^2=0.969 8,其中X为GH生物活性当量,Y为OD值。加入促甲状腺激素、黄体生成素、卵泡刺激素、催乳素、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、IGF-1、氢化可的松、诺和灵R和L-甲状腺素钠后测得OD值分别与标准GH溶液比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组受试者GH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ISS组GH生物活性当量、GH生物活性低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论基于BAF/GM细胞株法是潜在的检测GH生物活性的良好方法,且具有一定的抗干扰能力。
关键词
生长激素
生物活性
BAF/GM细胞株
特发性身材矮小
Keywords
Growth hormone
Biological activity
BAF/GM cell line
Idiopathic short stature
分类号
R347.511 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于BAF/GM细胞株法检测生长激素生物活性研究
罗燕飞
热衣兰木.包尔汉
米热古丽.买买提
李静
史兆龙
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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