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水稻OsLOL2基因的克隆及过表达拟南芥的抗盐性分析 被引量:2
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作者 管清杰 汪振娟 +2 位作者 郑恒 刘光涛 柳参奎 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期259-269,共11页
从水稻龙粳11(Oryza sativa L.longjing11)中克隆到了一个已知的LSD1-Like型锌指蛋白转录因子OsLOL2基因(LOC_Os12g41700)。生物信息学分析表明,OsLOL2基因ORF长度为519 bp,编码172个氨基酸残基,有2个LSD1-Like锌指结构域。本研究以基... 从水稻龙粳11(Oryza sativa L.longjing11)中克隆到了一个已知的LSD1-Like型锌指蛋白转录因子OsLOL2基因(LOC_Os12g41700)。生物信息学分析表明,OsLOL2基因ORF长度为519 bp,编码172个氨基酸残基,有2个LSD1-Like锌指结构域。本研究以基因枪转化洋葱表皮细胞定位表明在核中。实时荧光定量PCR检测到OsLOL2基因在龙粳11叶和根中的表达受80 mmol·L-1Na Cl、30 mmol·L-1Na HCO3、10 mmol·L-1H2O2胁迫诱导而转录表达显著增加。过表达OsLOL2基因酵母表现出抗盐碱性生长;在胁迫条件下,萌发率分析表明,转OsLOL2拟南芥在Na Cl和H2O2下,过表达株系萌发率高于野生型;萌发后期抗性检测表明:在含100 mmol·L-1Na Cl、3mmol·L-1Na HCO3和2 mmol·L-1H2O2的1/2MS平板上,过表达株系长势优于野生型,揭示了OsLOL2基因能够提高植物的抗盐碱性,与盐碱逆境引起的氧化胁迫的ROS途径相关。为OsLOL2基因参与逆境信号途径的研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 LSD-Like基因家族 转录因子 OsLOL2基因 表达模式分析 非生物逆境胁迫
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松口蘑种质资源的RAPD分析 被引量:2
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作者 管清杰 全雪丽 吴松权 《辽宁林业科技》 北大核心 2008年第2期8-9,13,共3页
利用RAPD标记技术分析中国主产区和日本松口蘑的亲缘关系。结果表明:供试样品聚为3类,且供试松口蘑之间遗传距离较近,表明它们是一个物种下的不同居群。
关键词 RAPD标记 松口蘑 亲缘关系
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紫穗槐茎段愈伤组织诱导及再生体系的建立 被引量:2
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作者 管清杰 罗秋香 《辽宁林业科技》 2009年第6期8-11,共4页
以紫穗槐茎段为研究对象,确定了影响其愈伤组织诱导的关键因子、不定芽分化及生根培养的最佳条件,建立了紫穗槐稳定高频再生体系。试验结果表明:紫穗槐茎段愈伤组织的最适诱导培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,诱导率为1... 以紫穗槐茎段为研究对象,确定了影响其愈伤组织诱导的关键因子、不定芽分化及生根培养的最佳条件,建立了紫穗槐稳定高频再生体系。试验结果表明:紫穗槐茎段愈伤组织的最适诱导培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,诱导率为100%,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT2mg/L,分化率为96.2%,增殖倍数为7.3;不定芽最佳生根培养基为1/2MS+酵母提取物0.5mg/L;再生植株移植在选用田园土、蛭石(5∶1)混合的基质上,光强3000lx,光照时间14h/d下生长,3周后成活率达85.67%。 展开更多
关键词 紫穗槐 茎段 愈伤组织 再生体系
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松茸SCAR标记的建立 被引量:8
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作者 吴松权 管清杰 +2 位作者 全雪丽 傅伟杰 吴基日 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期150-153,共4页
RAPD analysis was adopted to identify the Tricholoma matsutake and T. bakamatsutake. With the method of BSA, a polymorphic band of 870 bp linked to T. matsutake was amplified, and the SCAR marker was developed from th... RAPD analysis was adopted to identify the Tricholoma matsutake and T. bakamatsutake. With the method of BSA, a polymorphic band of 870 bp linked to T. matsutake was amplified, and the SCAR marker was developed from the polymorphic band by cloning, sequencing and designing primers. The SCAR marker only presented in the individuals of T. matsutake, thus, it can quickly and accurately identify T. matsutake and T. bakamatsutake at molecular level. 展开更多
关键词 松茸 假松茸 RAPD SCAR
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紫穗槐抗坏血酸过氧化物酶(APX2)基因的克隆及抗旱性功能验证 被引量:1
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作者 张艺腾 管清杰 +5 位作者 于洋 郝玉波 姜宇博 宫秀杰 吕国依 钱春荣 《黑龙江农业科学》 2024年第8期51-59,共9页
为了研究紫穗槐(Amorpha fruticosa L.)在干旱条件下感知胁迫信号并通过生理和生化调节途径来维持其耐性功能作用的基因,可为紫穗槐抗旱性育种提供一个候选基因。通过对紫穗槐在干旱胁迫下的转录组数据进行分析,活性氧平衡系统的抗坏血... 为了研究紫穗槐(Amorpha fruticosa L.)在干旱条件下感知胁迫信号并通过生理和生化调节途径来维持其耐性功能作用的基因,可为紫穗槐抗旱性育种提供一个候选基因。通过对紫穗槐在干旱胁迫下的转录组数据进行分析,活性氧平衡系统的抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate Peroxidase,APX2)基因的表达量随胁迫时间显著升高,对紫穗槐的AfAPX2基因进行克隆,采用无缝克隆技术连接入门载体(pQB-V3),通过Gateway体系LR反应将目的基因构建到表达载体,并用电击法转化根癌农杆菌EHA105,采用农杆菌介导转化烟草(Nicotiana tabacum),愈伤组织培养成T 0代苗,收获种子后种植研究其与干旱胁迫的相关性。结果表明,AfAPX2基因表达蛋白与拟南芥和水稻的APX2同源比对,同样有过氧化物酶的结构域,推测可以通过ROS途径增强植物抗逆性。AfAPX2蛋白质二级结构有13处α-螺旋,17处β-折叠,4处β-转角和多处无规则卷曲,AfAPX2酶三级结构具有铁离子的结合位点。在干旱胁迫和胁迫后恢复供水下,过表达AfAPX2基因株系的叶片以及植株的茂盛程度明显大于野生型。本研究发现转AfAPX2基因阳性植株对自然干旱胁迫的耐受性增强,提高了烟草的抗旱性,说明AfAPX2在响应干旱胁迫中可能扮演重要的调节角色。进而验证了紫穗槐干旱胁迫转录组的上调基因与其相关,可以找到提高抗旱性的相关基因。 展开更多
关键词 紫穗槐 抗坏血酸过氧化物酶 干旱 转基因 烟草
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超氧化物歧化酶在植物响应干旱、盐碱和冷害中的作用 被引量:8
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作者 郭迦南 赵倚澎 +1 位作者 杨元植 管清杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期481-490,共10页
超氧化物歧化酶(SOD)在植物细胞中广泛存在,主要分为Mn-SOD,Fe-SOD以及Cu/Zn-SOD 3大类,它们可以在细胞中发挥不同的防御作用,增强植物的耐受力。此外在蓝细胞和海洋生物中存在的Ni-SOD有待探究。该研究根据SOD所包含金属离子的不同对... 超氧化物歧化酶(SOD)在植物细胞中广泛存在,主要分为Mn-SOD,Fe-SOD以及Cu/Zn-SOD 3大类,它们可以在细胞中发挥不同的防御作用,增强植物的耐受力。此外在蓝细胞和海洋生物中存在的Ni-SOD有待探究。该研究根据SOD所包含金属离子的不同对其理化性质和作用机制进行分析;阐述了在干旱、盐碱、冷害等胁迫下SOD在植物中发挥的作用,并对该酶在未来植物生长发育进程中的作用进行展望,为有关逆境环境下植物生长发育机制的研究提供参考。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 蛋白质的理化性质 活性氧平衡作用机制 抗逆响应
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腐解秸秆和脱硫石膏添加对苏打盐渍土淋洗脱盐效率的影响 被引量:11
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作者 廖栩 杨帆 +6 位作者 王志春 管清杰 何明良 安丰华 杨洪涛 赵丹丹 朱文东 《土壤与作物》 2020年第1期74-82,共9页
苏打盐渍化土壤胶体吸附大量交换性Na+,造成土壤团聚体崩解,粘粒分散,阻塞土壤孔隙。改良苏打盐渍土需两步:一是提供钙源替换交换性Na+,二是排出盐分。本文研究了腐解玉米秸秆和脱硫石膏不同改良组合对苏打盐渍土淋洗脱盐效率影响。结... 苏打盐渍化土壤胶体吸附大量交换性Na+,造成土壤团聚体崩解,粘粒分散,阻塞土壤孔隙。改良苏打盐渍土需两步:一是提供钙源替换交换性Na+,二是排出盐分。本文研究了腐解玉米秸秆和脱硫石膏不同改良组合对苏打盐渍土淋洗脱盐效率影响。结果表明,所有改良处理均能改善土壤入渗,入渗速率大小为:脱硫石膏>脱硫石膏+腐解秸秆>腐解秸秆>对照;含脱硫石膏处理显著提高土壤饱和导水率(Ks),在短时间内腐解秸秆处理不能改善土壤导水性,在70 d后才有效果;腐解秸秆处理土壤含水率最高,材料保水性好;淋出液化学性质显示,各改良处理均能促进钠离子的淋洗;土壤化学性质显示,淋洗后各处理土壤盐分均显著下降;脱硫石膏和脱硫石膏+腐解秸秆处理与对照相比,土壤pH降低更显著;各改良处理土壤可溶性钠离子含量显著低于对照,并且土壤中可溶性钙镁等二价阳离子显著高于对照;各改良处理土壤钠吸附比(SAR)均显著低于对照组。 展开更多
关键词 苏打盐渍土 腐解秸秆 脱硫石膏 淋洗 脱盐效率
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小球藻亲环蛋白A(CyPA)基因克隆及表达特性分析 被引量:2
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作者 王旭辉 乔坤 +2 位作者 汪振娟 管清杰 柳参奎 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期245-251,共7页
亲环蛋白广泛存在于生物体中,并发挥着重要的作用。本研究从小球藻cDNA文库中筛选获得亲环蛋白A(CyPA Gene);通过提取转化35S::CyPA::GFP融合质粒拟南芥的原生质体研究表明,CyPA定位于叶绿体中;过表达CyPA基因的酵母能够增强InV酵母对N... 亲环蛋白广泛存在于生物体中,并发挥着重要的作用。本研究从小球藻cDNA文库中筛选获得亲环蛋白A(CyPA Gene);通过提取转化35S::CyPA::GFP融合质粒拟南芥的原生质体研究表明,CyPA定位于叶绿体中;过表达CyPA基因的酵母能够增强InV酵母对NaCl、NaHCO3胁迫的生长能力;通过实时定量PCR研究表明,在非生物胁迫的条件下,CyPA基因的表达量升高,推测CyPA基因与非生物胁迫抗性相关,亲环蛋白A参与生物体的抗逆生存能力。 展开更多
关键词 小球藻 亲环蛋白 实时定量PCR 基因表达特性
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酸浆宿萼与黑果腺肋花楸复合功能饮料的研制 被引量:2
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作者 王申萌 管清杰 +1 位作者 张廷秀 杨成君 《保鲜与加工》 CAS 2022年第1期39-48,55,共11页
以黑果腺肋花楸和酸浆宿萼为原料,通过单因素试验、正交试验和建立响应面模型等方法优化复合饮料的制备工艺,并对产品的稳定性、感官品质、功能性质与货架期进行了检验。结果表明:宿萼浸提液最佳苦味掩盖剂为质量比为1∶2的纽甜与果葡糖... 以黑果腺肋花楸和酸浆宿萼为原料,通过单因素试验、正交试验和建立响应面模型等方法优化复合饮料的制备工艺,并对产品的稳定性、感官品质、功能性质与货架期进行了检验。结果表明:宿萼浸提液最佳苦味掩盖剂为质量比为1∶2的纽甜与果葡糖浆,添加量为30 mg/mL;稳定剂最佳比例为β-环状糊精0.17%,卡拉胶0.13%,羧甲基纤维素钠0.13%;复合饮料的最佳工艺参数为:黑果腺肋花楸汁与酸浆宿萼浸提液体积比为8.2∶1,白砂糖添加量14.2%,柠檬酸添加量0.06%,在此条件下制备的饮料感官评分为85.23±0.58分,其整体呈现紫红色,果香味浓郁,入口后酸甜适中,口感绵软细腻。 展开更多
关键词 黑果腺肋花楸 酸浆宿萼 复合饮料 稳定剂 配方
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水稻盐碱逆境响应锌指蛋白基因OsZFP6表达特性及功能研究 被引量:4
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作者 刘佳丽 何明良 +3 位作者 刘晨曦 廖栩 李秀峰 管清杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期424-432,共9页
筛选到C2HC型锌指蛋白,其编码304个氨基酸,命名为OsZFP6。分别使用碱性盐(NaHCO3)和H2O2对水稻两周龄幼苗进行胁迫处理,检测到OsZFP6相对表达量受其诱导,并在叶和根中出现差异,因此,推测OsZFP6参与相应的逆境响应调节途径。我们将一个... 筛选到C2HC型锌指蛋白,其编码304个氨基酸,命名为OsZFP6。分别使用碱性盐(NaHCO3)和H2O2对水稻两周龄幼苗进行胁迫处理,检测到OsZFP6相对表达量受其诱导,并在叶和根中出现差异,因此,推测OsZFP6参与相应的逆境响应调节途径。我们将一个绿色荧光蛋白(GFP)与之融合,发现OsZFP6定位在细胞核。此外,对过表达OsZFP6的水稻转基因植株进行NaHCO3胁迫处理,结果表明过表达植株均具有较强的耐受性;并且在株高、鲜重生理指标上,野生型植株低于过表达OsZFP6植株,在野生型植株体内的MDA、H2O2含量高于过表达植株;说明OsZFP6在响应NaHCO3胁迫时可以通过清除过氧化物来增强植物的抗性。初步推测OsZFP6基因参与响应碱性盐胁迫途径的调控,可能在转录调控中直接或间接发挥重要作用。 展开更多
关键词 锌指蛋白 非生物胁迫 水稻 碱性盐
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水稻PPR家族蛋白研究进展 被引量:1
11
作者 曹近哲 许敏 +3 位作者 张新颖 卜庆云 管清杰 王臻昱 《土壤与作物》 2023年第3期235-246,共12页
五肽重复序列(Pentatricopeptide repeat,PPR)家族是高等植物最大的基因家族之一,在大多数已测序的植物物种中有超过400个成员。水稻基因组中有491个PPR基因。越来越多的证据表明PPR蛋白参与叶绿体或线粒体基因的转录后调控,包括RNA成... 五肽重复序列(Pentatricopeptide repeat,PPR)家族是高等植物最大的基因家族之一,在大多数已测序的植物物种中有超过400个成员。水稻基因组中有491个PPR基因。越来越多的证据表明PPR蛋白参与叶绿体或线粒体基因的转录后调控,包括RNA成熟、编辑、内含子剪接、转录本的稳定性和翻译起始。RNA代谢对叶绿体和线粒体的生物发生和功能有重要作用,因此,对光合作用、呼吸作用和植物的发育及其对环境的响应具有深远的影响。本文综述了水稻PPR蛋白通过对线粒体或叶绿体RNA编辑、剪接等作用调节水稻的多种发育途径,总结了水稻PPR蛋白参与生物和非生物胁迫响应的最新研究进展。 展开更多
关键词 水稻 PPR蛋白 线粒体 叶绿体 RNA编辑
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羊草WRKY40的克隆及其转基因烟草抗病性分析 被引量:2
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作者 李丹妮 刘佳丽 +3 位作者 张继涛 顾宝祥 朱凤金 管清杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期412-420,共9页
为了培育抗白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)、纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)以及恶苗病菌(Fusarium fujikuroi)等病菌的水稻品种,通过挖掘抗病基因选育抗病品种。利用RT-PCR方法从羊草(Leymus ... 为了培育抗白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)、纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)以及恶苗病菌(Fusarium fujikuroi)等病菌的水稻品种,通过挖掘抗病基因选育抗病品种。利用RT-PCR方法从羊草(Leymus chinensis)叶片中克隆LcWRKY40基因(登录号:MN187915),其CDS全长1053 bp,编码350个氨基酸,分子质量为38.1 kDa。生物信息学分析结果表明:LcWRKY40一级结构包含WRKY结构域,并且存在锌指蛋白结构域以及核定位序列。系统进化树的构建及基序分析发现LcWRKY40和HvWRKY38亲缘关系接近。烟草(Nicotiana tabacum)亚细胞定位结果表明LcWRKY40蛋白定位于细胞核中,验证了软件预测。经qRT-PCR组织特异性表达分析表明LcWRKY40基因在羊草的根、茎、叶、叶鞘、稃和花药中都有表达,但表达量在叶中最高,稃中最低。利用水稻的白叶枯病菌、纹枯病菌、稻瘟病菌以及恶苗病菌对转基因LcWRKY40烟草植株与野生型烟草植株进行接菌试验,研究结果表明转基因LcWRKY40烟草植株对4种病菌有不同程度的缓解作用,对稻瘟病菌与恶苗病菌的侵害表现出较高抗性。因此推测LcWRKY40蛋白在抵御病害胁迫、提高植物病原菌抵抗力等信号途径中发挥关键调节作用。 展开更多
关键词 羊草 LcWRKY40基因 转基因烟草 抗病性
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小球藻亲环蛋白A的酶活性及过表达拟南芥抗盐性分析 被引量:1
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作者 廖栩 何明良 +4 位作者 张素艳 马海燕 王旭辉 罗秋香 管清杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期722-729,共8页
在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsC... 在前期研究中分离到噬碳酸盐小球藻(Chlorella sp.X1)的亲环蛋白基因CsCyp1A(登录号:KY207381),编码CsCyp1A蛋白是否具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性功能是进一步研究它参与小球藻耐盐生物学过程的基础。通过His标签的p QE-30-CsCyp1A原核蛋白表达载体,经IPTG诱导它的E.coli M15菌株表达融合蛋白,Nitra-柱纯化后获得纯化的30 kDa左右的His-CsCyp1A融合蛋白质,Western杂交检测到His CsCyp1A蛋白的杂交信号。酶活性分析显示,HisCsCyp1A融合蛋白中生色基团的产生速度明显快于对照,表明CsCyp1A蛋白可以催化底物N-succinyl-Xaa-Pro-Phe-p-nitroanilide中Xaa-Pro肽键的顺反折叠,说明纯化的CsCyp1A蛋白具有PPIase活性。典型的亲环蛋白家族成员具有肽酰脯氨酰顺反异构酶(PPIase)活性,参与折叠和转运、信号转导、免疫调节、细胞凋亡等生物学过程。真空渗入法侵染转化的拟南芥在35S启动子驱动下超表达CsCyp1A基因,耐盐性研究表明它提高了过表达株系对NaCl胁迫的耐性,揭示小球藻CsCyp1A基因的抗盐性功能,它将成为抗逆育种的基因资源。本研究也为探索小球藻亲环蛋白A的抗盐碱胁迫生物学作用和分子育种奠定了基础。 展开更多
关键词 噬碳酸盐小球藻 盐碱地 亲环蛋白A 肽脯氨酰顺反异构酶 原核表达蛋白
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高产玉米单交种──长单206
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作者 杨向东 管清杰 《农业科技通讯》 北大核心 2001年第6期35-35,共1页
关键词 玉米 长单206 高产单交种
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紫穗槐SKP2A基因的克隆及功能分析
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作者 王秋惠 李明慧 +5 位作者 都俊威 杨宇 杨丽华 胡霄桐 刘子昂 管清杰 《植物资源与环境学报》 2025年第6期59-67,共9页
为阐明紫穗槐(Amorpha fruticosa Linn.)SKP2A基因对激素和逆境信号的响应及其在叶绿素合成中的作用,克隆获得AfSKP2A(GenBank登录号ON045086),采用生物信息学方法分析其编码蛋白特性,检测该基因的组织表达特性及响应激素和胁迫的表达特... 为阐明紫穗槐(Amorpha fruticosa Linn.)SKP2A基因对激素和逆境信号的响应及其在叶绿素合成中的作用,克隆获得AfSKP2A(GenBank登录号ON045086),采用生物信息学方法分析其编码蛋白特性,检测该基因的组织表达特性及响应激素和胁迫的表达特性;构建过表达AfSKP2A山新杨(Populus davidiana×bolleana)株系,综合分析其叶色变化及相关生理指标。结果表明:AfSKP2A基因编码蛋白的氨基酸残基数为374,为稳定的疏水性蛋白,含典型的F-box结构域及8个LRR结构域。该蛋白与白羽扇豆(Lupinus albus Linn.)SKP2A-like蛋白亲缘关系最近,且与另11种植物SKP2蛋白N端F-box的氨基酸序列一致性较高。基因表达分析结果显示:AfSKP2A在根、穗、叶、花中高表达,且在叶中的表达量受吲哚乙酸、脱落酸、水杨酸及NaCl和干旱胁迫强烈诱导。在线预测及瞬时表达实验均证实AfSKP2A蛋白定位于细胞质。过表达AfSKP2A山新杨株系叶片褪绿呈现紫斑,伴随叶绿素含量降低,光系统Ⅱ最大光化学效率(F _(v)/F_(m))下降,同时抗氧化酶基因PdAPX和PdSOD及糖酵解途径关键酶基因PdENO的表达显著上调。综上所述,AfSKP2A可能通过响应多种激素与非生物胁迫参与叶绿素代谢调控,并经由泛素化途径影响叶绿体功能。 展开更多
关键词 紫穗槐 AfSKP2A基因 激素响应 非生物胁迫 叶绿素代谢
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