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七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
1
作者
施灵玲
程燕咏
张磊
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1115-1123,共9页
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷...
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷的情况,将七氟烷组细胞使用3%七氟烷连续处理3 d,每日1次,每次处理2 h。OPC分化成熟为少突胶质细胞后,使用免疫荧光染色和蛋白质印迹法(Western blotting)检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和髓鞘关联糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)的表达情况。采用细胞增殖实验(BrdU、Ki67染色)、细胞存活率实验(CCK8)检测七氟烷对OPC增殖能力和少突胶质细胞存活率的影响。采用Western blotting检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白含量。使用慢病毒转染技术,在OPC内过表达YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein F1,YTHDF1),后采用CCK8检测细胞增殖和存活情况。结果·免疫荧光结果提示,反复暴露于七氟烷会导致表达成熟髓鞘表面标志物(MBP、MAG)的原代少突胶质细胞数量减少;Western blotting结果表明,多次七氟烷处理导致原代OPC中caspase-3表达上调;CCK8结果表明,随着七氟烷处理次数的增加,原代OPC的存活率下降;然而,BrdU、Ki67染色结果显示,原代OPC在七氟烷处理后增殖能力增强。此外,过表达YTHDF1可以部分改善多次七氟烷处理而导致的原代OPC存活率下降(均P<0.05)。结论·多次七氟烷处理损伤原代少突胶质细胞的成髓鞘能力和存活率,表现为部分原代OPC凋亡;同时七氟烷处理代偿性提高了存活的原代OPC的增殖能力。
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关键词
七氟烷
少突胶质细胞
髓鞘
细胞增殖
凋亡
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职称材料
长链非编码RNA Peg13在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用
被引量：
2
2
作者
蒋云凤
程燕咏
孙宇
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期469-477,共9页
目的研究长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)Peg13(paternally expressed 13)在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用。方法以胎龄为 14.5 d 的小鼠胎鼠的原代神经元为研究对象,实时定量 PCR 检测七氟烷处理不同时间后 ln...
目的研究长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)Peg13(paternally expressed 13)在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用。方法以胎龄为 14.5 d 的小鼠胎鼠的原代神经元为研究对象,实时定量 PCR 检测七氟烷处理不同时间后 lncRNAPeg13 的表达水平。荧光原位杂交实验检测 lncRNA Peg13 在原代神经元中的定位。构建 lncRNA Peg13 过表达和敲减质粒,分别转染原代神经元。4.1%的七氟烷处理 6 h 后,荧光显微镜观察原代神经元的形态改变;采用 CCK-8 分析原代神经元的活力;采用 TUNEL、Western blotting 检测原代神经元的凋亡程度。结果在七氟烷处理的原代神经元中,lncRNA Peg13 的表达水平呈时间依赖性下降。LncRNA Peg13 在原代神经元的细胞质和轴突中广泛表达。过表达 lncRNA Peg13 可明显缓解七氟烷处理所致的神经元形态改变,导致神经元活力提高,凋亡细胞比例减少,Bcl-2、Bax 蛋白表达量的比值(Bcl-2/Bax)升高,caspase-3 的表达水平降低。敲减 lncRNAPeg13 可明显加剧七氟烷处理所致的神经元形态改变,导致神经元活力降低,凋亡细胞比例增加,Bcl-2/Bax 降低,caspase-3 的表达水平升高。结论 LncRNA Peg13 能够缓解七氟烷诱导的发育期原代神经元的凋亡。
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关键词
七氟烷
长链非编码RNA
Peg13
发育期原代神经元
细胞活性
细胞凋亡
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职称材料
题名
七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
1
作者
施灵玲
程燕咏
张磊
机构
上海交通大学医学院附属第九人民医院麻醉科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1115-1123,共9页
基金
国家自然科学基金(82171173,82201321)
上海市“科技创新行动计划”启明星项目(扬帆专项)(22YF1422500)
上海交通大学医学院“双百人”项目(20191818)。
文摘
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷的情况,将七氟烷组细胞使用3%七氟烷连续处理3 d,每日1次,每次处理2 h。OPC分化成熟为少突胶质细胞后,使用免疫荧光染色和蛋白质印迹法(Western blotting)检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和髓鞘关联糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)的表达情况。采用细胞增殖实验(BrdU、Ki67染色)、细胞存活率实验(CCK8)检测七氟烷对OPC增殖能力和少突胶质细胞存活率的影响。采用Western blotting检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白含量。使用慢病毒转染技术,在OPC内过表达YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein F1,YTHDF1),后采用CCK8检测细胞增殖和存活情况。结果·免疫荧光结果提示,反复暴露于七氟烷会导致表达成熟髓鞘表面标志物(MBP、MAG)的原代少突胶质细胞数量减少;Western blotting结果表明,多次七氟烷处理导致原代OPC中caspase-3表达上调;CCK8结果表明,随着七氟烷处理次数的增加,原代OPC的存活率下降;然而,BrdU、Ki67染色结果显示,原代OPC在七氟烷处理后增殖能力增强。此外,过表达YTHDF1可以部分改善多次七氟烷处理而导致的原代OPC存活率下降(均P<0.05)。结论·多次七氟烷处理损伤原代少突胶质细胞的成髓鞘能力和存活率,表现为部分原代OPC凋亡;同时七氟烷处理代偿性提高了存活的原代OPC的增殖能力。
关键词
七氟烷
少突胶质细胞
髓鞘
细胞增殖
凋亡
Keywords
sevoflurane
oligodendrocyte
myelin
cell proliferation
apoptosis
分类号
R614.2 [医药卫生—麻醉学]
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题名
长链非编码RNA Peg13在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用
被引量：
2
2
作者
蒋云凤
程燕咏
孙宇
机构
上海交通大学医学院附属第九人民医院麻醉科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期469-477,共9页
基金
上海市自然科学基金(18ZR1422900)~~
文摘
目的研究长链非编码 RNA(long non-coding RNA,lncRNA)Peg13(paternally expressed 13)在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用。方法以胎龄为 14.5 d 的小鼠胎鼠的原代神经元为研究对象,实时定量 PCR 检测七氟烷处理不同时间后 lncRNAPeg13 的表达水平。荧光原位杂交实验检测 lncRNA Peg13 在原代神经元中的定位。构建 lncRNA Peg13 过表达和敲减质粒,分别转染原代神经元。4.1%的七氟烷处理 6 h 后,荧光显微镜观察原代神经元的形态改变;采用 CCK-8 分析原代神经元的活力;采用 TUNEL、Western blotting 检测原代神经元的凋亡程度。结果在七氟烷处理的原代神经元中,lncRNA Peg13 的表达水平呈时间依赖性下降。LncRNA Peg13 在原代神经元的细胞质和轴突中广泛表达。过表达 lncRNA Peg13 可明显缓解七氟烷处理所致的神经元形态改变,导致神经元活力提高,凋亡细胞比例减少,Bcl-2、Bax 蛋白表达量的比值(Bcl-2/Bax)升高,caspase-3 的表达水平降低。敲减 lncRNAPeg13 可明显加剧七氟烷处理所致的神经元形态改变,导致神经元活力降低,凋亡细胞比例增加,Bcl-2/Bax 降低,caspase-3 的表达水平升高。结论 LncRNA Peg13 能够缓解七氟烷诱导的发育期原代神经元的凋亡。
关键词
七氟烷
长链非编码RNA
Peg13
发育期原代神经元
细胞活性
细胞凋亡
Keywords
sevoflurane
long non-coding RNA Peg13
developing primary neuron
cell vability
apoptosis
分类号
R614 [医药卫生—麻醉学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
施灵玲
程燕咏
张磊
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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2
长链非编码RNA Peg13在七氟烷所致的发育期原代神经元凋亡中的作用
蒋云凤
程燕咏
孙宇
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2019
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