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弓形虫P30基因MBP融合蛋白的表达
被引量：
5
1
作者
丛华
古钦民
+2 位作者
黄勇
李瑛
禹卉
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第1期29-31,共3页
目的 构建弓形虫主要表面抗原Ｐ３０ 基因的原核表达载体并在Ｅ－ｃｏｌｉ 中表达。方法 根据已发表的弓形虫Ｐ３０基因序列，自行设计合成一对引物并在引物５’端分别引入限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳａｌＩ酶切位点，用ＰＣＲ技术从...
目的 构建弓形虫主要表面抗原Ｐ３０ 基因的原核表达载体并在Ｅ－ｃｏｌｉ 中表达。方法 根据已发表的弓形虫Ｐ３０基因序列，自行设计合成一对引物并在引物５’端分别引入限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳａｌＩ酶切位点，用ＰＣＲ技术从弓形虫ＲＨ 株基因组ＤＮＡ中扩增Ｐ３０ 基因片段，插入ｐＭＡＬＰ２ 质粒转化大肠杆菌ＤＨ５ａα感受态细胞，于氨苄ＬＢ培养平板上筛选阳性克隆，经过酶切及ＰＣＲ扩增鉴定重组子。将阳性重组子经ＩＰＴＧ诱导表达，ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ及免疫印迹分析。结果 从弓形虫ＲＨ 株ＤＮＡ中扩增出９７６ｂｐ 的Ｐ３０ 基因，构建成功ｐＭＡＬＰ２ － Ｐ３０ 重组质粒；ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎ － ｂｌｏｔ 显示ＭＢＰ／Ｐ３０ 融合蛋白条带的分子量约为７７－５ｋＤ，减去ＭＢＰ的分子量４３ｋＤ，得出Ｐ３０ 蛋白分子量为３４－５ｋＤ，且能被弓形虫高免鼠血清识别。结论 从弓形虫基因组ＤＮＡ中获取Ｐ３０ 基因，并成功构建ｐＭＡＬＰ２ － Ｐ３０ 重组质粒，诱导表达了Ｐ３０ 的融合蛋白。为进一步Ｐ３０ 蛋白的分离纯化及其对动物的免疫原性研究作好准备。
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关键词
弓形虫
P30基因
融合蛋白
基因表达
MBP
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职称材料
济南地区牛隐孢子虫病调查
2
作者
郭淑玲
袁方曙
+7 位作者
禹卉
于安珂
韩玉敏
王长岭
周根宝
聂克平
刘宝贵
祁世荣
《中国畜禽传染病》
CSCD
1993年第1期34-35,共2页
隐孢子虫(cryptosporidium)最早被Tyzzer(1907)发现于小鼠胃腺组织中。隐孢子虫病为人兽共患寄生虫病。近年来,部分省市陆续有发现本病流行的报道。鉴于人隐孢子虫的感染多年来自与人类关系密切的家畜,为此,作者对济南地区奶牛的感染及...
隐孢子虫(cryptosporidium)最早被Tyzzer(1907)发现于小鼠胃腺组织中。隐孢子虫病为人兽共患寄生虫病。近年来,部分省市陆续有发现本病流行的报道。鉴于人隐孢子虫的感染多年来自与人类关系密切的家畜,为此,作者对济南地区奶牛的感染及发病情况进行了初步调查,现报告如下。
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关键词
牛病
隐孢子虫病
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职称材料
题名
弓形虫P30基因MBP融合蛋白的表达
被引量：
5
1
作者
丛华
古钦民
黄勇
李瑛
禹卉
机构
山东医科大学寄生虫教研室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000年第1期29-31,共3页
基金
山东省卫生厅科研资助
文摘
目的 构建弓形虫主要表面抗原Ｐ３０ 基因的原核表达载体并在Ｅ－ｃｏｌｉ 中表达。方法 根据已发表的弓形虫Ｐ３０基因序列，自行设计合成一对引物并在引物５’端分别引入限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳａｌＩ酶切位点，用ＰＣＲ技术从弓形虫ＲＨ 株基因组ＤＮＡ中扩增Ｐ３０ 基因片段，插入ｐＭＡＬＰ２ 质粒转化大肠杆菌ＤＨ５ａα感受态细胞，于氨苄ＬＢ培养平板上筛选阳性克隆，经过酶切及ＰＣＲ扩增鉴定重组子。将阳性重组子经ＩＰＴＧ诱导表达，ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ及免疫印迹分析。结果 从弓形虫ＲＨ 株ＤＮＡ中扩增出９７６ｂｐ 的Ｐ３０ 基因，构建成功ｐＭＡＬＰ２ － Ｐ３０ 重组质粒；ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎ － ｂｌｏｔ 显示ＭＢＰ／Ｐ３０ 融合蛋白条带的分子量约为７７－５ｋＤ，减去ＭＢＰ的分子量４３ｋＤ，得出Ｐ３０ 蛋白分子量为３４－５ｋＤ，且能被弓形虫高免鼠血清识别。结论 从弓形虫基因组ＤＮＡ中获取Ｐ３０ 基因，并成功构建ｐＭＡＬＰ２ － Ｐ３０ 重组质粒，诱导表达了Ｐ３０ 的融合蛋白。为进一步Ｐ３０ 蛋白的分离纯化及其对动物的免疫原性研究作好准备。
关键词
弓形虫
P30基因
融合蛋白
基因表达
MBP
Keywords
Toxoplasma gondii, P30gene
fusion
expression
分类号
R531.802 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
济南地区牛隐孢子虫病调查
2
作者
郭淑玲
袁方曙
禹卉
于安珂
韩玉敏
王长岭
周根宝
聂克平
刘宝贵
祁世荣
机构
山东医科大学寄生虫学教研室
济南牧工商联合公司
出处
《中国畜禽传染病》
CSCD
1993年第1期34-35,共2页
文摘
隐孢子虫(cryptosporidium)最早被Tyzzer(1907)发现于小鼠胃腺组织中。隐孢子虫病为人兽共患寄生虫病。近年来,部分省市陆续有发现本病流行的报道。鉴于人隐孢子虫的感染多年来自与人类关系密切的家畜,为此,作者对济南地区奶牛的感染及发病情况进行了初步调查,现报告如下。
关键词
牛病
隐孢子虫病
分类号
S858.235.9 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫P30基因MBP融合蛋白的表达
丛华
古钦民
黄勇
李瑛
禹卉
《中国人兽共患病杂志》
CSCD
北大核心
2000
5
在线阅读
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职称材料
2
济南地区牛隐孢子虫病调查
郭淑玲
袁方曙
禹卉
于安珂
韩玉敏
王长岭
周根宝
聂克平
刘宝贵
祁世荣
《中国畜禽传染病》
CSCD
1993
0
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