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雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
陆灵松
沈梅玲
+5 位作者
祝珊珊
(
指导
)
刘敏
毕丽伟
李海浪
秦飞
李杰
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期1306-1310,共5页
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利...
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。
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关键词
雄激素受体
慢病毒干扰
PTEN
肝癌
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题名
雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
被引量：
1
1
作者
陆灵松
沈梅玲
祝珊珊
(
指导
)
刘敏
毕丽伟
李海浪
秦飞
李杰
机构
厦门医学院药学系药物检测中心
厦门医学院基础医学部
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期1306-1310,共5页
基金
福建省中青年教师教育科研项目(JAT200717)
福建省大学生创新训练项目(S202112631033)
厦门医学院金课建设培育计划项目(XBJK2019017)。
文摘
目的:构建敲减人雄激素受体(AR)基因的慢病毒质粒,转染Hep3B细胞使其表达目的蛋白并探索其对PTEN、p-AKT蛋白表达的影响。方法:设计合成3对针对AR基因特异性敲减的寡核苷酸片段,分别连接于重组慢病毒载体pLKO.1,构建3条AR干扰载体。利用验证正确的3个慢病毒载体转染293T细胞得到慢病毒上清液。采用RT-PCR和Western blot在5株肝癌细胞中挑选AR高表达的细胞系进行AR慢病毒上清液感染。RT-PCR和Western blot检测3条AR干扰质粒在Hep3B细胞内的表达及其对PTEN、p-AKT蛋白表达的作用。结果:测序鉴定证实3条AR慢病毒干扰载体构建成功,干扰Hep3B细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示其中1条AR干扰后的mRNA和蛋白表达明显降低,细胞内PTEN蛋白表达升高,p-AKT表达降低。结论:成功构建3条AR干扰载体,其中1条干扰效率较高,能在Hep3B细胞中干扰AR的表达,感染细胞后上调抑癌基因PTEN的蛋白表达对p-AKT有抑制作用,提示AR和PTEN/AKT信号通路可能具有相关性。
关键词
雄激素受体
慢病毒干扰
PTEN
肝癌
Keywords
Androgen receptor
Lentiviral interference
PTEN
HCC
分类号
Q2-33 [生物学—细胞生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雄激素受体基因慢病毒干扰载体的构建及在肝癌细胞中的表达
陆灵松
沈梅玲
祝珊珊
(
指导
)
刘敏
毕丽伟
李海浪
秦飞
李杰
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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