仔猪腹泻大肠杆菌流行株鉴定及毒力与耐药性分析 被引量：17

1

作者 刘哲 孙洋 +5 位作者 纪雪 郭学军 刘军 祝令伟 周伟 冯书章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1226-1232,共7页

为明确河南地区一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病原特性及其耐药谱,本研究对肠道致病大肠杆菌进行了分离鉴定。对腹泻仔猪粪便中分离的大肠杆菌进行13种毒力基因检测和21种抗生素的药敏试验。结果显示,34.8%分离株检出EAST1基因;... 为明确河南地区一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病原特性及其耐药谱,本研究对肠道致病大肠杆菌进行了分离鉴定。对腹泻仔猪粪便中分离的大肠杆菌进行13种毒力基因检测和21种抗生素的药敏试验。结果显示,34.8%分离株检出EAST1基因;所获分离株均为多重耐药菌株,且至少对5类抗生素耐药,耐9类以上抗生素的菌株达到75.3%,对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率达到100.0%。细菌种系进化分群结果显示,21.7%分离株属于有致病性的B2群和D群。本研究获得了腹泻仔猪大肠杆菌分离株的毒力基因、耐药谱的基本数据和种系进化分群的遗传背景,为制定有针对性的治疗和防控技术方案提供依据。 展开更多

关键词 新生仔猪 腹泻 大肠杆菌 毒力基因 耐药性

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宠物源大肠埃希菌的分离鉴定和耐药性研究 被引量：9

2

作者 刘果 纪雪 +6 位作者 孙洋 刘哲 祝令伟 刘军 周伟 郭学军 冯书章 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期120-124,共5页

为调查长春地区宠物源大肠埃希菌耐药流行情况,从2家宠物医院采集135份宠物肛拭子样品,分离和鉴定大肠埃希菌并进行多重PCR分群。测定大肠埃希菌分离株对19种抗菌药物的耐药性,并鉴定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型。共分离鉴定获得95株... 为调查长春地区宠物源大肠埃希菌耐药流行情况,从2家宠物医院采集135份宠物肛拭子样品,分离和鉴定大肠埃希菌并进行多重PCR分群。测定大肠埃希菌分离株对19种抗菌药物的耐药性,并鉴定超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型。共分离鉴定获得95株宠物源大肠埃希菌,它们对氨苄西林和哌拉西林的耐药率最高(78.9%和76.8%);其次是四环素(61.6%);对头孢唑林、头孢噻肟、头孢吡肟、庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均超过了50%;所有分离株均对亚胺培南和美罗培南敏感。其中15个分离株对受试的抗菌药物全部敏感(15.8%),63株呈多重耐药表型(66.3%)。ESBLs型菌株占53.7%。本研究探明了长春地区宠物源大肠埃希菌的耐药流行情况,对宠物临床上用药具有指导价值。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 耐药性 超广谱Β内酰胺酶 宠物

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肠出血性大肠埃希菌O157：H7多重PCR检测方法的建立 被引量：2

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作者 纪雪 张雪 +8 位作者 孙洋 孙诗雯 祝令伟 刘军 姜海艳 周伟 梁冰 郭学军 刘彦晶 《动物医学进展》 北大核心 2017年第7期1-6,共6页

为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等... 为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×10~3CFU。从检测阳性样本中均分离到目的菌。应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定。成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 多重PCR 检测 rfbE基因

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长春地区猪源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析 被引量：16

4

作者 王基伟 孙洋 +7 位作者 纪雪 刘军 祝令伟 周伟 佟盼盼 郭学军 李晓慧 冯书章 《中国兽药杂志》 2014年第11期14-18,共5页

为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重PCR方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和... 为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重PCR方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和磺胺甲基异恶唑耐药最严重(83.63%、52.72%、51.27%),全部菌株对美洛培南、多粘菌素敏感,其中176株菌表现为对3类以上抗生素的多重耐药(64.00%)。从仔猪腹泻样品分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素、四环素、氯霉素及磺胺甲基异恶唑的耐药率显著高于健康猪和猪肉样品分离株的耐药率。大肠杆菌分离株主要为A群和B1群。研究获得了吉林长春地区猪源大肠杆菌耐药性的基本流行病学数据,为指导养殖业的临床用药及耐药性监测提供了依据。 展开更多

关键词 猪 大肠杆菌 耐药性

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超级细菌NDM-1质粒的水平转移研究

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作者 刘果 孙洋 +6 位作者 纪雪 佟盼盼 祝令伟 刘军 周伟 郭学军 冯书章 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第10期15-21,共7页

为探究超级细菌NDM-1质粒水平传播的特性,以携带NDM-1质粒的猫源洛菲不动杆菌和人源醋酸钙不动杆菌为供体菌,以工程菌株大肠杆菌DH5α和大肠杆菌、沙门氏菌弱毒菌株为受体菌,通过接合试验验证了NDM-1基因通过质粒跨种传播的可能性。结... 为探究超级细菌NDM-1质粒水平传播的特性,以携带NDM-1质粒的猫源洛菲不动杆菌和人源醋酸钙不动杆菌为供体菌,以工程菌株大肠杆菌DH5α和大肠杆菌、沙门氏菌弱毒菌株为受体菌,通过接合试验验证了NDM-1基因通过质粒跨种传播的可能性。结果显示,猫源NDM-1质粒可以转入E.coli DH5α中,并可以DH5α为中介,转入猪霍乱沙门氏菌C500中;而人源NDM-1质粒仅转入E.coli DH5α中,未能转入其他菌株。NDM-1质粒在沙门氏菌C500中比在E.coli DH5α中较为稳定遗传。质粒的导入并不影响宿主菌的生长特性。本研究初步揭示了NDM-1的传播方式,表明NDM-1质粒能够跨越菌种界限,并可以大肠杆菌为中介,转移至其它菌株中。 展开更多

关键词 新德里β内酰胺酶-1 接合转移 水平传播

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犊牛腹泻主要病原菌多重PCR方法的建立 被引量：9

6

作者 高立战 刘军 +5 位作者 赵学前 孙栋 姜力 孙洋 祝令伟 冯书章 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期30-34,共5页

产毒性大肠埃希菌、A/E大肠埃希菌和沙门菌是造成犊牛腹泻的主要病原菌。选取产毒性大肠埃希菌的st和lt基因、A/E大肠埃希菌的eae基因和沙门菌的invA基因作为扩增靶基因序列,通过优化反应条件建立了四重PCR检测体系。对PCR产物回收、测... 产毒性大肠埃希菌、A/E大肠埃希菌和沙门菌是造成犊牛腹泻的主要病原菌。选取产毒性大肠埃希菌的st和lt基因、A/E大肠埃希菌的eae基因和沙门菌的invA基因作为扩增靶基因序列,通过优化反应条件建立了四重PCR检测体系。对PCR产物回收、测序,验证PCR。通过特异性试验和敏感性试验证明该PCR体系特异性强、敏感性高,可有效地检测犊牛腹泻病原菌。使用该四重PCR检测22份临床样品,发现其中9份携带相关基因,并分离得到了相关致病菌。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 沙门菌 多重PCR

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自平衡测试技术在PBA暗挖车站基桩承载力测试中的应用 被引量：1

7

作者 胡运 郭瑞 祝令伟 《市政技术》 2024年第8期168-174,共7页

随着轨道交通建设的快速发展,在城市核心区建设地铁车站大多数采用PBA法施工。对于双层四导洞暗挖车站最重要的是中桩和边桩的施工,在上层导洞边桩冠梁施工及车站扣拱作用下,中桩作为临时构件,承受上部结构荷载,因此对中桩承载力要求较... 随着轨道交通建设的快速发展,在城市核心区建设地铁车站大多数采用PBA法施工。对于双层四导洞暗挖车站最重要的是中桩和边桩的施工,在上层导洞边桩冠梁施工及车站扣拱作用下,中桩作为临时构件,承受上部结构荷载,因此对中桩承载力要求较高,边桩作为车站永久构件,中桩和边桩承载力关系到车站结构安全。为了检验基桩的实际承载力是否满足设计要求,需要对基桩进行静载试验。已有对基桩静载试验的方法如传统堆载法、锚桩法在PBA暗挖车站内无法实施,所以当前对PBA法施工的基桩只能采用自平衡法检测基桩承载力。从某PBA暗挖车站选取边桩B3在钢筋笼埋设荷载箱,进行了自平衡基桩承载力试验,得出上段桩和下段桩荷载-位移(Q-s)曲线,通过上、下段桩Q-s曲线等效转换,最后得出该桩满足设计规定的承载能力。 展开更多

关键词 轨道交通 PBA法 自平衡法 基桩承载力

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克氏原鳌虾产ESBLs大肠杆菌的分离鉴定与耐药研究

8

作者 贾敏 周伟 +8 位作者 韩一啸 梁冰 梁津豪 纪雪 孙洋 刘军 祝令伟 陈萍 郭学军 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第4期6-10,共5页

为了解克氏原螯虾产ESBLs大肠杆菌的耐药流行情况,采集来自山东、江苏、浙江、湖北和辽宁五省共计198份活体克氏原螯虾肠道样品,采用头孢噻肟抗性选择性培养基培养、PCR方法和BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定/药敏系统筛选、鉴定产ES... 为了解克氏原螯虾产ESBLs大肠杆菌的耐药流行情况,采集来自山东、江苏、浙江、湖北和辽宁五省共计198份活体克氏原螯虾肠道样品,采用头孢噻肟抗性选择性培养基培养、PCR方法和BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定/药敏系统筛选、鉴定产ESBLs大肠杆菌并检测其药物敏感性。结果显示,从198份克氏原螯虾样品中共分离获得107株产ESBLs大肠杆菌,分离率为54.0%。所有分离菌株对青霉素类、一代头孢和部分三代头孢菌素均耐药;对四环素类、氟喹诺酮类、氯霉素类和磺胺类药物的耐药率均在60%以上(>65株);对氨基糖苷类药物耐药率较低;多重耐药(R≥3类)菌株所占比例为86.7%(96/107),且以5类(30%,31/107)和6类耐药(28%,30/107)为主。通过试验初步获得了克氏原螯虾产ESBLs大肠杆菌耐药水平的基础数据,为克氏原螯虾细菌耐药性防控和水产品公共卫生监测奠定基础。 展开更多

关键词 克氏原螯虾 产ESBLs大肠杆菌 多重耐药

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畜禽源耐黏菌素大肠埃希氏菌的分离鉴定与特性分析 被引量：3

9

作者 王莹 卢葛锦 +7 位作者 景洁 祝令伟 关佳瑶 郑林 孙诗雯 刘铭威 纪雪 郭学军 《动物医学进展》 北大核心 2022年第11期27-33,共7页

我国从2017年4月30日起禁止将黏菌素作为动物促生长剂使用,为评估禁用政策效果,并了解畜禽源耐黏菌素大肠埃希氏菌对临床常用药物的耐药情况,在2017年和2020年分别从长春市3个畜禽养殖场采集373份粪便样品分离鉴定出546株耐黏菌素大肠... 我国从2017年4月30日起禁止将黏菌素作为动物促生长剂使用,为评估禁用政策效果,并了解畜禽源耐黏菌素大肠埃希氏菌对临床常用药物的耐药情况,在2017年和2020年分别从长春市3个畜禽养殖场采集373份粪便样品分离鉴定出546株耐黏菌素大肠埃希氏菌。分离菌株对黏菌素的MIC为0.25 mg/L~8 mg/L,2020年MIC≥2 mg/L菌株分离率(18.02%)低于2017年(26.24%);16种药物敏感性测定中,2017年和2020年均以耐4种抗生素占比最高,2020年多重耐药菌株占比(60.25%)低于2017年(80.85%);PCR鉴定出34株mcr-1基因阳性菌株,2020年mcr-1基因检出率(3.21%)低于2017年(14.89%);2017年mcr-1基因阳性大肠埃希氏菌中检测到12种类型质粒,2020年mcr-1基因阳性大肠埃希氏菌中检测到7种类型质粒,携带的质粒类型减少。结果表明,禁止黏菌素作为饲料添加剂使用后对大肠埃希氏菌的黏菌素耐药性有很大的影响,但多重耐药情况依然较严重,携带质粒复制子复杂多样,应当持续进行监测。 展开更多

关键词 黏菌素 大肠埃希氏菌 耐药性 mcr-1 质粒分型

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副溶血性弧菌耐药基因的研究进展 被引量：6

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作者 郑林 祝令伟 +1 位作者 郭学军 陈萍 《中国兽药杂志》 2019年第6期80-85,共6页

副溶血性弧菌为水产品主要致病菌之一,水产业和农业中抗生素的过量使用导致副溶血性弧菌对所推荐使用的抗生素产生了抗性,并且在副溶血性弧菌中已经发现了质粒和整合子等基因移动元件,更增加了与其他细菌发生耐药基因相互交换和重组的... 副溶血性弧菌为水产品主要致病菌之一,水产业和农业中抗生素的过量使用导致副溶血性弧菌对所推荐使用的抗生素产生了抗性,并且在副溶血性弧菌中已经发现了质粒和整合子等基因移动元件,更增加了与其他细菌发生耐药基因相互交换和重组的几率。对副溶血性弧菌的耐药研究现状、耐药机制和耐药基因的水平转移进行综述。 展开更多

关键词 副溶血性弧菌 耐药基因 水平转移

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淡水养殖鱼大肠埃希菌分离鉴定与耐药性研究 被引量：1

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作者 纪雪 邢新月 +6 位作者 梁冰 王诗雨 祝令伟 刘军 郭学军 孙诗雯 孙洋 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期80-84,共5页

为获取长春地区鱼源大肠埃希菌的耐药性情况,采集市场及养殖场淡水鱼样品进行大肠埃希菌的分离鉴定。测定分离株对19种抗菌药物的耐药性,并检测9种耐药基因和25种毒力相关基因,测定ESBLs表型大肠埃希菌分离株的O抗原血清型。结果表明,32... 为获取长春地区鱼源大肠埃希菌的耐药性情况,采集市场及养殖场淡水鱼样品进行大肠埃希菌的分离鉴定。测定分离株对19种抗菌药物的耐药性,并检测9种耐药基因和25种毒力相关基因,测定ESBLs表型大肠埃希菌分离株的O抗原血清型。结果表明,322份样品分离获得36株大肠埃希菌,分离率为11.2%,其中18株为A群,其余为B1群。分离株对头孢类抗生素、青霉素类抗生素、四环素和复方新诺明耐药性相对较高,耐药率不低于22%。9株分离株检测到四环素耐药基因tet(A),13株ESBLs表型菌株检测到1群blaCTX-M基因。ESBLs表型菌株的血清型中O164为优势血清型。部分菌株检测到毒力相关基因,包括fimC(94.4%)、ompT(30.6%)和ucD(5.6%)。结果表明,获得了长春地区鱼源大肠埃希菌带菌及耐药性情况,为淡水养殖鱼细菌性疾病的防控提供了一定的参考。 展开更多

关键词 淡水鱼 大肠埃希菌 耐药性 毒力相关基因

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