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紫花苜蓿UFO基因克隆及转化
被引量：
1
1
作者
石欣玥
贾丝俏
+3 位作者
李思峰
孙嘉鑫
韩烈保
晁跃辉
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期727-733,共7页
紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草。为研究UFO(Unusual Floral Organs)基因相关功能,以紫花苜蓿中苜1号为试验材料,利用PCR技术在紫花苜蓿中克隆出UFO基因。通过DNA重组技术成功构建3302-3flag-UFO植物表达载体,利用农杆...
紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草。为研究UFO(Unusual Floral Organs)基因相关功能,以紫花苜蓿中苜1号为试验材料,利用PCR技术在紫花苜蓿中克隆出UFO基因。通过DNA重组技术成功构建3302-3flag-UFO植物表达载体,利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行转基因操作,最终获得转基因紫花苜蓿。试验中激素浓度配比与植物表达载体的改良,提高了紫花苜蓿转基因过程中的转化率,而激素种类与配比则影响抗性愈伤的形成与愈伤组织的玻璃化程度。本试验共获得67个抗性愈伤,最终有56个分化成幼嫩紫花苜蓿转基因植株,炼苗入土获得17株转基因植株。遗传转化过程中获得的转基因植株为进一步研究UFO基因功能提供材料。
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关键词
紫花苜蓿
UFO基因
转基因
PCR检测
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职称材料
紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的克隆及转化
被引量：
2
2
作者
石欣玥
尚骁尧
+2 位作者
周玲芳
张铁军
晁跃辉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期13-21,共9页
紫花苜蓿(Medicago sativa)为重要的豆科牧草植物,研究紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的功能,为探究MsAP_(2)的信号转导网络提供理论指导和材料基础,也为紫花苜蓿生物技术育种提供一定的参考和借鉴。运用RT-PCR技术克隆MsAP_(2),利用DNA...
紫花苜蓿(Medicago sativa)为重要的豆科牧草植物,研究紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的功能,为探究MsAP_(2)的信号转导网络提供理论指导和材料基础,也为紫花苜蓿生物技术育种提供一定的参考和借鉴。运用RT-PCR技术克隆MsAP_(2),利用DNA重组技术构建3302-3flag-AP_(2)植物表达载体,并利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行遗传转化,对再生植株进行转基因鉴定、基因表达量分析、内源激素的测定(脱落酸、细胞分裂素、生长素和赤霉素)和表型鉴定。结果表明,成功获得转MsAP_(2)紫花苜蓿植株,与野生型相比,转基因植株的MsAP_(2)表达量和激素水平均发生明显改变,转基因植株呈现早衰性状,叶片形态和大小发生改变,根系生长受到抑制,分枝数发生改变。
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关键词
紫花苜蓿
AP_(2)/ERF转录因子
MsAP_(2)
转基因
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职称材料
蒺藜苜蓿细胞分裂素响应调节因子ARR9自激活检测及表达分析
被引量：
2
3
作者
尚骁尧
周玲芳
+4 位作者
石欣玥
王梦迪
张铁军
晁跃辉
赵彦
《中国草地学报》
CSCD
北大核心
2021年第12期1-10,共10页
细胞分裂素响应调节因子ARR在植物细胞分裂素信号转导过程中扮演重要角色。以豆科模式植物蒺藜苜蓿R108为材料,采用RT-PCR技术克隆蒺藜苜蓿ARR9基因,通过生物信息学分析、酵母转录自激活检测、原核表达及表达特征分析,探究蒺藜苜蓿ARR9...
细胞分裂素响应调节因子ARR在植物细胞分裂素信号转导过程中扮演重要角色。以豆科模式植物蒺藜苜蓿R108为材料,采用RT-PCR技术克隆蒺藜苜蓿ARR9基因,通过生物信息学分析、酵母转录自激活检测、原核表达及表达特征分析,探究蒺藜苜蓿ARR9基因功能。结果表明:蒺藜苜蓿ARR9基因编码区全长501bp,编码167个氨基酸,分子量18.95kD,理论等电点为6.21。生物信息学分析表明,ARR9可能参与转录调控、响应细胞分裂素及红光、细胞分裂素磷酸化信号转导及昼夜节律等过程。进化分析表明,蒺藜苜蓿ARR9蛋白与鹰嘴豆ARR蛋白亲缘关系最为接近。蒺藜苜蓿ARR9无转录自激活活性。在大肠杆菌Rosetta(DE3)中成功诱导蒺藜苜蓿ARR9蛋白表达,融合蛋白大小在25kD左右,Western Blot证实ARR9蛋白表达成功。蒺藜苜蓿ARR9基因在根中表达量最高,其表达受ABA的抑制,受IAA的短期(2~12h)抑制。
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关键词
ARR9
蒺藜苜蓿
转录自激活
原核表达
表达特征
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职称材料
题名
紫花苜蓿UFO基因克隆及转化
被引量：
1
1
作者
石欣玥
贾丝俏
李思峰
孙嘉鑫
韩烈保
晁跃辉
机构
北京林业大学草业与草原学院
北京市花木有限公司
出处
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期727-733,共7页
基金
国家自然科学基金(31672477)。
文摘
紫花苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草。为研究UFO(Unusual Floral Organs)基因相关功能,以紫花苜蓿中苜1号为试验材料,利用PCR技术在紫花苜蓿中克隆出UFO基因。通过DNA重组技术成功构建3302-3flag-UFO植物表达载体,利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行转基因操作,最终获得转基因紫花苜蓿。试验中激素浓度配比与植物表达载体的改良,提高了紫花苜蓿转基因过程中的转化率,而激素种类与配比则影响抗性愈伤的形成与愈伤组织的玻璃化程度。本试验共获得67个抗性愈伤,最终有56个分化成幼嫩紫花苜蓿转基因植株,炼苗入土获得17株转基因植株。遗传转化过程中获得的转基因植株为进一步研究UFO基因功能提供材料。
关键词
紫花苜蓿
UFO基因
转基因
PCR检测
Keywords
alfalfa
UFO gene
transgenosis
PCR detection
分类号
S541.9 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的克隆及转化
被引量：
2
2
作者
石欣玥
尚骁尧
周玲芳
张铁军
晁跃辉
机构
北京林业大学草业与草原学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期13-21,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(31772656)。
文摘
紫花苜蓿(Medicago sativa)为重要的豆科牧草植物,研究紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的功能,为探究MsAP_(2)的信号转导网络提供理论指导和材料基础,也为紫花苜蓿生物技术育种提供一定的参考和借鉴。运用RT-PCR技术克隆MsAP_(2),利用DNA重组技术构建3302-3flag-AP_(2)植物表达载体,并利用农杆菌介导法对紫花苜蓿进行遗传转化,对再生植株进行转基因鉴定、基因表达量分析、内源激素的测定(脱落酸、细胞分裂素、生长素和赤霉素)和表型鉴定。结果表明,成功获得转MsAP_(2)紫花苜蓿植株,与野生型相比,转基因植株的MsAP_(2)表达量和激素水平均发生明显改变,转基因植株呈现早衰性状,叶片形态和大小发生改变,根系生长受到抑制,分枝数发生改变。
关键词
紫花苜蓿
AP_(2)/ERF转录因子
MsAP_(2)
转基因
Keywords
Medicago sativa L.
AP_(2)/ERF transcription factor
MsAP_(2)gene
transgene
分类号
S541.9 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
蒺藜苜蓿细胞分裂素响应调节因子ARR9自激活检测及表达分析
被引量：
2
3
作者
尚骁尧
周玲芳
石欣玥
王梦迪
张铁军
晁跃辉
赵彦
机构
北京林业大学草业与草原学院
内蒙古农业大学草原与资源环境学院
出处
《中国草地学报》
CSCD
北大核心
2021年第12期1-10,共10页
基金
国家自然科学基金面上项目“紫花苜蓿产量性状配合力的分子遗传机理与预测模型分析”(31772656)。
文摘
细胞分裂素响应调节因子ARR在植物细胞分裂素信号转导过程中扮演重要角色。以豆科模式植物蒺藜苜蓿R108为材料,采用RT-PCR技术克隆蒺藜苜蓿ARR9基因,通过生物信息学分析、酵母转录自激活检测、原核表达及表达特征分析,探究蒺藜苜蓿ARR9基因功能。结果表明:蒺藜苜蓿ARR9基因编码区全长501bp,编码167个氨基酸,分子量18.95kD,理论等电点为6.21。生物信息学分析表明,ARR9可能参与转录调控、响应细胞分裂素及红光、细胞分裂素磷酸化信号转导及昼夜节律等过程。进化分析表明,蒺藜苜蓿ARR9蛋白与鹰嘴豆ARR蛋白亲缘关系最为接近。蒺藜苜蓿ARR9无转录自激活活性。在大肠杆菌Rosetta(DE3)中成功诱导蒺藜苜蓿ARR9蛋白表达,融合蛋白大小在25kD左右,Western Blot证实ARR9蛋白表达成功。蒺藜苜蓿ARR9基因在根中表达量最高,其表达受ABA的抑制,受IAA的短期(2~12h)抑制。
关键词
ARR9
蒺藜苜蓿
转录自激活
原核表达
表达特征
Keywords
ARR9
Medicago truncatula
Transcriptional self-activation
Prokaryotic expression
Expression pattern
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
紫花苜蓿UFO基因克隆及转化
石欣玥
贾丝俏
李思峰
孙嘉鑫
韩烈保
晁跃辉
《植物遗传资源学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
紫花苜蓿转录因子基因MsAP_(2)的克隆及转化
石欣玥
尚骁尧
周玲芳
张铁军
晁跃辉
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
蒺藜苜蓿细胞分裂素响应调节因子ARR9自激活检测及表达分析
尚骁尧
周玲芳
石欣玥
王梦迪
张铁军
晁跃辉
赵彦
《中国草地学报》
CSCD
北大核心
2021
2
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