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E49F对麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的活性分析
1
作者
石嘉宁
吴俊涛
+2 位作者
崔彩霞
李同彪
周晨妍
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第20期221-227,共7页
为了探究酶表面氨基酸残基对催化性能的影响,对麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2进行分子改造。基于计算机模拟,预测了潜在的有益突变体E49F,通过定点突变构建突变酶基因xynZT-2E49F,并将原酶与突变酶基因转化...
为了探究酶表面氨基酸残基对催化性能的影响,对麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2进行分子改造。基于计算机模拟,预测了潜在的有益突变体E49F,通过定点突变构建突变酶基因xynZT-2E49F,并将原酶与突变酶基因转化大肠杆菌BL21(DE3)异源表达。酶学性质分析发现,突变酶XynEF最适温度为70℃,相比原酶XynZT-2提高了25℃,酶活力提高了6.4倍。酶动力学分析发现,突变酶的k cat/K_(m)值相比原酶提高了10.1倍,突变酶的K_(m)值明显下降,对底物的亲和力增强。通过酶与底物分子对接,揭示了底物在突变酶催化活性口袋内的结合构象以及酶活力提高的潜在原因。为GH43家族木聚糖酶的分子改造研究提供了基础。
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关键词
麦氏交替单胞菌
木聚糖酶
定点突变
酶学性质
分子对接
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职称材料
题名
E49F对麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的活性分析
1
作者
石嘉宁
吴俊涛
崔彩霞
李同彪
周晨妍
机构
新乡医学院生命科学技术学院
黄淮学院生物与食品工程学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第20期221-227,共7页
基金
河南省科技厅科技攻关项目(212102210652,222102110372)
河南省高等学校重点科研项目(21A180024
22A180022)。
文摘
为了探究酶表面氨基酸残基对催化性能的影响,对麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2进行分子改造。基于计算机模拟,预测了潜在的有益突变体E49F,通过定点突变构建突变酶基因xynZT-2E49F,并将原酶与突变酶基因转化大肠杆菌BL21(DE3)异源表达。酶学性质分析发现,突变酶XynEF最适温度为70℃,相比原酶XynZT-2提高了25℃,酶活力提高了6.4倍。酶动力学分析发现,突变酶的k cat/K_(m)值相比原酶提高了10.1倍,突变酶的K_(m)值明显下降,对底物的亲和力增强。通过酶与底物分子对接,揭示了底物在突变酶催化活性口袋内的结合构象以及酶活力提高的潜在原因。为GH43家族木聚糖酶的分子改造研究提供了基础。
关键词
麦氏交替单胞菌
木聚糖酶
定点突变
酶学性质
分子对接
Keywords
Alteromonas macleodii
xylanase
site-directed mutagenesis
enzymatic properties
molecular docking
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
E49F对麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的活性分析
石嘉宁
吴俊涛
崔彩霞
李同彪
周晨妍
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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