几种丝素材料细胞毒性的实验研究 被引量：15

1

作者 盛伟华 龚爱华 +5 位作者 李明忠 谢宇锋 缪竞成 杨吉成 姜海燕 卢神州 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期277-281,共5页

目的:研究不同交联方式的再生丝素膜(WL组,SD组,HY组)的细胞毒性及其影响细胞增殖的因素。方法:采用浸提液法,体外培养鼠胚真皮层纤维细胞,用MTT法检测细胞增殖活力和计算相对增殖率。结果:WL组,SD组再生丝素膜细胞毒性小于1级,有较强... 目的:研究不同交联方式的再生丝素膜(WL组,SD组,HY组)的细胞毒性及其影响细胞增殖的因素。方法:采用浸提液法,体外培养鼠胚真皮层纤维细胞,用MTT法检测细胞增殖活力和计算相对增殖率。结果:WL组,SD组再生丝素膜细胞毒性小于1级,有较强的增殖活力;HY组再生丝素细胞毒性0～2级;而用高浓度环氧交联剂交联的再生丝素膜对细胞生长有一定抑制作用;且随着环氧交联剂浓度的增加,细胞毒性增大。结论:WL组和SD组再生丝素膜无细胞毒性,HY组再生丝素膜无明显的细胞毒性,高浓度环氧剂交联的再生丝素膜对细胞有一定的毒性,有待于进一步改性。 展开更多

关键词 再生丝素 丝素膜 鼠胚成纤维细胞 细胞毒性

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非离子型CT对比剂体外加温到37℃后使用对过敏反应发生率和外渗率的影响 被引量：13

2

作者 盛伟华 詹松华 +2 位作者 宋黎涛 黄松 蔡榆 《中国医学计算机成像杂志》 CSCD 北大核心 2014年第5期460-463,共4页

目的：探讨非离子型CT对比剂体外加温到37℃后使用对对比剂过敏反应发生率和外渗率的影响.方法：选取3442例接受CT增强检查的患者,随机分为加温组（n=1734）和对照组（n=1708）.加温组在CT增强检查前将非离子型CT对比剂加温到37℃再进... 目的：探讨非离子型CT对比剂体外加温到37℃后使用对对比剂过敏反应发生率和外渗率的影响.方法：选取3442例接受CT增强检查的患者,随机分为加温组（n=1734）和对照组（n=1708）.加温组在CT增强检查前将非离子型CT对比剂加温到37℃再进行静脉注射,对照组为常温状态（18～20℃）下直接进行静脉注射.结果：注射非离子型CT对比剂（碘比醇300）后,加温组过敏反应发生率（0.61％）和外渗率（0.57％）与对照组过敏反应发生率（0.44％）和外渗率（0.48％）比较,无显著性意义（P＞0.05）.注射非离子型CT对比剂（碘比醇350）后,加热组的过敏反应发生率（0.81％）和外渗率（0.32％）明显较对照组（2.46％和1.59％）低（P＜0.05）.结论：使用非离子型CT对比剂（碘比醇300）体外加温到37℃对过敏反应发生率和外渗率无影响,但用非离子型CT对比剂（碘比醇350）造影时体外加温到37℃能降低过敏反应和外渗的发生率. 展开更多

关键词 非离子型CT对比剂 加温 过敏反应 外渗

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基因工程人干扰素α2b和α2a亚型抗病毒效应的实验研究 被引量：10

3

作者 盛伟华 杨吉成 张云 《生物学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期19-21,共3页

本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗... 本文采用鸡胚接种法和微量细胞病变抑制法研究了不同亚型α干扰素（α２ａＩＦＮ和α２ｂＩＦＮ）抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒以及麻疹病毒的作用。结果表明：两种亚型α干扰素均显示明显的抗病毒效应，其中（１）α２ｂＩＦＮ抗流感病毒作用略强于α２ａＩＦＮ，（２）两亚型α干扰素抗脊髓灰质炎和麻疹病毒作用相似。 展开更多

关键词 Α2B α2a 抗病毒效应 干扰素

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骨髓基质细胞的体外培养和向成骨及软骨分化的实验研究 被引量：3

4

作者 盛伟华 杨吉成 +3 位作者 李丽娥 董宁征 王晓东 戴连生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期80-82,共3页

目的研究骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的ＢＭＳＣ，用传至２－３代兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损；采用成骨诱导培养法研究儿童ＢＭＳＣ的成骨效... 目的研究骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的ＢＭＳＣ，用传至２－３代兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损；采用成骨诱导培养法研究儿童ＢＭＳＣ的成骨效应。结果（１）Ⅱ型胶原和ｂＦＧＦ对兔ＢＭＳＣ的贴壁和生长是有效的。（２）用兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原治疗１２周后，能使兔膝关节软骨缺损获得恢复，其软骨细胞分化明显。（３）用成骨诱导培养法，可使儿童ＢＭＳＣ骨钙素分泌水平比常规对照组升高８～１０倍，并可见有典型的成骨化的黑色矿化细胞区。结论骨髓基质细胞具有成骨和软骨分化功能。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 成骨分化 软骨缺损治疗 软骨分化

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Ad-ING4-IRES-IL-24双基因共表达载体的构建及表达 被引量：1

5

作者 盛伟华 谢宇锋 +6 位作者 缪竞诚 顾范博 单云波 朱晔涵 陈华昕 杜贤荣 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期701-708,共8页

目的:构建IRES介导的携带人肿瘤生长抑制因子4(ING4)和人白介素24(IL-24)双基因的重组腺病毒共表达载体(简称为Ad-ING4-IRES-IL-24),研究其表达产物对A549肺癌细胞生长的影响。方法:将PCR扩增的IRES、ING4和IL-24基因片段分别插入pAdTra... 目的:构建IRES介导的携带人肿瘤生长抑制因子4(ING4)和人白介素24(IL-24)双基因的重组腺病毒共表达载体(简称为Ad-ING4-IRES-IL-24),研究其表达产物对A549肺癌细胞生长的影响。方法:将PCR扩增的IRES、ING4和IL-24基因片段分别插入pAdTrack-CMV载体中构建pAdTrack-CMV-ING4-IRES-IL-24双基因共表达重组转移载体。按腺病毒载体常规构建方法获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-ING4-IRES-IL-24,并在QBI-293A包装细胞中进行包装和病毒扩增。将扩增后的Ad-ING4-IRES-IL-24腺病毒感染A549肺癌细胞,并用RT-PCR和Western blot法鉴定ING4和IL-24基因在QBI-293A细胞或A549肺癌细胞中的表达,MTT法和流式细胞仪检测其对A549肺癌细胞生长抑制和诱导凋亡的功能和抑癌增效作用。结果:DNA测序结果显示pAdTrack-CMV转移载体中插入的ING4、IRES和IL-24片段的序列与GenBank报道的完全一致,Ad-ING4-IRES-IL-24能成功介导ING4和IL-24基因在QBI-293A和A549细胞中表达,不仅能明显抑制A549肺癌细胞生长和诱导其凋亡(72小时生长抑制率为62.82%±0.65%,凋亡率为19.40%±1.29%),而且与Ad-ING4-IRES(72小时生长抑制率为42.31%±0.43%,凋亡率为13.30%±1.85%)和Ad-IRES-IL-24单基因组(72小时生长抑制率为47.44%±0.39%,凋亡率为12.40%±1.05%)相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:成功构建了IRES介导的Ad-ING4-IL-24双基因共表达重组腺病毒载体,Ad-ING4-IL-24不仅能明显抑制A549肺癌细胞生长和诱导其凋亡,而且与Ad-ING4和AdIL-24单基因组相比具有抑癌增效作用。 展开更多

关键词 腺病毒 ING4 IL-24 肺癌 肿瘤基因治疗

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羧甲基茯苓多糖对IL-2促诱生效应的实验与临床研究 被引量：1

6

作者 盛伟华 杨吉成 +1 位作者 高跃明 金苏华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第1期51-54,共4页

用健康人外周血淋巴细胞,经羧甲基茯苓多糖促诱生剂制备而成的高效价临床级IL-2可用于肌注、静滴或动脉输注,IL-2与LAK细胞和化疗结合治疗晚期肿瘤44例,其中CR+PR13例(29.3％),CR+PR+MR 22例(50％),SR16例,无效死亡6例,总有效率(CR+PR+M... 用健康人外周血淋巴细胞,经羧甲基茯苓多糖促诱生剂制备而成的高效价临床级IL-2可用于肌注、静滴或动脉输注,IL-2与LAK细胞和化疗结合治疗晚期肿瘤44例,其中CR+PR13例(29.3％),CR+PR+MR 22例(50％),SR16例,无效死亡6例,总有效率(CR+PR+MR+SR)为86.4％。IL-2与^(60)Co放射综合治疗肿瘤37例,CR为51.4％,PR为46.8％,SR者例(2.7％),总有效率为97.3％,一年生存率为86.2％。应用CMP促诱生的低剂量IL-2和低剂量放/化综合治疗16例晚期癌症,CR占37.5％,总有效率(CR+PR)为93.8％,一年生存率为87.5％,结果表明:该低剂量IL-2/LAK继免疫化疗与放/化疗综合治疗晚期癌症是一种有效的治疗手段。 展开更多

关键词 羧甲基茯苓多糖 IL-2 促诱生效应 实验 临床研究 肿瘤

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基因工程干扰素(IFN—α2b)抗柯萨奇和单纯疱疹病毒效应 被引量：1

7

作者 盛伟华 杨吉成 +2 位作者 李丽娥 吕海涛 董宁征 《生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第5期15-16,共2页

本文采用微量细胞病变抑制法在Ｗｉｓｈ 及Ｖｅｒｏ 细胞上研究了ＩＦＮ—α２ｂ 抗ＣｏｘＢ３ 型及ＨＳＶ—１ 型和ＨＳＶ—Ⅱ型病毒的作用。结果表明，安达芬和干扰能ＩＨＮα２ｂ 在Ｗｉｓｈ 或Ｖｅｒｏ 细胞上５００ＩＵ／ｍｌ 分... 本文采用微量细胞病变抑制法在Ｗｉｓｈ 及Ｖｅｒｏ 细胞上研究了ＩＦＮ—α２ｂ 抗ＣｏｘＢ３ 型及ＨＳＶ—１ 型和ＨＳＶ—Ⅱ型病毒的作用。结果表明，安达芬和干扰能ＩＨＮα２ｂ 在Ｗｉｓｈ 或Ｖｅｒｏ 细胞上５００ＩＵ／ｍｌ 分别可以抗３ｌｏｇ４ 或１０００ＴＣＩＤ５０ ，５０ＩＵ／ｍｌ 可以抗２ｌｏｇ４ 或１００ ＴＣＩＤ５０ ，５ＩＵ／ｍｌ 可以抗１ｌｏｇ４ 或１０ ＴＣＩＤ５０ 的ＣｏｘＢ３ 型或ＨＳＶ—１ 型和ＨＳＶ—Ⅱ型病毒感染细胞。提示安达芬和干扰能均显示明显的抗病毒效应。 展开更多

关键词 基因工程 干扰素Α2B 单纯疱疹病毒 柯萨奇病毒

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基于长波经济周期的战略资产配置及实证分析 被引量：3

8

作者 盛伟华 《金融与经济》 北大核心 2010年第6期19-22,共4页

本文对现有资产配置理论框架进行了回顾与反思,指出了资产回报率的长周期性波动意味着战略资产配置虽然可以跨越短周期,但仍将受到长周期的影响,从而提出了基于长波经济周期的资产配置,并通过实证检验表明了其可以有效改善组合的回报率... 本文对现有资产配置理论框架进行了回顾与反思,指出了资产回报率的长周期性波动意味着战略资产配置虽然可以跨越短周期,但仍将受到长周期的影响,从而提出了基于长波经济周期的资产配置,并通过实证检验表明了其可以有效改善组合的回报率和夏普比率。 展开更多

关键词 长波经济周期 资产配置

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rhIL-6促进致死性辐射损伤小鼠凝血及早期造血功能的恢复

9

作者 盛伟华 杨吉成 张云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期32-36,共5页

目的：观察ｒｈＩＬ－６对小鼠造血功能的影响。方法：应用致死性６０Ｃｏ－γ射线辐射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，造成骨髓型辐射损伤模型。照射后用ｒｈＩＬ－６皮内注射给药６ｄ（２μｇ／只，２次／ｄ），通过检测出凝血时间（ＢＴ，ＣＴ）... 目的：观察ｒｈＩＬ－６对小鼠造血功能的影响。方法：应用致死性６０Ｃｏ－γ射线辐射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，造成骨髓型辐射损伤模型。照射后用ｒｈＩＬ－６皮内注射给药６ｄ（２μｇ／只，２次／ｄ），通过检测出凝血时间（ＢＴ，ＣＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）、外周血ＰＬＴ和ＷＢＣ，以及骨髓造血细胞体外培养ＣＦＵ－Ｍｉｘ和脾脏ＣＦＵ－Ｓ的数目，研究了ｒｈＩＬ－６对骨髓型辐射损伤小鼠早期造血功能恢复的效应，并进行了机理的探讨。结果：ｒｈＩＬ－６处理组小鼠的ＢＴ，ＣＴ和ＰＴ均较对照组显著缩短（Ｐ＜０．０１）；外周血ＰＬＴ和ＷＢＣ分别较对照组提高１３０％和１６５％。骨髓造血细胞体外培养ＣＦＵ－Ｍｉｘ和脾脏ＣＦＵ－Ｓ计数，均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＩＬ－６具有促进受辐射小鼠早期造血细胞恢复的生物学效应，可减轻辐射所致骨髓损伤和促进造血干／祖细胞（ＨＳＣ／ＨＰＣ）的增殖、分化，有利于骨髓造血功能的恢复。 展开更多

关键词 辐射损伤 造血干 祖细胞 体外培养 RHIL-6

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羧甲基茯苓多糖对HPBL分泌IL-2、TNF、IL-6、IFN-γ的调节作用 被引量：30

10

作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 张云 汤建平 李丽娥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期293-295,共3页

用ＣＭＰ培养外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）２４、３６、４８、７２ｈ采样检测的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别可达１３．６±４．３，４１．９±２．０，１８３７．４±４６４．３，１０３７．９±２... 用ＣＭＰ培养外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）２４、３６、４８、７２ｈ采样检测的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别可达１３．６±４．３，４１．９±２．０，１８３７．４±４６４．３，１０３７．９±２１１．０Ｕ／ｍｌ，分别比无ＣＭＰ的细胞培养对照组的效价高０．８，７．４，０．５，１０．９倍（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ的诱生剂功能。由ＣＭＰ预处理ＨＰＢＬ后经ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ促诱生组的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别比无ＣＭＰ的ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ刺激的相应常规诱生组高１．２～２．８，０．５～１．１、０．５～０．８、０．４～０．６倍（Ｐ＜０．０１），尤以ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋ＣｏｎＡ促诱生细胞因子效果最佳（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ又具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ促诱生效应。 展开更多

关键词 茯苓多糖 外周血 淋巴细胞 细胞因子

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人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达 被引量：12

11

作者 陈雄艳 盛伟华 +3 位作者 谢宇锋 缪竞诚 白艳艳 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期672-676,共5页

目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测... 目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列 ,构建真核重组表达载体pcDNA3 hIL 2 4 ,进行双酶切和PCR鉴定 ,以质粒pcDNA3 hIL 2 4转染COS 7细胞进行瞬时表达 ,用RT PCR检测mRNA表达 ,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性。结果 :成功获得 6 2 1bp的人IL 2 4基因 ,测序正确 ,经双酶切和PCR鉴定真核表达质粒构建正确 ,以脂质体转染COS 7细胞后 ,用RT PCR法、MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测表明COS 7细胞可表达hIL 2 4 ,且所表达的人IL 2 4具有较强的诱导A5 4 9肺腺癌细胞凋亡的作用。结论 :人IL 2 4基因的瞬时表达和凋亡效应的初步研究已获成功 ,为研究人IL 2 展开更多

关键词 人IL-24 克隆 表达 COS-7细胞 凋亡

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人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应 被引量：11

12

作者 缪竞诚 陈雄艳 +2 位作者 盛伟华 谢宇锋 杨吉成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期567-570,共4页

目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR... 目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR鉴定后用MTT法、Ho-echst染色和流式细胞术检测CHO细胞表达的rhIL-24诱导A549人肺腺癌细胞凋亡的抗肿瘤效应,用ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6和IFN-γ的功能。结果经双酶切和PCR鉴定,重组真核表达载体构建正确,人IL-24在CHO细胞中获得稳定表达,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及上调免疫细胞表达IL-6和IFN-γ的免疫刺激活性。结论人IL-24基因的稳定表达和抗肿瘤效应的实验研究,为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素-24 稳定转染 CHO细胞 凋亡

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灵芝水提取物对人免疫细胞及IL-6的调节作用 被引量：23

13

作者 梁中琴 盛伟华 +1 位作者 顾振纶 杨吉成 《中成药》 CAS CSCD 2000年第12期847-849,共3页

目的 :观察灵芝水提取物对人免疫细胞及细胞因子的调节作用。方法 :灵芝水提取物 (GL W )作用于人外周血淋巴细胞 (PBL) ,用MTT法及流式细胞仪技术检测。结果 :1.GL W对经植物凝集素 (PHA)活化的和未经PHA活化的人PBL均有促增殖效应 ,... 目的 :观察灵芝水提取物对人免疫细胞及细胞因子的调节作用。方法 :灵芝水提取物 (GL W )作用于人外周血淋巴细胞 (PBL) ,用MTT法及流式细胞仪技术检测。结果 :1.GL W对经植物凝集素 (PHA)活化的和未经PHA活化的人PBL均有促增殖效应 ,其中经PHA活化的增殖反应显著 (P <0 .0 5 ) ,细胞周期检测发现其主要促进细胞进入S期 ,表明GL W可促进人PBL的DNA合成。 2 .选择最大促进增殖效应浓度的GL W对经PHA活化的T细胞亚群进行双标记检测 ,结果发现 ,GL W可导致CD4+细胞比例增加 ,表现出免疫促进效应。 3 .GL W对活化的人PBL具有促诱生IL 6作用。结论 :GL W能增强正常机体的免疫功能。 展开更多

关键词 灵芝水提取物 T细胞亚群 IL-6 中药 体外试验

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人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响 被引量：10

14

作者 黄俊琼 孙万邦 +4 位作者 谢宇锋 盛伟华 缪竞诚 杜联峰 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期369-373,共5页

目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC... 目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。 展开更多

关键词 人IL-31 表皮角化细胞趋化因子 趋化作用 STAT3

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抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究 被引量：8

15

作者 杨吉成 盛伟华 +2 位作者 李丽娥 贡海蓉 徐仑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期77-79,共3页

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进... 目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。 展开更多

关键词 MXA 基因表达调控 INFα2b 腺病毒 微量细胞病变抑制试验

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人β-NGF基因在CHO细胞中表达的生物学活性及分离纯化 被引量：6

16

作者 白艳艳 杨吉成 +5 位作者 缪竞诚 盛伟华 韩晓枫 李丽娥 谢宇锋 周忆新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期343-346,共4页

目的 :检测人 β NGF基因转染CHO细胞后培养上清中所表达的 β NGF的生物学活性及分离纯化。 方法 :采用脂质体介导的真核细胞转染 ,运用形态学观察和MTT法进行检测做定性定量分析 ,蛋白观察用SDS PAGE电泳。结果 :转染 β NGF基因的CH... 目的 :检测人 β NGF基因转染CHO细胞后培养上清中所表达的 β NGF的生物学活性及分离纯化。 方法 :采用脂质体介导的真核细胞转染 ,运用形态学观察和MTT法进行检测做定性定量分析 ,蛋白观察用SDS PAGE电泳。结果 :转染 β NGF基因的CHO细胞可分泌能促进PC12细胞生长的活性 β NGF ,且可透过血脑屏障。 结论 :转染 β NGF基因的CHO细胞所分泌的 β NGF ,接近自然合成的蛋白 ,具有较高生物学活性 ,为NGF的生物制药奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人β-NGF基因 CHO细胞 表达 生物学活性 分离 纯化

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腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用 被引量：8

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作者 井莹莹 杨吉成 +6 位作者 缪竞诚 盛伟华 胡志清 单云波 刘铁连 韩亚丽 包婉蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期234-239,共6页

目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因... 目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用。方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的。 展开更多

关键词 ING4基因 腺病毒载体 MG-63人骨肉瘤细胞 凋亡

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再生丝素膜对鼠胚真皮层成纤维细胞遗传特性的影响 被引量：6

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作者 龚爱华 李明忠 +5 位作者 盛伟华 谢宇锋 缪竞成 姜海燕 吴徽宇 杨吉成 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-42,共5页

目的 :研究再生丝素膜 (WL组 ,HY组 ,SD组 )对大鼠鼠胚成纤维细胞的遗传物质的影响。方法 :采用浸提液法在体外培养鼠胚成纤维细胞 ,计算细胞的微核率 (MNF)和染色体畸变率 (CAF) ,用单细胞电泳法 (SCGEassay)检测基因组DNA的损伤程度... 目的 :研究再生丝素膜 (WL组 ,HY组 ,SD组 )对大鼠鼠胚成纤维细胞的遗传物质的影响。方法 :采用浸提液法在体外培养鼠胚成纤维细胞 ,计算细胞的微核率 (MNF)和染色体畸变率 (CAF) ,用单细胞电泳法 (SCGEassay)检测基因组DNA的损伤程度。结果 :WL组、SD组再生丝素膜和空白对照组的细胞微核率 (MNF)和染色体畸变率(CAF)无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,无明显彗星现象 ;而HY组再生丝素膜与阴性对照比较有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :WL组和SD组再生丝素膜对种子细胞的遗传学特性无明显影响 ,优于HY组。 展开更多

关键词 丝素蛋白膜 鼠胚成纤维细胞 微核 染色体畸变率 彗星试验

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骨髓基质细胞的造血支持作用等生物学特性的研究 被引量：6

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作者 杨吉成 盛伟华 +4 位作者 李丽娥 童宁征 王红卫 郭瑃 王晓东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期41-45,共5页

目的研究人骨髓基质细胞体外长期培养的生物学特性和造血支持功能。方法①采用静置贴壁细胞培养法，体外长期培养胎儿、儿童和成人的骨髓基质细胞。②采用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测法，分析细胞的表型。③将不同发育阶段的骨... 目的研究人骨髓基质细胞体外长期培养的生物学特性和造血支持功能。方法①采用静置贴壁细胞培养法，体外长期培养胎儿、儿童和成人的骨髓基质细胞。②采用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测法，分析细胞的表型。③将不同发育阶段的骨髓基质细胞体外培养，并扩增脐血造血干细胞。结果①建立了成纤维肌样细胞系，可传至１０代，维持６个月，同时还培养出内皮细胞和巨噬细胞。②儿童骨髓基质肌样细胞的染色特征为：波形纤维蛋白（ｖｉｅｍｅｎｔｉｎ）呈阳性，第Ⅷ因子呈阴性；儿童骨髓基质细胞的表型为：ＣＤ３３－、ＣＤ３４－、ＣＤ３８－和ＣＤＷ９０＋；成人为：ＣＤ３３－、ＣＤ３４－、ＣＤ３８＋和ＣＤＷ９０＋。③基质细胞能长期维持脐血中ＬＴＣ－ＩＣ的生存。若加入ＩＬ－６、ＩＬ－３和ＳＣＦ扩增体系，基质细胞对长期维持和扩增ＬＴＣ－ＩＣ的效果更为明显（Ｐ〈０．０１），较无基质细胞的对照组所形成的ＬＴＣ－ＩＣ产率高２－４倍。结论人骨髓基质细胞体外可长期培养，对脐血干细胞具有造血支持功能。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 造血支持功能 生物学特性 细胞培养

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重组人白细胞介素3和白细胞介素6对骨髓基质细胞生长的调节作用 被引量：4

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作者 郝思国 杨吉成 +2 位作者 邹正辉 盛伟华 张硕 《安徽医科大学学报》 CAS 1998年第6期425-427,共3页

目的了解重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）和重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对骨髓造血微环境的调节作用。方法应用成纤维细胞体外集落形成法，观察了ｒｈＩＬ－３和ｒｈＩＬ－６对成纤维细胞集落（ＣＦＵ－Ｆ）体外生长的影响... 目的了解重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）和重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对骨髓造血微环境的调节作用。方法应用成纤维细胞体外集落形成法，观察了ｒｈＩＬ－３和ｒｈＩＬ－６对成纤维细胞集落（ＣＦＵ－Ｆ）体外生长的影响。结果ｒｈＩＬ－３和ｒｈＩＬ－６能显著地刺激ＣＦＵ－Ｆ的生长，两者联合应用时对ＣＦＵ－Ｆ生长的刺激作用明显强于两者单用，表现出协同效应。结论ｒｈＩＬ－３和ｒｈＩＬ－６可促进基质细胞生长。 展开更多

关键词 白血病 成纤维细胞 骨髓移植 RHIL-3 RHIL-6

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