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基于杆状病毒-昆虫细胞表达系统的猪脑心肌炎病毒样颗粒的表达及鉴定
1
作者
王运航
景伟
+3 位作者
穆素雨
孙世琪
郭慧琛
白满元
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期4571-4578,共8页
脑心肌炎(encephalomyocarditis)是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)引起的以猪的脑炎、心肌炎为主要特征的病毒性人畜共患病,可感染多种哺乳动物,目前国内尚无有效疫苗。本研究旨在开发一款安全有效的疫苗以防控该病...
脑心肌炎(encephalomyocarditis)是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)引起的以猪的脑炎、心肌炎为主要特征的病毒性人畜共患病,可感染多种哺乳动物,目前国内尚无有效疫苗。本研究旨在开发一款安全有效的疫苗以防控该病。采用P1、3CD共表达的构建策略,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得EMCV病毒样颗粒(virus-like particals,VLPs)并将其免疫小鼠,初步评价其在小鼠体内的免疫应答效果。结果显示,免疫组小鼠特异性抗体滴度达到1∶192以上,中和抗体滴度达到1∶64以上,且与ISA206佐剂混合使用可诱导机体产生更高的抗体水平。IL-4、IFN-γ、IL-5、TNF-α细胞因子水平均可达到20 pg·mL^(-1),且明显高于PBS组。综上,本研究获得的EMCV病毒样颗粒疫苗可以诱导机体产生良好的细胞免疫和体液免疫应答,还能诱导炎症细胞因子的产生,有助于激发机体的免疫反应,增强疫苗的保护效果,为EMCV的防控提供了理论依据和技术储备。
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关键词
杆状病毒-昆虫细胞表达系统
脑心肌炎病毒
病毒样颗粒
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职称材料
生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价
被引量：
1
2
作者
李硕
张韵
+9 位作者
白满元
赵瑞翀
宋河涛
穆素雨
滕志东
董虎
马娥宁
孙世琪
郭慧琛
尹双辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期1598-1607,共10页
生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,...
生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,采用液相阻断ELISA(LPBE)检测猪血清中的特异性抗体滴度,并经酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测免疫猪外周血淋巴细胞(PBLs)经体外刺激后分泌的特异性IFN-γ。用矿化A型VLPs、矿化O型VLPs、矿化的A型和O型二价VLPs分别免疫牛,采用LPBE、中和试验、夹心ELISA检测血清中的特异性抗体、中和抗体以及IL-4和IFN-γ的含量。结果显示,VLPs与矿化VLPs免疫猪的血清抗体水平无显著差异,相对于VLPs,矿化VLPs免疫猪的PBLs分泌的IFN-γ水平高于VLPs免疫猪(P<0.05);3种疫苗免疫牛血清中IL-4和IFN-γ水平均高于PBS组,矿化二价疫苗与相应的矿化单价疫苗免疫牛的血清特异性抗体和中和抗体效价均无显著差异。综上所述,矿化VLPs对牛和猪均具有良好的免疫原性,不同血清型的矿化VLPs可以联合使用并且矿化壳层可增强VLPs诱导细胞免疫应答的能力。
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关键词
口蹄疫病毒
病毒样颗粒疫苗
生物矿化
动物免疫
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职称材料
兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用
被引量：
1
3
作者
贺佳慧
白满元
+3 位作者
郭慧琛
孙世琪
张小丽
马小军
《动物医学进展》
北大核心
2019年第1期20-24,共5页
为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口...
为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。
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关键词
口蹄疫病毒
病毒样颗粒
IgG纯化
酶标抗体
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职称材料
题名
基于杆状病毒-昆虫细胞表达系统的猪脑心肌炎病毒样颗粒的表达及鉴定
1
作者
王运航
景伟
穆素雨
孙世琪
郭慧琛
白满元
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室
榆林学院生命科学学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期4571-4578,共8页
基金
国家重点研发计划(2022YFD1800603,2021YFD1800300)
国家自然科学基金(32072859,32072847,32002272)
+1 种基金
科技人才与平台计划(202205AF150007)
所长基金:《口蹄疫病毒持续性感染牛咽上皮细胞遗传变异的机制研究》LVRI-SZJJ-202107。
文摘
脑心肌炎(encephalomyocarditis)是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)引起的以猪的脑炎、心肌炎为主要特征的病毒性人畜共患病,可感染多种哺乳动物,目前国内尚无有效疫苗。本研究旨在开发一款安全有效的疫苗以防控该病。采用P1、3CD共表达的构建策略,利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得EMCV病毒样颗粒(virus-like particals,VLPs)并将其免疫小鼠,初步评价其在小鼠体内的免疫应答效果。结果显示,免疫组小鼠特异性抗体滴度达到1∶192以上,中和抗体滴度达到1∶64以上,且与ISA206佐剂混合使用可诱导机体产生更高的抗体水平。IL-4、IFN-γ、IL-5、TNF-α细胞因子水平均可达到20 pg·mL^(-1),且明显高于PBS组。综上,本研究获得的EMCV病毒样颗粒疫苗可以诱导机体产生良好的细胞免疫和体液免疫应答,还能诱导炎症细胞因子的产生,有助于激发机体的免疫反应,增强疫苗的保护效果,为EMCV的防控提供了理论依据和技术储备。
关键词
杆状病毒-昆虫细胞表达系统
脑心肌炎病毒
病毒样颗粒
Keywords
baculovirus-insect cell expression system
encephalomyocarditis virus
virus-like particles
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价
被引量：
1
2
作者
李硕
张韵
白满元
赵瑞翀
宋河涛
穆素雨
滕志东
董虎
马娥宁
孙世琪
郭慧琛
尹双辉
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
甘肃农业大学动物医学院
云南省畜牧兽医科学院云南热带亚热带动物病毒病实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期1598-1607,共10页
基金
甘肃省科技重大专项(21ZD3NA001)
国家重点研发计划(2021YFD1800300)
+1 种基金
国家自然科学基金(32072847,31873023,32072859,32002272)
科技人才与平台计划(202205AF150007)。
文摘
生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,采用液相阻断ELISA(LPBE)检测猪血清中的特异性抗体滴度,并经酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测免疫猪外周血淋巴细胞(PBLs)经体外刺激后分泌的特异性IFN-γ。用矿化A型VLPs、矿化O型VLPs、矿化的A型和O型二价VLPs分别免疫牛,采用LPBE、中和试验、夹心ELISA检测血清中的特异性抗体、中和抗体以及IL-4和IFN-γ的含量。结果显示,VLPs与矿化VLPs免疫猪的血清抗体水平无显著差异,相对于VLPs,矿化VLPs免疫猪的PBLs分泌的IFN-γ水平高于VLPs免疫猪(P<0.05);3种疫苗免疫牛血清中IL-4和IFN-γ水平均高于PBS组,矿化二价疫苗与相应的矿化单价疫苗免疫牛的血清特异性抗体和中和抗体效价均无显著差异。综上所述,矿化VLPs对牛和猪均具有良好的免疫原性,不同血清型的矿化VLPs可以联合使用并且矿化壳层可增强VLPs诱导细胞免疫应答的能力。
关键词
口蹄疫病毒
病毒样颗粒疫苗
生物矿化
动物免疫
Keywords
foot-and-mouth disease virus
virus-like particles vaccine
biomineralization
animal immunization
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用
被引量：
1
3
作者
贺佳慧
白满元
郭慧琛
孙世琪
张小丽
马小军
机构
甘肃农业大学动物医学院
中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第1期20-24,共5页
基金
国家重点研发计划项目(2017YFD0500906
2016YFD0500700
+2 种基金
2017YFD0501100)
中央级科研院所基本科研业务费专项(1610312016002
1610312017010)
文摘
为制备兔抗O型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)的酶标抗体,进一步建立O型口蹄疫病毒的ELISA检测方法,通过原核表达、体外纯化和组装O型口蹄疫VLPs,免疫家兔制备兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清,并采用亲和层析法纯化IgG,改良过碘酸钠法制备兔抗O型口蹄疫VLPs的酶标抗体(rabbit anti-type O foot-and-mouth disease IgG-HRP)。结果显示,兔抗O型口蹄疫VLPs高免血清效价达1∶4 096,纯化后的IgG纯度达90%,效价达1∶512 000。表明获得了高纯度的兔抗O型口蹄疫VLP的酶标抗体,可用于O型口蹄疫的ELISA检测。
关键词
口蹄疫病毒
病毒样颗粒
IgG纯化
酶标抗体
Keywords
FMDV
VLPs
IgG purification
IgG-HRP
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
S854.43 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于杆状病毒-昆虫细胞表达系统的猪脑心肌炎病毒样颗粒的表达及鉴定
王运航
景伟
穆素雨
孙世琪
郭慧琛
白满元
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价
李硕
张韵
白满元
赵瑞翀
宋河涛
穆素雨
滕志东
董虎
马娥宁
孙世琪
郭慧琛
尹双辉
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
兔抗O型口蹄疫VLPs酶标抗体的制备及初步应用
贺佳慧
白满元
郭慧琛
孙世琪
张小丽
马小军
《动物医学进展》
北大核心
2019
1
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职称材料
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