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旱柳SmERF B3-45的克隆及耐盐功能研究
1
作者
华炫
田博雯
+5 位作者
周欣彤
江梓涵
王诗琦
黄倩慧
张健
陈艳红
《生物技术通报》
CSCD
北大核心
2024年第12期124-135,共12页
【目的】验证SmERF B3-45是否在植物响应盐胁迫中起着正向调控的作用,为揭示AP2/ERF转录因子在调控旱柳耐盐性中的作用奠定基础。【方法】分析旱柳AP2/ERF超家族中SmERF B3-45的启动子区顺式作用元件,利用特异性引物克隆得到SmERF B3-45...
【目的】验证SmERF B3-45是否在植物响应盐胁迫中起着正向调控的作用,为揭示AP2/ERF转录因子在调控旱柳耐盐性中的作用奠定基础。【方法】分析旱柳AP2/ERF超家族中SmERF B3-45的启动子区顺式作用元件,利用特异性引物克隆得到SmERF B3-45的CDS全长序列,对其进行生物信息学和亚细胞定位分析,并通过过表达载体的构建转化拟南芥突变体ERFOE1、ERF-OE2和进行病毒诱导的基因沉默(VIGS)阐明其功能。【结果】顺式作用元件分析表明,SmERF B3-45可能参与逆境胁迫响应表达调控途径。RT-qPCR结果显示,NaCl处理可诱导SmERF B3-45的表达,且该基因在旱柳的不同组织中广泛表达。亚细胞定位显示,SmERF B3-45蛋白定位于细胞核。转基因拟南芥中,SmERF B3-45的表达量大幅提高,在盐胁迫条件下,与野生型相比,过表达SmERF B3-45拟南芥的根长显著增加,总蛋白含量、Na+含量、MDA含量和Na+/K^(+)显著降低,CAT含量和K^(+)含量显著升高。基因沉默植株显著下调了SmERF B3-45的表达水平,与对照相比,基因沉默植株的总蛋白含量显著降低,而MDA和脯氨酸含量却显著高于阴性对照植株,并且沉默植株出现了叶片萎蔫,表明SmERF B3-45的沉默降低了旱柳的耐盐性。【结论】SmERF B3-45是植物响应盐胁迫的正向调控转录因子。
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关键词
旱柳
基因克隆
盐胁迫
ERF转录因子
转基因
病毒诱导的基因沉默(VIGS)
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题名
旱柳SmERF B3-45的克隆及耐盐功能研究
1
作者
华炫
田博雯
周欣彤
江梓涵
王诗琦
黄倩慧
张健
陈艳红
机构
南通大学生命科学学院南通市观赏植物遗传育种重点实验室
出处
《生物技术通报》
CSCD
北大核心
2024年第12期124-135,共12页
基金
江苏省重点研发项目(BE2022420)
南通市社会民生项目(MS12022028)
国家自然科学基金面上项目(31971681)。
文摘
【目的】验证SmERF B3-45是否在植物响应盐胁迫中起着正向调控的作用,为揭示AP2/ERF转录因子在调控旱柳耐盐性中的作用奠定基础。【方法】分析旱柳AP2/ERF超家族中SmERF B3-45的启动子区顺式作用元件,利用特异性引物克隆得到SmERF B3-45的CDS全长序列,对其进行生物信息学和亚细胞定位分析,并通过过表达载体的构建转化拟南芥突变体ERFOE1、ERF-OE2和进行病毒诱导的基因沉默(VIGS)阐明其功能。【结果】顺式作用元件分析表明,SmERF B3-45可能参与逆境胁迫响应表达调控途径。RT-qPCR结果显示,NaCl处理可诱导SmERF B3-45的表达,且该基因在旱柳的不同组织中广泛表达。亚细胞定位显示,SmERF B3-45蛋白定位于细胞核。转基因拟南芥中,SmERF B3-45的表达量大幅提高,在盐胁迫条件下,与野生型相比,过表达SmERF B3-45拟南芥的根长显著增加,总蛋白含量、Na+含量、MDA含量和Na+/K^(+)显著降低,CAT含量和K^(+)含量显著升高。基因沉默植株显著下调了SmERF B3-45的表达水平,与对照相比,基因沉默植株的总蛋白含量显著降低,而MDA和脯氨酸含量却显著高于阴性对照植株,并且沉默植株出现了叶片萎蔫,表明SmERF B3-45的沉默降低了旱柳的耐盐性。【结论】SmERF B3-45是植物响应盐胁迫的正向调控转录因子。
关键词
旱柳
基因克隆
盐胁迫
ERF转录因子
转基因
病毒诱导的基因沉默(VIGS)
Keywords
Salix matsudana
gene cloning
salt stress
ERF transformation factor
genetic transformation
virus-induced gene silencing(VIGS)
分类号
S792.12 [农业科学—林木遗传育种]
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出处
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1
旱柳SmERF B3-45的克隆及耐盐功能研究
华炫
田博雯
周欣彤
江梓涵
王诗琦
黄倩慧
张健
陈艳红
《生物技术通报》
CSCD
北大核心
2024
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