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高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究
1
作者
邵珺
胡迪
田一焜
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022年第3期184-188,共5页
目的探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制。方法取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、...
目的探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制。方法取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、miR-615-5p抑制剂(inhibitor)组、miR-615-5p抑制剂阴性对照(in-nc)组。LG组hRECs用含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,其余各组hRECs均用含25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养。qRT-PCR分析LG组与HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达情况;Transwell实验、成管实验、划痕愈合实验分析各组hRECs的细胞迁移能力、成管能力和愈合能力;免疫荧光实验分析miR-615-5p对hRECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达量的影响。结果与LG组(1.00±0.28)相比,HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达水平(6.36±1.31)上升(t=12.69,P<0.01)。Transwell实验中,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的hRECs相对细胞迁移数分别为0.99±0.12、0.96±0.08、0.50±0.07、0.72±0.13和0.96±0.10,与mi-nc组相比,mimic组中hRECs的迁移能力显著增强(t=6.10,P<0.05);与in-nc组相比,inhibitor组中hRECs的迁移能力显著降低(t=7.21,P<0.05)。成管实验结果显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的相对成管管长分别为1.00±0.15、1.24±0.13、0.81±0.13、0.40±0.05和0.86±0.04;与mi-nc组相比,mimic组hRECs的成管能力显著增强(t=5.52,P<0.01);相较于in-nc组,inhibitor组hRECs的成管能力显著降低(t=17.80,P<0.01)。划痕愈合实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的创面愈合率分别为0.71±0.01、1.00±0.01、0.64±0.02、0.56±0.05和0.54±0.04,相较于mi-nc组,mimic组中hRECs的愈合能力显著增强(t=25.30,P<0.01)。免疫荧光实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的VEGFA相对荧光强度分别为1.00±0.09、1.35±0.10、1.02±0.04、0.77±0.06和0.84±0.06,相较于mi-nc组,mimic组hRECs中VEGFA的表达水平增加(t=3.78,P<0.05)。结论高糖环境促进了hRECs中miR-615-5p的表达,进而促进了hRECs的成管能力、迁移能力和愈合能力,同时miR-615-5p的下游靶点可能是VEGFA。
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关键词
人视网膜内皮细胞
miR-615-5p
血管内皮生长因子A
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职称材料
题名
高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究
1
作者
邵珺
胡迪
田一焜
机构
南京医科大学附属无锡人民医院眼科
江南大学生物工程学院
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022年第3期184-188,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(编号:81970819)
无锡市双百拔尖人才(编号:2020012)
中国博士后67批面上项目(编号:2020M671541)。
文摘
目的探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制。方法取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、miR-615-5p抑制剂(inhibitor)组、miR-615-5p抑制剂阴性对照(in-nc)组。LG组hRECs用含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,其余各组hRECs均用含25.0 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养。qRT-PCR分析LG组与HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达情况;Transwell实验、成管实验、划痕愈合实验分析各组hRECs的细胞迁移能力、成管能力和愈合能力;免疫荧光实验分析miR-615-5p对hRECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达量的影响。结果与LG组(1.00±0.28)相比,HG组hRECs中miR-615-5p的相对表达水平(6.36±1.31)上升(t=12.69,P<0.01)。Transwell实验中,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的hRECs相对细胞迁移数分别为0.99±0.12、0.96±0.08、0.50±0.07、0.72±0.13和0.96±0.10,与mi-nc组相比,mimic组中hRECs的迁移能力显著增强(t=6.10,P<0.05);与in-nc组相比,inhibitor组中hRECs的迁移能力显著降低(t=7.21,P<0.05)。成管实验结果显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的相对成管管长分别为1.00±0.15、1.24±0.13、0.81±0.13、0.40±0.05和0.86±0.04;与mi-nc组相比,mimic组hRECs的成管能力显著增强(t=5.52,P<0.01);相较于in-nc组,inhibitor组hRECs的成管能力显著降低(t=17.80,P<0.01)。划痕愈合实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组hRECs的创面愈合率分别为0.71±0.01、1.00±0.01、0.64±0.02、0.56±0.05和0.54±0.04,相较于mi-nc组,mimic组中hRECs的愈合能力显著增强(t=25.30,P<0.01)。免疫荧光实验显示,HG组、mimic组、mi-nc组、inhibitor组和in-nc组的VEGFA相对荧光强度分别为1.00±0.09、1.35±0.10、1.02±0.04、0.77±0.06和0.84±0.06,相较于mi-nc组,mimic组hRECs中VEGFA的表达水平增加(t=3.78,P<0.05)。结论高糖环境促进了hRECs中miR-615-5p的表达,进而促进了hRECs的成管能力、迁移能力和愈合能力,同时miR-615-5p的下游靶点可能是VEGFA。
关键词
人视网膜内皮细胞
miR-615-5p
血管内皮生长因子A
Keywords
human retinal endothelial cells
miR-615-5p
vascular endothelial growth factor A
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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作者
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1
高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究
邵珺
胡迪
田一焜
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2022
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