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食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变 被引量:5
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作者 甄盼盼 汤电 +4 位作者 任艳娜 郭玉芳 王丽华 裘宗平 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期195-202,共8页
从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细... 从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株blaCTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细菌的亲缘关系;通过接合转移试验、复制子分型和blaCTX-M-14上下游插入元件的检测,分析产CTX-M-14大肠杆菌的传播分子机制。PCR检测结果表明,16株食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌大多属于系统发育组A组,其次为B1和D组,没有B2组;PFGE分型结果表明,同一时间内不同动物间存在产CTX-M-14共生型大肠杆菌克隆的扩散传播,但养殖场内CTX-M-14主要是随质粒或其他元件进行水平传播;质粒复制子分型结果表明,携带blaCTX-M-14的质粒属于IncK(3/14)、IncF(5/14)、IncHI2(1/14)、IncFIB和IncF(1/14)、IncHI1和IncN(2/14)、IncI1(2/14)等,且随着时间推移,复制子的种类呈增多趋势。2002-2007年的菌株blaCTX-M基因的上下游均检测到ISEcp1和IS903;但2009年菌株除了部分在上下游都可以检测到ISEcp1和IS903外,还有的只检测到上游的ISEcp1或下游的IS903;2002-2009年的菌均未检测到ISCR1。16株产CTX-M-14大肠杆菌除了携带其他ESBLs编码基因,如blaCTX-M79和blaTEM-135外,还携带其他重要抗生素耐药基因,如oqxA、floR、aac(6′)-1b-cr及rmtB,而且2002-2009年大肠杆菌携带耐药基因的种类和数量逐年增多;接合转移试验发现,2002-2005年的菌株,blaCTX-M-14往往发生单独转移,而2009年分离菌blaCTX-M-14往往和floR或rmtB位于同一质粒上发生共同转移。这说明养殖场使用氨基糖苷类或氟苯尼考等任何一种抗生素,都可以筛选出产CTX-M-14大肠杆菌并促进其扩散,所以动物养殖过程中要慎用这些抗生素。 展开更多
关键词 CTX-M-14 传播分子机制 复制子分型 水平传播
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喹诺酮类耐药决定区、外排泵负调控基因对大肠杆菌氟喹诺酮高水平耐药分子机制的影响 被引量:6
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作者 任艳娜 甄盼盼 +5 位作者 李健 郭玉芳 王丽华 任君玉 张文慧 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期11-16,共6页
为了探讨耐喹诺酮类决定区(QRDR)、外排泵负调控基因(acrR、marR和soxR)突变对临床分离株氟喹诺酮(FQs)高水平耐药的影响,本研究对临床分离的18株FQs耐药大肠杆菌(E.coli),采用PCR方法检测QRDR、acrR、marR和soxR的突变情况;通过RT-PCR... 为了探讨耐喹诺酮类决定区(QRDR)、外排泵负调控基因(acrR、marR和soxR)突变对临床分离株氟喹诺酮(FQs)高水平耐药的影响,本研究对临床分离的18株FQs耐药大肠杆菌(E.coli),采用PCR方法检测QRDR、acrR、marR和soxR的突变情况;通过RT-PCR的方法检测外排泵及膜孔蛋白相关基因的表达水平。结果显示,QRDR的突变主要集中在常规突变GyrA(Ser83Leu和Asp87Asn)和ParC(Ser80Ile),同时也检测出稀有突变ParC Glu84Gly、Glu84Lys、Glu84Val和Glu84Ala,ParE Ser458Ala等。ED28在acrR基因存在777bp插入序列;12株菌(包括ATCC25922)在MarR存在Gly103Ser和Tyr137His双突变,其中EP26和EG42存在插入片段;ED40在SoxR存在Thr38Ser、Gly74Arg氨基酸替换。在多突变药菌株中,AcrAB的表达水平明显升高,OmpC和OmpF表达量降低、甚至缺失。 展开更多
关键词 QRDR acrR MARR soxR 耐药 氟喹诺酮
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动物源产CMY-2大肠杆菌分子流行病学研究 被引量:1
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作者 郭玉芳 赵秋云 +5 位作者 姜芮 任金程 杨玲 甄盼盼 汤电 蒋红霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期47-51,共5页
为调查产CMY-2大肠杆菌在广东各养殖场的流行情况,对2010—2011年间分离自猪、鸡、鸭、鹅等动物的1293株大肠杆菌,采用PCR方法筛选出blaCMY-2阳性菌株,琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗微生物药物的敏感性;接合转移试验和XbaⅠ酶切PFGE... 为调查产CMY-2大肠杆菌在广东各养殖场的流行情况,对2010—2011年间分离自猪、鸡、鸭、鹅等动物的1293株大肠杆菌,采用PCR方法筛选出blaCMY-2阳性菌株,琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗微生物药物的敏感性;接合转移试验和XbaⅠ酶切PFGE图谱分析blaCMY-2基因转移扩散的方式。结果显示,1293株大肠杆菌中27株含有blaCMY-2基因,检出率为2.09%,均为多重耐药菌株,主要耐药谱型为AMP/CHL/TET/FLF/CTF/CTX/CAZ/CTR/GEN/CIP/ENR/NAL/OQX;27株携带blaCMY-2基因菌株中有14株的blaCMY-2基因可随质粒转移到受体菌E.coli C600中,且往往与blaTEM-1和(或)qnrS1共同转移;PFGE分析结果显示,27株携带blaCMY-2基因菌株共产生17条谱带,其中有4株菌株,两两分别来自同一地区,存在克隆传播关系。提示,在广东地区食品动物养殖场内存在产CMY-2大肠杆菌的克隆传播,且blaCMY-2基因伴随可转移质粒或其他可转移移动元件可能是造成产CMY-2大肠杆菌流行分布的主要原因。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耐药性 动物源 CMY-2
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加米霉素的合成及其晶体结构测定 被引量:2
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作者 崔志刚 王建 +6 位作者 甄盼盼 余贵菊 杨雪 王猛 姜淋洁 娄艳华 程雪娇 《中国兽药杂志》 2020年第9期49-54,共6页
通过更换反应试剂和改变中间体的纯化方法,对加米霉素的合成进行了工艺优化,使整个反应过程更适合放大生产,且安全环保、成本更低廉。以9-脱氧-9-同型红霉素A(E)肟为原料,在碱性催化剂作用下生成9-脱氧-9-同型红霉素A(Z)肟,再经过贝克... 通过更换反应试剂和改变中间体的纯化方法,对加米霉素的合成进行了工艺优化,使整个反应过程更适合放大生产,且安全环保、成本更低廉。以9-脱氧-9-同型红霉素A(E)肟为原料,在碱性催化剂作用下生成9-脱氧-9-同型红霉素A(Z)肟,再经过贝克曼重排反应生成红霉素亚胺醚,然后硼氢化钠还原生成9-脱氧-8a-氮杂-8a-同型红霉素A,最后还原胺化反应得到加米霉素;并首次获得加米霉素单晶,X-射线衍射单晶结构测定表明,其结构为单斜晶系,C2空间群,具有手性,晶胞参数:a[A]=27.536(6),b[A]=9.6582(19),c[A]=18.529(4),α[°]=90,β[°]°=114.00(3),γ[°]=90,V[A3]=4501.6(15),Z=4,Dc[mg/m^3]=1.177,m[mm^–1]=0.086,F(000)=1750,GOF=1.043,Rint=0.0417,R1a,wR2b[I>2σ(I)]=0.0492,0.1291,Residuals[eA-3]=0.0564,0.1354。加米霉素晶型的确定为后续研究加米霉素制剂新剂型等方面提供了新选择。 展开更多
关键词 加米霉素 合成 晶体结构
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高效液相色谱法测定烯丙孕素口服液中烯丙孕素的含量 被引量:2
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作者 姜淋洁 崔志刚 +3 位作者 杨雪 娄艳华 甄盼盼 程雪娇 《中国兽药杂志》 2020年第3期21-25,共5页
建立了烯丙孕素口服液中烯丙孕素含量测定的高效液相色谱分析方法及样品前处理方法。采用正相高效液相色谱法,前处理溶剂为异丙醇-正己烷(5:20),色谱柱为ZORBAX CN C18柱(250×4.0 mm,5μm),流动相正己烷-异丙醇(98:2),流速1.0 mL/m... 建立了烯丙孕素口服液中烯丙孕素含量测定的高效液相色谱分析方法及样品前处理方法。采用正相高效液相色谱法,前处理溶剂为异丙醇-正己烷(5:20),色谱柱为ZORBAX CN C18柱(250×4.0 mm,5μm),流动相正己烷-异丙醇(98:2),流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长235 nm。该方法中烯丙孕素的定量限浓度为804.9 ng/mL,线性范围为0.401~0.601 mg/mL,平均回收率为100.3%,该方法前处理简单、准确度高,可适用于该制剂中烯丙孕素的定性定量测定。 展开更多
关键词 烯丙孕素口服液 含量测定 高效液相色谱法
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烯丙孕素对照品的研制及标定 被引量:1
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作者 姜淋洁 甄盼盼 +3 位作者 崔志刚 杨雪 于小婷 程雪娇 《中国兽药杂志》 2020年第9期55-60,共6页
研制了烯丙孕素对照品并对其进行标定。采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱和X射线单晶衍射进行结构确认,高效液相色谱法进行纯度检查,质量平衡法进行定量分析,并用核磁共振波谱法对赋值结果进行验证。结果显示,烯丙孕素对照... 研制了烯丙孕素对照品并对其进行标定。采用紫外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱和X射线单晶衍射进行结构确认,高效液相色谱法进行纯度检查,质量平衡法进行定量分析,并用核磁共振波谱法对赋值结果进行验证。结果显示,烯丙孕素对照品原料纯度为99.96%;质量平衡法赋值结果为99.92%,定量核磁共振法验证结果为99.60%。烯丙孕素工作对照品定量赋值结果准确、可靠,能够用于烯丙孕素原料及制剂的鉴别和含量测定。 展开更多
关键词 烯丙孕素对照品 标定 结构确证 质量平衡法 定量核磁共振
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烯丙孕素的合成及其晶体结构 被引量:1
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作者 崔志刚 甄盼盼 +5 位作者 杨雪 于小婷 张永赞 张磊 姜淋洁 赵健 《中国动物保健》 2022年第1期115-117,共3页
通过更换反应试剂对烯丙孕素的合成进行了工艺优化,使整个反应过程更适合放大生产,且安全环保、成本更低廉。该合成方法以3-缩酮为原料,经过格氏化反应,水解反应,氧化反应得到烯丙孕素;并首次获得烯丙孕素单晶,X-射线衍射单晶结构测定表... 通过更换反应试剂对烯丙孕素的合成进行了工艺优化,使整个反应过程更适合放大生产,且安全环保、成本更低廉。该合成方法以3-缩酮为原料,经过格氏化反应,水解反应,氧化反应得到烯丙孕素;并首次获得烯丙孕素单晶,X-射线衍射单晶结构测定表明,其结构为斜方晶系,P212121空间群,具有手性,晶胞参数:a=7.2501(15)A,b=10.452(2)A,c=22.252(5)A,α=90°,β=90°,γ=90°,V=1686.2(6)A3,Z=4,Dc=1.223mg/m^(3),m=0.077mm-1,F(000)=672.0,GOF=1.034,Rint=0.0455,R1a,wR2b[I>2σ(I)]=0.0456(0.1017),Residuals=0.0520(0.1063eA-3)。该晶体被剑桥晶体数据中心收录(申请人:崔志刚;晶体号:CCDC1914181)。烯丙孕素晶型的确定为后续研究烯丙孕素制剂新剂型等方面提供选择。 展开更多
关键词 烯丙孕素 合成 晶体结构
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恩诺沙星注射液细菌内毒素检查(凝胶法)方法学研究
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作者 康福忠 于小婷 +3 位作者 王猛 杨雪 甄盼盼 程雪娇 《中国动物保健》 2021年第12期123-124,共2页
参照《中华人民共和国兽药典》2015版一部附录1143细菌内毒素检查法的有关规定,对恩诺沙星注射液内毒素限度及检查方法进行了研究。结果显示,恩诺沙星注射液稀释到800倍及以上时,对细菌内毒素检查无干扰,内毒素限值确定为400EU/m L。对... 参照《中华人民共和国兽药典》2015版一部附录1143细菌内毒素检查法的有关规定,对恩诺沙星注射液内毒素限度及检查方法进行了研究。结果显示,恩诺沙星注射液稀释到800倍及以上时,对细菌内毒素检查无干扰,内毒素限值确定为400EU/m L。对3批样品进行检查,结果均符合规定。本研究建立的细菌内毒素检查方法(凝胶法)可用于恩诺沙星注射液的细菌内毒素检查。 展开更多
关键词 恩诺沙星注射液 内毒素检查 凝胶法
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