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马泰勒虫新疆株EMA-1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
被引量：
6
1
作者
宋瑞其
王盼举
+4 位作者
王振宝
瓦热斯.吐尔松
闻秀秀
张杨
巴音查汗
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1737-1743,共7页
马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T...
马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T-1/EMA1重组质粒,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到EMA-1融合蛋白,切胶纯化后作为包被抗原建立检测马泰勒虫抗体的rELISA方法。结果显示:(1)GST-EMA1蛋白相对分子质量56ku,与其理论值基本一致;(2)通过Western blot分析证明其具有很好的特异性和反应原性;(3)以GST-EMA1蛋白作为包被抗原建立的rELISA可明显区分马泰勒虫、驽巴贝斯虫阳性血清和健康马血清;批内和批间重复试验的最大变异系数分别为14.79%和11.06%;(4)使用建立的间接ELISA与cELISA商品试剂盒分别对新疆伊犁马场收集的96份马血清样品进行检测,检出阳性率分别为27.1%(26/96)和25.0%(24/96),两者总符合率为95.8%。结果表明,基于原核表达的GST-EMA1蛋白所建立的rELISA特异性、重复性好,检出率与马泰勒虫临床分离率接近,可为新疆马泰勒虫病(特别是隐性带虫马)的检测、监控提供有效手段。
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关键词
马泰勒虫
新疆株EMA-1
间接ELISA
抗体
诊断
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职称材料
实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性研究
被引量：
4
2
作者
闻秀秀
谢小婉
+3 位作者
呼尔查
朱玉涛
瓦热斯.吐尔松
巴音查汗
《草食家畜》
2016年第6期53-57,共5页
为了探究实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性,以便能更好地为二、三宿主的变更、环境变化等因素对小亚璃眼蜱繁殖影响提供实验依据。试验于2015年3-6月在吐鲁番地区某疫区采集家畜体表(牛)蜱虫约1 000只,采用了蜱种鉴定以及饲蜱试验,对...
为了探究实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性,以便能更好地为二、三宿主的变更、环境变化等因素对小亚璃眼蜱繁殖影响提供实验依据。试验于2015年3-6月在吐鲁番地区某疫区采集家畜体表(牛)蜱虫约1 000只,采用了蜱种鉴定以及饲蜱试验,对小亚璃眼蜱饲养观察、掌握其生活史与滞育现象。结果表明:小亚璃眼蜱在兔体上可表现为二宿主型与三宿主型生活史周期,需要115±14.832 d完成一个生活史,并具有生殖滞育现象。说明此次试验对小亚璃眼蜱的传代培养具有指导意义。
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关键词
小亚璃眼蜱
生物学特性
人工饲养
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职称材料
题名
马泰勒虫新疆株EMA-1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
被引量：
6
1
作者
宋瑞其
王盼举
王振宝
瓦热斯.吐尔松
闻秀秀
张杨
巴音查汗
机构
新疆农业大学动物医学学院
伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1737-1743,共7页
基金
国家自然科学基金-新疆联合基金重点项目(U1403283)
文摘
马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T-1/EMA1重组质粒,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到EMA-1融合蛋白,切胶纯化后作为包被抗原建立检测马泰勒虫抗体的rELISA方法。结果显示:(1)GST-EMA1蛋白相对分子质量56ku,与其理论值基本一致;(2)通过Western blot分析证明其具有很好的特异性和反应原性;(3)以GST-EMA1蛋白作为包被抗原建立的rELISA可明显区分马泰勒虫、驽巴贝斯虫阳性血清和健康马血清;批内和批间重复试验的最大变异系数分别为14.79%和11.06%;(4)使用建立的间接ELISA与cELISA商品试剂盒分别对新疆伊犁马场收集的96份马血清样品进行检测,检出阳性率分别为27.1%(26/96)和25.0%(24/96),两者总符合率为95.8%。结果表明,基于原核表达的GST-EMA1蛋白所建立的rELISA特异性、重复性好,检出率与马泰勒虫临床分离率接近,可为新疆马泰勒虫病(特别是隐性带虫马)的检测、监控提供有效手段。
关键词
马泰勒虫
新疆株EMA-1
间接ELISA
抗体
诊断
Keywords
Theileria equi
EMA-1 gene of Xinjiang strain
indirect ELISA
antibody
diagnosis
分类号
S852.72 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性研究
被引量：
4
2
作者
闻秀秀
谢小婉
呼尔查
朱玉涛
瓦热斯.吐尔松
巴音查汗
机构
新疆农业大学动物医学学院
巴音郭楞蒙古自治州动物疾病控制与诊断中心
出处
《草食家畜》
2016年第6期53-57,共5页
基金
自治区成果转化项目(201454129)资助
文摘
为了探究实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性,以便能更好地为二、三宿主的变更、环境变化等因素对小亚璃眼蜱繁殖影响提供实验依据。试验于2015年3-6月在吐鲁番地区某疫区采集家畜体表(牛)蜱虫约1 000只,采用了蜱种鉴定以及饲蜱试验,对小亚璃眼蜱饲养观察、掌握其生活史与滞育现象。结果表明:小亚璃眼蜱在兔体上可表现为二宿主型与三宿主型生活史周期,需要115±14.832 d完成一个生活史,并具有生殖滞育现象。说明此次试验对小亚璃眼蜱的传代培养具有指导意义。
关键词
小亚璃眼蜱
生物学特性
人工饲养
Keywords
Hyalomma anatolicum anatolicum
biological characteristics
artificial feeding
分类号
S855.99 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马泰勒虫新疆株EMA-1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
宋瑞其
王盼举
王振宝
瓦热斯.吐尔松
闻秀秀
张杨
巴音查汗
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
6
在线阅读
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职称材料
2
实验条件下小亚璃眼蜱的生物学特性研究
闻秀秀
谢小婉
呼尔查
朱玉涛
瓦热斯.吐尔松
巴音查汗
《草食家畜》
2016
4
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