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2020-2022年河南省猪伪狂犬病监测评估
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作者 王华俊 刘光辉 +4 位作者 赵雪丽 马震原 柴茂 班付国 闫若潜 《中国畜禽种业》 2024年第8期105-110,共6页
为了解河南省猪伪狂犬病野毒感染情况,持续推进猪伪狂犬病净化工作,河南省动物疫病预防控制中心按照监测方案开展检测,并对2020-2022年数据对比分析,共采集猪血清样品34506份,采集病原学样品10589份,采用ELISA方法检测猪伪狂犬gpI(gE)... 为了解河南省猪伪狂犬病野毒感染情况,持续推进猪伪狂犬病净化工作,河南省动物疫病预防控制中心按照监测方案开展检测,并对2020-2022年数据对比分析,共采集猪血清样品34506份,采集病原学样品10589份,采用ELISA方法检测猪伪狂犬gpI(gE)血清感染抗体,采用荧光PCR方法检测病原学样品,并对检测结果进行统计分析。结果显示:2020-2022年,河南省猪PRV gE抗体的平均个体阳性率分别为20.30%、15.76%、11.01%,平均场群阳性率分别为52.77%、35.35%、27.80%。2020-2022年,种猪场、商品代场、屠宰场平均个体阳性率分别为10.62%、20.10%、16.79%,平均场群阳性率分别为31.72%、45.27%、33.19%。2020-2022年平均个体阳性率和平均场群阳性率由高到低依次为豫中、豫东、豫西、豫南和豫北,平均个体阳性率最高的为22.56%,最低为13.12%,平均场群阳性最高的52.4%,最低为31.4%。2020-2022年平均个体阳性率和场群阳性率均依次降低。可见,河南省猪伪狂犬病野毒感染抗体和病源学阳性率均逐年降低,净化效果明显。 展开更多
关键词 伪狂犬 血清学调查 病原学调查
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凝胶色谱/超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中16种脂溶性染料的研究 被引量:7
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作者 班付国 孟蕾 +4 位作者 吴宁鹏 董颖超 张发旺 杜红鸽 张崇威 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1262-1267,共6页
应用凝胶色谱/超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱建立了饲料中16种脂溶性染料测定的新方法。样品经20 m L乙酸乙酯-环己烷(1∶1)提取,凝胶色谱系统净化后,以0.1%甲酸溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,各脂溶性染料经C18柱得到良好分离... 应用凝胶色谱/超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱建立了饲料中16种脂溶性染料测定的新方法。样品经20 m L乙酸乙酯-环己烷(1∶1)提取,凝胶色谱系统净化后,以0.1%甲酸溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,各脂溶性染料经C18柱得到良好分离。16种染料在2-100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)不小于0.99。其检出限为25μg/kg,定量下限为50μg/kg。饲料样品在低、中、高3个加标浓度下,16种脂溶性染料的回收率为66.4%-108.5%,结果表明方法适用于饲料中16种脂溶性染料的检测。该方法操作简单、准确、杂质干扰少。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱 脂溶性染料 饲料 凝胶色谱
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超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中66种兽药残留的研究 被引量:25
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作者 班付国 胡兴娟 +4 位作者 吴宁鹏 彭丽 孟蕾 周红霞 毛建辉 《中国兽药杂志》 2014年第6期40-51,共12页
建立了猪肉中磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、硝基咪唑类、氯霉素类、解热镇痛类、抗病毒类、镇定剂类和头孢类等11类66种药物液相色谱-串联质谱(UPLC—MS/MS)检测方法。样品经乙腈-甲醇(V/V,95:5)和乙腈... 建立了猪肉中磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、硝基咪唑类、氯霉素类、解热镇痛类、抗病毒类、镇定剂类和头孢类等11类66种药物液相色谱-串联质谱(UPLC—MS/MS)检测方法。样品经乙腈-甲醇(V/V,95:5)和乙腈-水(V/V,15:2)溶液分别提取后,Agela Cleanert@PEP-2固相萃取柱净化后采用UPLC—MS/MS测定,外标法定量。结果表明,猪肉中66药物检测限为O.2~5μg/kg,定量限为0.5-20μg/kg。在2~100μg/kg添加浓度范围内药物回收率在35%~140%之间,批内相对标准偏差均小于20%。本方法可实现对多种兽药的同时检测,为动物源性食品中药物残留监控提供快速、灵敏的分析手段,具有很重要的现实意义。 展开更多
关键词 猪肉 残留 测定 超高效液相色谱-串联质谱
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超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法对饲料中匹莫林的测定 被引量:2
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作者 班付国 方忠意 +3 位作者 刘素梅 宋志超 贾振民 吴宁鹏 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期705-708,共4页
建立了超高效液相色谱-串联质谱测定饲料中匹莫林的方法。饲料样品经甲醇-乙腈溶液提取,取部分上清液氮气吹干,用甲醇和水分步溶解后用正己烷除脂,Waters Oasis HLB固相萃取小柱净化,然后用Waters Acquity UPLC BEH C18色潜柱(2.1... 建立了超高效液相色谱-串联质谱测定饲料中匹莫林的方法。饲料样品经甲醇-乙腈溶液提取,取部分上清液氮气吹干,用甲醇和水分步溶解后用正己烷除脂,Waters Oasis HLB固相萃取小柱净化,然后用Waters Acquity UPLC BEH C18色潜柱(2.1mm×50mm.i.d.,1.7μm)分离,以甲醇和0.1%甲酸-水溶液为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。对前处理及液相色谱和质谱条件进行优化。结果表明,匹莫林质量浓度在1~500μg/L范围内线性良好,相关系数大于0.999;在5.0~200μg/kg的添加水平下,匹莫林的平均加标回收率为77%~86%;相对标准偏差为4.4%~7.9%;方法的检出限低至2.0μg/kg,定量下限低至50μg/kg。该方法灵敏度高、稳定性好,可满足饲料中匹莫林残留的检测与确证的要求。 展开更多
关键词 匹莫林 超高效液相色谱-串联质谱 饲料
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氯苯胍在鸡组织中的残留消除规律研究 被引量:7
5
作者 班付国 吴宁鹏 +2 位作者 李慧素 彭丽 周红霞 《中国兽药杂志》 2012年第11期24-26,共3页
采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)研究了氯苯胍在鸡组织中的残留消除规律。白来杭鸡以含氯苯胍500 mg/kg饲料饲喂7 d,停药后的第0、1、3、5、7天取其肌肉、肝脏、肾脏、皮和脂肪五种组织,采用UPLC-MS/MS法测定其残留状况。结... 采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)研究了氯苯胍在鸡组织中的残留消除规律。白来杭鸡以含氯苯胍500 mg/kg饲料饲喂7 d,停药后的第0、1、3、5、7天取其肌肉、肝脏、肾脏、皮和脂肪五种组织,采用UPLC-MS/MS法测定其残留状况。结果表明,氯苯胍在肌肉中残留量较小,代谢消除比较快,2 d后未检出;而在脂肪、皮和肝脏中残留量较大,代谢消除较慢。 展开更多
关键词 氯苯胍 鸡组织 残留消除
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微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂含量的研究 被引量:10
6
作者 班付国 刘占通 +2 位作者 崔清兰 高延玲 赵海燕 《中国兽药杂志》 2008年第6期32-35,共4页
以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,将泰乐菌素稀释成不同的浓度,寻找浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定泰乐菌素及其制剂含量的浊度法。泰乐菌素的浓度在0.6-2.0u/mL之间,其浓度... 以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,将泰乐菌素稀释成不同的浓度,寻找浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定泰乐菌素及其制剂含量的浊度法。泰乐菌素的浓度在0.6-2.0u/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r为0.9992。经t检验,泰乐菌素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.87%,平均可信限率为2.76%,RSD为0.37%。管碟法与浊度法所测结果无显著差异。浊度法具有简便、精确、快速的特点,可用于泰乐菌素及其制剂含量的测定。 展开更多
关键词 浊度法 管碟法:泰乐菌素
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超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中群勃龙残留方法研究 被引量:4
7
作者 班付国 陈蔷 +3 位作者 宋志超 贾振民 吴宁鹏 彭丽 《中国兽药杂志》 2010年第10期46-50,共5页
建立了牛奶中苯并咪唑类药物及代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。水产样品经乙酸乙酯提取,C18固相萃取柱净化,采用超高效液相色谱-串联质谱多反应监测模式检测,外标法定量。不同基质中,群勃龙在2-100 ng/mL的浓度范围内呈... 建立了牛奶中苯并咪唑类药物及代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。水产样品经乙酸乙酯提取,C18固相萃取柱净化,采用超高效液相色谱-串联质谱多反应监测模式检测,外标法定量。不同基质中,群勃龙在2-100 ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性相关,相关系数为0.994以上;本方法对群勃龙群勃龙在鱼、虾、鳖、蟹类产品中的检测限为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg;在贝类产品中的检测限为1μg/kg,定量限2μg/kg;不同水产品的基质中添加1-10μg/kg浓度范围内,其回收率为74.2%-119%,批内变异系数在1.0%-9.0%之间,批间变异系数在0.3%-8.5%之间。本方法分析速度快,灵敏度高,重现性好,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,可用于水产品中群勃龙的残留检测。 展开更多
关键词 水产品 群勃龙 残留 超高效液相色谱-串联质谱法
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五种土霉素注射液在猪体内的药物代谢动力学比较研究 被引量:3
8
作者 班付国 吴宁鹏 +2 位作者 彭丽 贾振民 刘宏伟 《中国兽药杂志》 2012年第1期16-18,共3页
对五种土霉素注射液产品(A、B、C、D和得米先20%)进行了猪体内的药代动力学比较研究。五组猪分别按20 mg/kg的剂量耳后肌肉注射,HPLC测定血药浓度,3P97软件拟合血药浓度-时间数据,计算药代动力学参数。五种长效土霉素注射液均符合二室... 对五种土霉素注射液产品(A、B、C、D和得米先20%)进行了猪体内的药代动力学比较研究。五组猪分别按20 mg/kg的剂量耳后肌肉注射,HPLC测定血药浓度,3P97软件拟合血药浓度-时间数据,计算药代动力学参数。五种长效土霉素注射液均符合二室开放模型,峰浓度值分别为1.511、.772、.132、.022、.72μg/mL,AUC分别为48.456、0.22、52.41、66.045、9.8(μg.h)/mL。比较而言,得米先20%药动学最好,其次为产品C,产品B最差。 展开更多
关键词 土霉素注射液 药代动力学 比较
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HPLC-PDA法检测17种兽药中非法添加氨茶碱、二羟丙茶碱的研究 被引量:4
9
作者 班付国 邹素华 +1 位作者 吴宁鹏 李慧素 《中国兽药杂志》 2014年第12期32-38,共7页
建立了17种兽药中非法添加氨茶碱和二羟丙茶碱的高效液相色谱法。以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,二极管阵列检测器全波长(200~400nm)扫描,270nm进行测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检... 建立了17种兽药中非法添加氨茶碱和二羟丙茶碱的高效液相色谱法。以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.025mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,二极管阵列检测器全波长(200~400nm)扫描,270nm进行测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,氨茶碱和二羟丙茶碱与其他物质峰能很好的分离。两种药物在0.5~200μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r均为1.0000。按外标法以峰面积计算,氨茶碱和二羟丙茶碱的平均回收率分别为92.6%~108.3%、93.5%-105.9%,RSD分别为0.05%~3.6%、0.2%~3.7%。结果表明,该方法适合兽药中氨茶碱和二羟丙茶碱的检测。 展开更多
关键词 氨茶碱 二羟丙茶碱 高效液相色谱法 峰纯度检查 光谱相似度检查
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长效土霉素注射液在猪体内的生物等效性研究 被引量:2
10
作者 班付国 吴宁鹏 +3 位作者 周红霞 李建正 王丽景 董晓盈 《中国兽药杂志》 2013年第7期38-41,共4页
研究自制长效土霉素注射液与进口长效土霉素注射液(得米先注射液)在猪体内单剂量注射的药代动力学和生物等效性,为临床应用提供参考和依据。采用双处理、双周期随即交叉试验设计。12头健康猪分为两组,分别先后单剂量肌肉注射自制长效土... 研究自制长效土霉素注射液与进口长效土霉素注射液(得米先注射液)在猪体内单剂量注射的药代动力学和生物等效性,为临床应用提供参考和依据。采用双处理、双周期随即交叉试验设计。12头健康猪分为两组,分别先后单剂量肌肉注射自制长效土霉素注射液与得米先注射液,用高效液相色谱法测定血浆中土霉素的浓度,3P97软件计算药代动力学参数。自制长效土霉素注射液与参比制剂的主要药动学参数如下:AUC分别为(145.41±3.59)、(159.28±4.47)μg.mL-1.h,T1/2β分别为(84.776±2.21)、(72.740±1.95)h,Cmax分别为(3.519±1.66)、(3.924±1.34)μg/mL,Tmax分别为(1.848±0.54)、(1.760±0.41)h。采用3P97药代动力学软件分析比较AUC和Cmax90%置信区间,自制长效土霉素注射液的AUC、Cmax的90%置信区间分别为94.7%~105.2%、85.0%~114.6%,分别落在参比制剂的80%~125%、70%~143%范围内,两组参数差异不显著(P>0.05),结果表明二者具有生物等效性。 展开更多
关键词 长效土霉素注射液 生物等效性
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两种盐酸多西环素注射液在猪体内的药代动力学研究 被引量:1
11
作者 班付国 李建正 +3 位作者 王丽景 董晓盈 周红霞 吴宁鹏 《中国兽药杂志》 2013年第8期22-25,共4页
研究制备了两种稳定的20%盐酸多西环素注射液,按10 mg/kg的剂量分别给猪肌肉注射,观察两个制剂在猪体内单剂量肌注的药代动力学特征。结果表明,多西环素在猪体内的药物动力学特征均符合一级吸收二室开放模型,其主要的药物代谢动力学参数... 研究制备了两种稳定的20%盐酸多西环素注射液,按10 mg/kg的剂量分别给猪肌肉注射,观察两个制剂在猪体内单剂量肌注的药代动力学特征。结果表明,多西环素在猪体内的药物动力学特征均符合一级吸收二室开放模型,其主要的药物代谢动力学参数:消除半衰期(T1/2β)分别为(3.246±1.04)和(9.631±1.12)h,药时曲线下面积(AUC)为(10.462±0.28)和(17.525±0.14)(μg/mL)*h,达峰时间(Tpeak)及达峰浓度(Cmax)分别为(1.427±0.16)h、(1.465±0.20)μg/mL和(1.694±0.15)h、(1.058±0.09)μg/mL。其中制剂一的血药浓度在给药2 h后迅速降低,为普通注射液;与制剂一相比,制剂二能够缓慢释放药物,为长效缓释盐酸多西环素注射液。 展开更多
关键词 盐酸多西环素注射液 药代动力学
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HPLC法测定盐酸氨丙啉的含量及对杂质2-甲基吡啶进行检查
12
作者 班付国 宋志超 +2 位作者 刘宏伟 贾振民 郭芙蓉 《中国兽药杂志》 2005年第7期31-33,共3页
采用高效液相色谱法测定盐酸氨丙啉的含量及对杂质2-甲基吡啶进行检查。用WatersXTerraTMRPC18色谱柱,以乙腈-甲醇-庚烷磺酸钠溶液(将12g的1-庚烷磺酸钠溶于1000mL水中,加24mL冰醋酸,6mL的三乙胺制得)(5∶35∶60)为流动相,用紫外检测器... 采用高效液相色谱法测定盐酸氨丙啉的含量及对杂质2-甲基吡啶进行检查。用WatersXTerraTMRPC18色谱柱,以乙腈-甲醇-庚烷磺酸钠溶液(将12g的1-庚烷磺酸钠溶于1000mL水中,加24mL冰醋酸,6mL的三乙胺制得)(5∶35∶60)为流动相,用紫外检测器于254nm处检测,柱温30℃,流速1.0mL/min。在该条件下盐酸氨丙啉和2-甲基吡啶的分离度很好,盐酸氨丙啉浓度在0.05~0.50mg/mL范围内,其色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=3.07×107x-3.90×104,r=0.9999,RSD=0.76%。该法适用于盐酸氨丙啉原料药的质量控制。 展开更多
关键词 2-甲基吡啶 盐酸氨丙啉 HPLC法 检查 杂质 含量 测定 高效液相色谱法 紫外检测器 色谱峰面积 线性关系 回归方程 质量控制 磺酸钠 色谱柱 C18 冰醋酸 流动相 三乙胺 min 分离度 原料药 庚烷 浓度
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微生物浊度法测定硫酸黏菌素及其制剂含量的研究
13
作者 班付国 高延玲 +3 位作者 刘宏伟 刘占通 赵海燕 崔清兰 《中国兽药杂志》 2008年第10期17-19,共3页
以大肠杆菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,研究微生物比浊法测定硫酸黏菌素及其制剂的含量。硫酸黏菌素的浓度在44.9u/mL~93.2u/mL之间时,检测菌液接种浓度为0.3%,培养时间为2~3h,其浓度的对数值与相对应的吸光度具有... 以大肠杆菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,研究微生物比浊法测定硫酸黏菌素及其制剂的含量。硫酸黏菌素的浓度在44.9u/mL~93.2u/mL之间时,检测菌液接种浓度为0.3%,培养时间为2~3h,其浓度的对数值与相对应的吸光度具有良好的线性关系,相关系数:r=0.9978。所建立的微生物浊度法重现性较好,具有简便、精确、快速的特点,可用于硫酸黏菌素及其制剂含量的测定。 展开更多
关键词 浊度法 硫酸黏菌素 含量测定
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《中华人民共和国兽药典》2010年版一部抗生素品种的增修订介绍
14
作者 班付国 刘宏伟 高延玲 《中国兽药杂志》 2011年第12期6-8,共3页
对《中华人民共和国兽药典》2010年版抗生素品种的增修订内容进行了阐述,以便广大使用者了解和掌握《中国兽药典》2010年版与《中国兽药典》2005年版一部抗生素质量标准的变化,并为2015年版《中国兽药典》的编制提供了建议。
关键词 中华人民共和国兽药典 抗生素 标准 增修订
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紫外分光光度法测定北里霉素制剂的含量
15
作者 班付国 《中国兽药杂志》 北大核心 1998年第2期28-29,共2页
紫外分光光度法测定北里霉素制剂的含量班付国河南省兽药监察所郑州450003北里霉素(kitasamycinum)又称柱晶白霉素(leucomycinum)是属于大环内酯类的多组分抗生素,在兽医临床上用于防治革兰氏阳性... 紫外分光光度法测定北里霉素制剂的含量班付国河南省兽药监察所郑州450003北里霉素(kitasamycinum)又称柱晶白霉素(leucomycinum)是属于大环内酯类的多组分抗生素,在兽医临床上用于防治革兰氏阳性菌、支原体、钩端螺旋体等感染,并可... 展开更多
关键词 紫外分光光度法 北里霉素 制剂 含量 抗生素
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猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:13
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作者 王淑娟 刘梅芬 +6 位作者 闫若潜 班付国 赵雪丽 马震原 王华俊 王翠 赵明军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2112-2118,共7页
为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因保守区域序列,设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立... 为建立一种快速、敏感、特异的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)实时荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中CSFV E2基因保守区域序列,设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以CSFV总RNA为反转录模板,经优化反应条件,建立CSFV实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对35份临床疑似CSFV感染样品进行了检测。结果表明,本研究建立的CSFV实时荧光定量PCR检测方法在101~106拷贝/μL范围内有很好的线性关系,相关系数为0.999;CSFV细胞培养物出现阳性扩增信号,但ST正常细胞对照和其他8种病原对照未出现扩增,特异性良好;该方法重复性好、敏感性高,最低检测模板浓度为10拷贝/μL,并且CSFV的最低检测限为1TCID50/mL;自35份疑似CSFV感染样品中检出19份阳性样品,与本课题组建立的CSFV Nested RT-PCR检测结果和克隆测序结果一致。本研究成功建立了CSFV实时荧光定量PCR检测方法,可用于CSFV的快速检测。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 实时荧光定量PCR 特异性 重复性 敏感性 应用
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2018年河南省兽医系统实验室检测能力比对结果分析 被引量:15
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作者 程果 赵美雪 +7 位作者 朱前磊 张利平 宋丹 杨海波 刘敏 方先珍 闫若潜 班付国 《中国动物检疫》 CAS 2019年第5期29-33,共5页
为评价和提高实验室检测能力和水平,建立省市县三级动物疫情监测预警机制和风险评估模型,2018年河南省组织开展了兽医实验室检测能力比对,共有18个省辖市、10个省直管县/市和117个县/区级实验室参加,其检测结果平均正确率分别为97.30%、... 为评价和提高实验室检测能力和水平,建立省市县三级动物疫情监测预警机制和风险评估模型,2018年河南省组织开展了兽医实验室检测能力比对,共有18个省辖市、10个省直管县/市和117个县/区级实验室参加,其检测结果平均正确率分别为97.30%、93.68%、91.97%。结果表明,全省大部分兽医实验室均已具备相应的检测能力,能够为河南省动物疫情风险评估提供技术支撑,但市、县两级实验室检测水平存在一定差距,县级兽医实验室检测诊断能力和水平有待提高。这提示应进一步加大实验室资金投入与实验室建设,增强实验室内外管理水平,提升技术人员业务能力,加强技术支撑,完善检测标准体系等。 展开更多
关键词 兽医实验室 检测能力 比对 风险评估 检测标准
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犬瘟热病毒、犬细小病毒二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 赵雪丽 刘毅 +5 位作者 班付国 闫若潜 王华俊 王淑娟 马震原 王东方 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第8期2086-2094,共9页
为建立一种特异、高通量检测犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,本研究选取高度保守且具有型特异性的CDV H基因和CPVVP2基因序列,设计CDV和CPV特异... 为建立一种特异、高通量检测犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)和犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,本研究选取高度保守且具有型特异性的CDV H基因和CPVVP2基因序列,设计CDV和CPV特异性引物对及TaqMan MGB探针;经反应条件优化,建立了检测CDV和CPV的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法检测CDV、CPV的标准曲线线性相关系数(R^2)分别为0.997和0.993,最低检出限均为10拷贝/μL,具有较高的灵敏性;对犬副流感病毒等4种病原对照和阴性对照均未出现扩增,特异性良好;CDV、CPV标准品批间试验结果显示,该方法具有很好的重复性;对48份临床疑似CDV或CPV感染样品检测结果显示,14份为CDV阳性,19份为CPV阳性,4份为CDV/CPV双阳性,与CDV H基因、CPVVP2基因测序结果符合率为100%。本研究建立的二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法具有灵敏、特异、高通量和可准确定量等优点,可用于临床CDV/CPV病毒感染各个时期的快速鉴别检测。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒(CDV) H基因 犬细小病毒(CPV) VP2基因 二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR
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2018年河南省未免疫羊群布鲁氏菌病流行情况调查 被引量:10
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作者 赵胜杰 陶龙斐 +4 位作者 周琳 刘光辉 房大学 郭洛生 班付国 《中国动物检疫》 CAS 2019年第9期5-8,共4页
为了解河南省未免疫羊群布鲁氏菌感染情况,2018年以河南省未免疫布鲁氏菌病疫苗的羊群为研究对象,开展羊群布鲁氏菌病血清学普查,共对1830个场群的59462份血清样品进行布鲁氏菌抗体检测,并对结果进行空间、群间分布分析。结果显示:河南... 为了解河南省未免疫羊群布鲁氏菌感染情况,2018年以河南省未免疫布鲁氏菌病疫苗的羊群为研究对象,开展羊群布鲁氏菌病血清学普查,共对1830个场群的59462份血清样品进行布鲁氏菌抗体检测,并对结果进行空间、群间分布分析。结果显示:河南省羊群布鲁氏菌感染抗体平均场群阳性率为3.93%,个体阳性率为1.24%;豫西地区场群流行率和个体流行率均最高,分别为12.31%和6.43%,豫东地区最低,分别为0.55%和0.04%;散养户的场群阳性率和个体阳性率均最高,分别为7.53%和2.17%,而羊屠宰场和交易市场中未检出阳性。结果表明:豫西地区以及散养户羊群布鲁氏菌病流行情况较为严重,应采取全面免疫的防控措施,降低该地的布鲁氏菌病流行率;豫东、豫南地区和种羊场等流行率较低的地区和场点,可采取检测、扑杀等措施,逐步实现净化目标;羊屠宰场和交易市场虽然无阳性检出,但应继续加强监测,防止病菌交叉传播。通过本次河南省未免疫羊群普查,基本掌握了全省未免疫羊群的布鲁氏菌病流行状况,从而为全省羊群布鲁氏菌病防控提供了重要的参考数据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 未免疫羊群 感染抗体 流行情况调查 河南
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微生物浊度法测定安普霉素及其制剂效价的研究 被引量:5
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作者 高延玲 班付国 +3 位作者 刘占通 刘宏伟 周红霞 马俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第5期206-210,共5页
以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3~4 h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密... 以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将硫酸安普霉素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3~4 h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性及适用性等验证。结果表明,安普霉素的浓度在2.9~7.2 U/mL之间,其浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关,相关系数r=0.9988。经t检验,安普霉素浓度的对数值与相对应的吸光度回归效果显著。所建立的浊度法平均回收率为99.82%,平均可信限率为2.48%,相对标准偏差(RSD)为1.86%。管碟法与比浊法所测结果无显著差异。因此,本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点,可用于硫酸安普霉素及其制剂的效价测定。 展开更多
关键词 浊度法 管碟法 安普霉素 效价
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