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副结核分支杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
1
作者
平宇明
张宏莉
+8 位作者
班亚星
刘建奇
任希恩
邬彩丽
刘东霞
徐丽媛
杨雪娇
常华
李劼
《动物医学进展》
北大核心
2024年第7期1-6,共6页
为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏...
为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法最低检测限为5拷贝/μL;重复试验中批内和批间变异系数均小于4%;与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛支原体、肺炎克雷伯菌和曼氏杆菌等病原检测无交叉反应,能特异性检出MAP。应用建立的qPCR开展了内蒙古自治区6个市的MAP临床样品检测和流行情况分析,结果显示MAP平均阳性率为0.85%(6/704)。结果表明,成功建立了MAP的实时荧光定量PCR检测方法,可用于临床中MAP的监测和调查,为MAP疾病诊断与监控提供了快捷的方法。
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关键词
副结核分支杆菌
实时荧光定量PCR
检测方法
感染调查
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职称材料
题名
副结核分支杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
1
作者
平宇明
张宏莉
班亚星
刘建奇
任希恩
邬彩丽
刘东霞
徐丽媛
杨雪娇
常华
李劼
机构
云南农业大学动物医学院
金宇保灵生物药品有限公司/兽用疫苗国家工程实验室
河南省卫辉市农业农村局
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第7期1-6,共6页
基金
呼和浩特市科技创新领域人才项目(2022RC-联合体-1)
云南省基础研究面上项目(202001AT070119)
+3 种基金
2023年生物医药领域科技计划项目“抗畜禽腹泻兽药创制”子项目(K2420230005)
云南省农业基础研究联合专项面上项目(2018FG001-043)
云南农业大学兽医公共卫生省创新团队项目(202105AE160014)
云南省石林县奶山羊产业科技特派团项目(202104BI090017)。
文摘
为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法最低检测限为5拷贝/μL;重复试验中批内和批间变异系数均小于4%;与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛支原体、肺炎克雷伯菌和曼氏杆菌等病原检测无交叉反应,能特异性检出MAP。应用建立的qPCR开展了内蒙古自治区6个市的MAP临床样品检测和流行情况分析,结果显示MAP平均阳性率为0.85%(6/704)。结果表明,成功建立了MAP的实时荧光定量PCR检测方法,可用于临床中MAP的监测和调查,为MAP疾病诊断与监控提供了快捷的方法。
关键词
副结核分支杆菌
实时荧光定量PCR
检测方法
感染调查
Keywords
Mycobactium paratuberculosis(Mycobacterium avium subsp.paratuberculosis)
real-time fluorescence quantitative PCR
detection method
infection investigation
分类号
S852.619 [农业科学—基础兽医学]
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
副结核分支杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
平宇明
张宏莉
班亚星
刘建奇
任希恩
邬彩丽
刘东霞
徐丽媛
杨雪娇
常华
李劼
《动物医学进展》
北大核心
2024
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