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靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定
被引量：
2
1
作者
王婵
王新敏
+6 位作者
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期558-564,共7页
目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒...
目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒进行转染,最后筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法利用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别检测两种巨噬细胞中Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段,由公司构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(Mcl-1shRNA1-3),然后通过脂质体将真核表达质粒载体转染到小鼠巨噬细胞株Raw264.7中,24、48h后通过倒置荧光显微镜观察转染效果,并分别采用实时定量PCR和Western blot检测Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。结果小鼠巨噬细胞Raw264.7中Mcl-1的mRNA及蛋白质的表达显著高于人巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05);构建的shRNA表达载体在24、48h均能降低Raw264.7细胞内mcl-1mRNA和蛋白水平,尤其在48h沉默效果最为明显;转染48h后与正常组、脂质体组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与Mcl-1shRNA1和Mcl-1shRNA2相比,Mcl-1shRNA3对Mcl-1mRNA和蛋白的沉默作用最强。结论成功筛选出了实验所用细胞Raw264.7及对小鼠巨噬细胞Raw264.7内Mcl-1具有明显沉默效果的靶向Mcl-1shRNA3真核表达质粒。
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关键词
髓细胞白血病-1基因
RAW264.7细胞
THP-1细胞
结核分枝杆菌
短发夹RNA
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职称材料
我国学术期刊媒体融合发展策略研究
被引量：
4
2
作者
王飞雨
《中国传媒科技》
2023年第8期35-39,共5页
【目的】研究我国学术期刊如何在媒体融合背景下制定自身发展策略。【方法】通过文献研究、经验总结、案例研究等方法,对我国学术期刊媒体融合发展的现状、存在的问题及原因进行分析和总结。【结果】媒体融合给学术期刊带来了新的发展机...
【目的】研究我国学术期刊如何在媒体融合背景下制定自身发展策略。【方法】通过文献研究、经验总结、案例研究等方法,对我国学术期刊媒体融合发展的现状、存在的问题及原因进行分析和总结。【结果】媒体融合给学术期刊带来了新的发展机遇,但当前学术期刊融合效果不尽如人意,媒体融合发展具有较强的必要性和紧迫性。【结论】强化融合理念,增强紧迫意识;找准自身定位,明确内容优势;深化融合方式,拓展传播渠道;储备媒体人才,完善机制建设等举措,借助媒体融合之力实现自身的可持续发展。
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关键词
媒体融合
出版融合
学术期刊
数字化转型
新媒体
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职称材料
题名
靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定
被引量：
2
1
作者
王婵
王新敏
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
机构
石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室
石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室
石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科
石河子大学医学院病理生理学教研室
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期558-564,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81260241)
石河子大学项目(No.RCZX200922)~~
文摘
目的研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠Mcl-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒进行转染,最后筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的shRNA表达质粒。方法利用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别检测两种巨噬细胞中Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。采用小分子干扰RNA(siRNA)软件设计3个针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段,由公司构建携带此shRNA片段的真核表达质粒(Mcl-1shRNA1-3),然后通过脂质体将真核表达质粒载体转染到小鼠巨噬细胞株Raw264.7中,24、48h后通过倒置荧光显微镜观察转染效果,并分别采用实时定量PCR和Western blot检测Mcl-1mRNA和蛋白表达情况。结果小鼠巨噬细胞Raw264.7中Mcl-1的mRNA及蛋白质的表达显著高于人巨噬细胞,差异有统计学意义(P<0.05);构建的shRNA表达载体在24、48h均能降低Raw264.7细胞内mcl-1mRNA和蛋白水平,尤其在48h沉默效果最为明显;转染48h后与正常组、脂质体组和阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);与Mcl-1shRNA1和Mcl-1shRNA2相比,Mcl-1shRNA3对Mcl-1mRNA和蛋白的沉默作用最强。结论成功筛选出了实验所用细胞Raw264.7及对小鼠巨噬细胞Raw264.7内Mcl-1具有明显沉默效果的靶向Mcl-1shRNA3真核表达质粒。
关键词
髓细胞白血病-1基因
RAW264.7细胞
THP-1细胞
结核分枝杆菌
短发夹RNA
Keywords
短发夹 RNA
Raw264.7 cell
THP-1 cell
Mycobacterium Tuberculosis
short hairpin RNA
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
我国学术期刊媒体融合发展策略研究
被引量：
4
2
作者
王飞雨
机构
中国宏观经济研究院市场与价格研究所《中国物价》编辑部
出处
《中国传媒科技》
2023年第8期35-39,共5页
文摘
【目的】研究我国学术期刊如何在媒体融合背景下制定自身发展策略。【方法】通过文献研究、经验总结、案例研究等方法,对我国学术期刊媒体融合发展的现状、存在的问题及原因进行分析和总结。【结果】媒体融合给学术期刊带来了新的发展机遇,但当前学术期刊融合效果不尽如人意,媒体融合发展具有较强的必要性和紧迫性。【结论】强化融合理念,增强紧迫意识;找准自身定位,明确内容优势;深化融合方式,拓展传播渠道;储备媒体人才,完善机制建设等举措,借助媒体融合之力实现自身的可持续发展。
关键词
媒体融合
出版融合
学术期刊
数字化转型
新媒体
分类号
G236 [文化科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向沉默巨噬细胞中 Mcl-1基因 shRNA表达质粒的构建与鉴定
王婵
王新敏
王飞雨
张雨晴
曹旭东
吴江东
吴芳
张万江
章乐
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
我国学术期刊媒体融合发展策略研究
王飞雨
《中国传媒科技》
2023
4
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