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有机磷水解酶异源表达纯化及抗乙基对氧磷中毒能力初步评价
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作者 马铭 翟亚楠 +3 位作者 王顺业 张中华 李前 高静 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期672-680,共9页
目的异源表达纯化有机磷水解酶(OPH),初步评价其动物体内抗乙基对氧磷中毒能力。方法构建OPH的大肠杆菌表达菌株,采用镍柱亲和色谱及凝胶过滤色谱进行纯化,对纯化产物进行蛋白质谱鉴定;以乙基对氧磷为底物测定酶活力及其动力学常数K_(m)... 目的异源表达纯化有机磷水解酶(OPH),初步评价其动物体内抗乙基对氧磷中毒能力。方法构建OPH的大肠杆菌表达菌株,采用镍柱亲和色谱及凝胶过滤色谱进行纯化,对纯化产物进行蛋白质谱鉴定;以乙基对氧磷为底物测定酶活力及其动力学常数K_(m),V_(max),k_(cat)和k_(cat)/K_(m);12只SD大鼠随机分为OPH组和溶剂对照组,OPH组按1 mg·kg^(-1)剂量iv给予OPH溶液,对照组给予等体积生理盐水,给药后2组立刻sc给予2倍半数致死量(LD_(50))乙基对氧磷(0.86 mg·kg^(-1))染毒,观察大鼠状态,对中毒症状进行评分。对存活大鼠每隔24 h重复sc给予2倍LD_(50)乙基对氧磷,根据大鼠存活情况与中毒症状分别绘制生存曲线与症状评分图,评价OPH的抗有机磷中毒能力。结果成功构建了OPH的大肠杆菌表达菌株,经过两步纯化后由十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征得单一条带,OPH纯度较高,经蛋白质谱测定制备蛋白与目标蛋白序列一致;以乙基对氧磷为底物时,OPH的Km=7.5×10^(-5)mol·L^(-1),V_(max)=2.2×10^(-7)mol·L^(-1)·s^(-1),k_(cat)=158.4 s^(-1),k_(cat)/K_(m)=2.1×10^(6) L·mol^(-1)·s^(-1);对照组大鼠sc给予2倍LD_(50)乙基对氧磷后,出现严重中毒症状,15 min内全部死亡,实验组大鼠在首次染毒后均未出现中毒症状,连续染毒后中毒症状逐渐加重直至第4天全部死亡。结论成功制备高纯度OPH,且OPH在大鼠体内能有效对抗乙基对氧磷中毒。 展开更多
关键词 有机磷化合物 生物清除剂 有机磷水解酶 乙基对氧磷 酶动力学参数
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面向智能家居的音视频文件安全传输方法研究 被引量:3
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作者 王顺业 杜彦辉 芦天亮 《现代电子技术》 北大核心 2020年第12期182-186,共5页
目前基于智能家居的音视频文件在文件传输过程中存在信息泄露等安全问题;此外,智能家居设备普遍受算力和带宽限制。针对此背景,在网络数据包传输理论的基础上,提出一个音视频文件安全传输的方法。该方法将音视频文件的特征部分与数据部... 目前基于智能家居的音视频文件在文件传输过程中存在信息泄露等安全问题;此外,智能家居设备普遍受算力和带宽限制。针对此背景,在网络数据包传输理论的基础上,提出一个音视频文件安全传输的方法。该方法将音视频文件的特征部分与数据部分进行切分,形成编码的数据包序列,并对数据包按序列重新排序后传输,保证数据传输的安全性。实验结果表明,该方法传输效率高、算力代价低,能够在受限的环境下实现音视频文件的安全传输。 展开更多
关键词 智能家居 音视频文件 安全传输 文件特征 数据包编码 测试分析
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面向智能家居的音视频文件匿名通信系统 被引量:1
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作者 王顺业 芦天亮 杜彦辉 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2020年第15期101-105,共5页
智能家居发展迅速但其通信隐私问题尚未得到较好解决,互联网环境下的匿名通信模型因智能家居设备受限的算力和带宽无法直接迁移到智能家居设备上。提出的方法针对智能家居在传输音视频数据时的通信隐私问题,融合基于身份的加密和洋葱路... 智能家居发展迅速但其通信隐私问题尚未得到较好解决,互联网环境下的匿名通信模型因智能家居设备受限的算力和带宽无法直接迁移到智能家居设备上。提出的方法针对智能家居在传输音视频数据时的通信隐私问题,融合基于身份的加密和洋葱路由策略,并对文件分片重新排序后按特定序列进行传输。理论分析和仿真证明提出的方法降低了算力需求,同时具有较好的匿名性、安全性和一定的抗合谋攻击能力。 展开更多
关键词 基于身份的加密 匿名通信 智能家居 音视频
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