ICU医院感染状况的调查及预防对策 被引量：18

1

作者 王跃群 叶古祥 +1 位作者 施咪娜 杨文伟 《解放军护理杂志》 2009年第13期25-27,33,共4页

目的通过对ICU医院感染状况的前瞻性调查,结合ICU医院感染管理指南,提出预防对策,以期降低ICU医院感染发生率。方法2007年1月至2008年12月入住我院ICU患者纳入前瞻性调查,对分离菌株进行药敏试验并统计分析。结果ICU发生医院感染413例,6... 目的通过对ICU医院感染状况的前瞻性调查,结合ICU医院感染管理指南,提出预防对策,以期降低ICU医院感染发生率。方法2007年1月至2008年12月入住我院ICU患者纳入前瞻性调查,对分离菌株进行药敏试验并统计分析。结果ICU发生医院感染413例,60岁以上者占86.0%;医院感染发生率为13.3%。ICU患者器械相关感染发生率为23.89‰。下呼吸道感染占62.46%。留置导尿、中心静脉插管和呼吸机相关的器械相关感染发生率分别为8.21‰、6.81‰和30.26‰。本研究共分离出206株细菌,其中G+菌占37.4%,为金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表面葡萄球菌和粪肠球菌;G-菌占62.6%,为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。金黄色葡萄球菌株中甲氧西林耐药株占87.8%。大肠埃希菌中头孢曲松耐药株占54.5%;超广谱β-内酰胺酶(+)耐药株占50%。肺炎克雷伯菌株中超广谱β-内酰胺酶(+)耐药株占29.4%。铜绿假单胞菌株中环丙沙星耐药株占28.6%;多药耐药菌株占11.4%。鲍曼不动杆菌中亚胺培南耐药株占25.8%;泛耐药菌株占22.6%。结论年龄、基础疾病、侵入性操作和环境等是ICU医院感染的危险因素。 展开更多

关键词 ICU 医院感染 护理

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心肌细胞形成和分化过程中钙信号转导调控的研究进展 被引量：2

2

作者 王跃群 刘明耀 吴秀山 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期227-230,共4页

脊椎动物心肌细胞形成和分化是胚胎细胞一系列特定基因的精确转录表达过程,细胞内Ca2+信号转导系统在此起着重要的作用。该文对Ca2+依赖性转录过程:Ca2+/CaM/CaN/NF AT/GATA 4转录信号途径和Ca2+/CaM/CaMK/HDAC/MEF2转录信号途径指导下... 脊椎动物心肌细胞形成和分化是胚胎细胞一系列特定基因的精确转录表达过程,细胞内Ca2+信号转导系统在此起着重要的作用。该文对Ca2+依赖性转录过程:Ca2+/CaM/CaN/NF AT/GATA 4转录信号途径和Ca2+/CaM/CaMK/HDAC/MEF2转录信号途径指导下的心肌细胞的形成与分化研究进展作一综述。 展开更多

关键词 心肌细胞 形成 分化 钙离子 信号转导 调控 基因 脊椎动物

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湘云鲤和湘江野鲤血液指标的比较 被引量：4

3

作者 王跃群 刘少军 +1 位作者 王刚 欧希良 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 1998年第1期71-75,共5页

报道了２１尾湘云鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＸｉａｎｇｙｕｎｎｅｎｓｉｓ）与２４尾湘江野鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＸｉａｎｇｊｉａｎｇｎｅｎｓｉｓ）血液中的红细胞数、白细胞数、血红蛋白值、红细胞脆性、比积、... 报道了２１尾湘云鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＸｉａｎｇｙｕｎｎｅｎｓｉｓ）与２４尾湘江野鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏＸｉａｎｇｊｉａｎｇｎｅｎｓｉｓ）血液中的红细胞数、白细胞数、血红蛋白值、红细胞脆性、比积、白细胞分类计数及各型血细胞大小（长径×短径）．比较了两种鱼上述值的差异，结果如下：湘云鲤的红细胞数、红细胞脆性、比积值显著低于湘江野鲤，白细胞数和血红蛋白无显著差异；两种鱼的白细胞分类计数均以淋巴细胞为主；各种血细胞大小都是湘云鲤显著大于湘江野鲤． 展开更多

关键词 湘云鲤 湘江野鲤 血液指标 血细胞读数

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形成性评价在护理技能教学中的应用 被引量：27

4

作者 王跃群 《解放军护理杂志》 2009年第9期70-71,共2页

目的探讨形成性评价应用于护理技能教学和考核的效果。方法选取我校护理专业2个班学生70人,甲班36人为对照组,采用传统评价方法;乙班34人为实验组,实施形成性评价方法;比较两组学生的考核成绩。对实验组学生问卷调查其对形成性评价的意... 目的探讨形成性评价应用于护理技能教学和考核的效果。方法选取我校护理专业2个班学生70人,甲班36人为对照组,采用传统评价方法;乙班34人为实验组,实施形成性评价方法;比较两组学生的考核成绩。对实验组学生问卷调查其对形成性评价的意见。结果实验组护理技能考核总评成绩评为优的比例明显高于对照组(P<0.05),评为优、良的比例明显高于对照组(P<0.01),评为中的比例亦明显低于对照组(P<0.01)。实验组学生问卷调查结果中对形成性评价反映良好者占85.7%。结论形成性评价有利于提高护理技能教学质量和学生综合能力。 展开更多

关键词 护理技能 形成性评价 信息反馈

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果蝇nulp1特异性多克隆抗体制备及检测 被引量：6

5

作者 龚琳 王跃群 +5 位作者 袁婺洲 莫小阳 万永奇 江志钢 吴秀山 李永青 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期69-73,共5页

为了利用果蝇模型研究nulp1蛋白在早期心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增出果蝇nulp1基因的部分编码区并插入到pET28a表达载体中.之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3);通过IPTG诱导表达His-nulp1融合蛋白,该融合蛋白采用Ni2... 为了利用果蝇模型研究nulp1蛋白在早期心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增出果蝇nulp1基因的部分编码区并插入到pET28a表达载体中.之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3);通过IPTG诱导表达His-nulp1融合蛋白,该融合蛋白采用Ni2+金属螯合层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,利用west-ern blot对抗体进行分析.结果表明获得了高效价的特异性兔抗f-nulp1多克隆抗体.这为进一步研究果蝇心脏发育的分子机制创造了条件. 展开更多

关键词 nulp1 果蝇 原核表达 多克隆抗体

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人类新基因RMND5A的克隆及功能研究 被引量：4

6

作者 唐文岘 黎冠 +5 位作者 邓云 袁婺州 李永青 王跃群 朱传柄 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2008年第1期85-89,共5页

克隆了一个新的人类Lish/CTLH结构域基因,经国际基因命名委员会批准命名为RMND5A.该基因位于染色体2p11.2,长3 239 bp,编码391个氨基酸,其结构域从N端起依次为LisH、CTLH与CRA.RT-PCR分析表明该基因在人类早期胚胎的多个组织中有表达,... 克隆了一个新的人类Lish/CTLH结构域基因,经国际基因命名委员会批准命名为RMND5A.该基因位于染色体2p11.2,长3 239 bp,编码391个氨基酸,其结构域从N端起依次为LisH、CTLH与CRA.RT-PCR分析表明该基因在人类早期胚胎的多个组织中有表达,在心脏、肝和肾中的表达水平较强.对该基因的蛋白进行了表达并制备了多克隆抗体.荧光素酶活性测定分析表明,在COS7细胞中过表达蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子ELK-1和AP-1的转录活性显著下降,表明RMND5A通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程. 展开更多

关键词 RMND5A 克隆 表达 MAPK

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人类新基因RHBDL8的研究初报 被引量：1

7

作者 朱传炳 朱莹 +4 位作者 曾伟奇 王跃群 李永青 袁婺州 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2004年第3期79-82,共4页

运用计算机克隆的方法获得了一个新的人同源基因,经国际基因命名委员会批准命名为Rhomboid,veinlet like8(RHBDL8).该基因位于7号染色体q11.23区域,mRNA全长约1.8kb,3'末端含有ATAAA的加尾信号,编码一段长434个氨基酸的蛋白质.该蛋... 运用计算机克隆的方法获得了一个新的人同源基因,经国际基因命名委员会批准命名为Rhomboid,veinlet like8(RHBDL8).该基因位于7号染色体q11.23区域,mRNA全长约1.8kb,3'末端含有ATAAA的加尾信号,编码一段长434个氨基酸的蛋白质.该蛋白质含有一个rhomboid保守区,且高度相似于一个未有研究的小鼠蛋白.其表达在胚胎期(23周)主要集中在大脑、心脏、骨骼肌,而在成体,除脑部依然有大量表达外,上述的其他部位表达量均大大降低.这种在发育过程中的表达变化提示我们该基因可能在这些器官的发育中起到了一定的调控作用. 展开更多

关键词 新基因 表达量 et-l 心脏 脑部 小鼠 量表 计算机克隆 同源基因 成体

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双色FISH和DNA纤维FISH方法的建立与应用 被引量：1

8

作者 李永青 朱传炳 +2 位作者 袁婺洲 王跃群 吴秀山 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页

在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位inv(5)(p13.1q13.3)的细胞系后,为了确定该新建细胞系在建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变,以生物素或地高辛标记的cCI5-216和cCI5-267黏粒DNA为探针,进行染色体中期、间期和DN... 在构建了含毛细胞白血病相关的结构性倒位inv(5)(p13.1q13.3)的细胞系后,为了确定该新建细胞系在建株过程中其倒位断裂点关键区遗传物质是否发生改变,以生物素或地高辛标记的cCI5-216和cCI5-267黏粒DNA为探针,进行染色体中期、间期和DNA纤维3种双色荧光原位杂交的分析。结果表明:该新建细胞系的3种双色荧光原位杂交结果,均与该细胞系的原代细胞的完全相同,证实了该细胞系倒位断裂点关键区的遗传物质结构未发生改变。该细胞系是揭示毛细胞白血病发病的分子机理的重要研究材料。 展开更多

关键词 双色FISH DNA纤维FISH方法 应用 毛细胞白血病 细胞素 双色荧光原位杂交 结构性倒立

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一个人类锌指蛋白家族新基因ZFP28的克隆及表达 被引量：1

9

作者 周亮 袁婺洲 +3 位作者 王跃群 皮花亮 朱传炳 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2002年第3期72-76,共5页

Krｐｐｌｅ型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子 .初步克隆了一个新的人类kr櫣ｐｐｌｅ型锌指蛋白基因 ,经国际基因命名委员会批准命名为ZFP2 8.此基因长 4 0 76个碱基 ,含 8个外显子 ,在基因组DNA上长 1 8kb .它编码的蛋白质全... Krｐｐｌｅ型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子 .初步克隆了一个新的人类kr櫣ｐｐｌｅ型锌指蛋白基因 ,经国际基因命名委员会批准命名为ZFP2 8.此基因长 4 0 76个碱基 ,含 8个外显子 ,在基因组DNA上长 1 8kb .它编码的蛋白质全长 868个氨基酸 ,含 1个信号肽 ,2个KRAB框和 1 4个C2H2型的锌指 .NorthernBolt分析表明该基因在人类早期胚胎的各个组织中普遍表达 ,在肺和肝中的表达水平最强 .其结构和表达特征预示着它编码的是一个具DNA结合功能的转录调控因子 . 展开更多

关键词 人类锌指蛋白 ZFP28 基因克隆 基因表达 转录调节因子 基因编码 基因结构

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人类基因ZNF569结构域在MAPK信号途径中的作用 被引量：1

10

作者 黄欣琼 朱传炳 +3 位作者 王跃群 李永青 袁婺洲 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2005年第3期80-84,共5页

有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径是细胞信号转导过程的重要组成部分.MAPK将膜转导蛋白与其细胞内的关键调控靶蛋白联系起来,从而介导胞外的多种信号并将这些信号级联放大后传递给相应的下游因子,通过激活包括SRE,ELK-1,AP-1等在... 有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径是细胞信号转导过程的重要组成部分.MAPK将膜转导蛋白与其细胞内的关键调控靶蛋白联系起来,从而介导胞外的多种信号并将这些信号级联放大后传递给相应的下游因子,通过激活包括SRE,ELK-1,AP-1等在内的多种转录因子,最终开启细胞特定功能基因的表达.锌指蛋白是人类最大的基因家族之一,其蛋白产物主要通过与DNA相互作用而起转录因子作用,调节靶基因的表达以适应生物体发育、分化、成熟过程的需要.运用MAPK信号途径对锌指基因ZNF569的结构域进行了转录活性分析.分析表明在COS-7细胞中过表达ZNF569蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子AP-1和SRE的转录抑制活性显著下降.ZNF569在核质内的亚细胞定位分析进一步证明了其作为转录因子的作用.对ZNF569的分段report assays分析表明,ZNF569可能通过KRAB框和C2H2锌指结构域行使其抑制转录的作用.这些结果表明,ZNF569可以通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程. 展开更多

关键词 ZNF569 锌指蛋白 MAPK 转录因子

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影响泥鳅人工繁殖某些因素的研究 被引量：3

11

作者 王跃群 唐东茂 高凌峰 《湖南教育学院学报》 1994年第2期89-93,共5页

本文对影响泥鳅人工繁殖主要外界因素进行了研究。试验结果表明:按性比(?:?)1:2配组,宜在下午6时注射LRH—A,雌鱼剂量为0.67μg/g,雄鱼剂量减半,注射后当即雌雄混养,水体pH值为6.5～7.0,水温20～26℃时可获得较好的繁殖效果。

关键词 泥鳅 人工繁殖 LRH-A 鲤形目

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新基因ZNF325在人类早期胚胎中的表达

12

作者 周亮 李永清 +3 位作者 王跃群 朱传炳 黄春霞 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2003年第1期81-84,共4页

锌指蛋白基因家族是人类最大的基因家族之一 ,目前已知的很多转录调控因子都是锌指蛋白成员[1 ] .初步克隆了一个与RBAK基因有着高度同源性的人类C2 H2 型锌指蛋白新基因 ,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF32 5 .此基因位于染色体 7p2... 锌指蛋白基因家族是人类最大的基因家族之一 ,目前已知的很多转录调控因子都是锌指蛋白成员[1 ] .初步克隆了一个与RBAK基因有着高度同源性的人类C2 H2 型锌指蛋白新基因 ,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF32 5 .此基因位于染色体 7p2 2 ,长 2 6 97个碱基 ,含 5个外显子 ,在基因组DNA上长 15kb .它编码的蛋白质全长46 2个氨基酸 ,含 15个C2 H2 型的锌指 .NorthernBolt分析表明该基因在人类早期胚胎的各个组织中普遍表达 ,在肺和脑中的表达水平最强 ,但在肝中的表达随着胚胎的发育而逐渐减少 .它的结构和表达特征预示着它编码的是一个具DNA结合功能的转录调控因子 . 展开更多

关键词 人类早期胚胎 ZNF325基因 锌指蛋白基因 基因克隆 基因表达 胚胎发育 CDNA文库

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在心脏组织表达的一个人类新基因

13

作者 罗开梅 王跃群 +3 位作者 皮花亮 袁婺洲 李大力 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2003年第2期79-83,共5页

KRAB C2H2型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子.初步克隆了一个新的人类KRAB C2H2型锌指蛋白基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF382.此基因长2824bp,含5个外显子,4个内含子,在基因组DNA上长约23kb.它编码548个氨基酸,在氮... KRAB C2H2型锌指蛋白是一类具有重要功能的转录调节因子.初步克隆了一个新的人类KRAB C2H2型锌指蛋白基因,经国际基因命名委员会批准命名为ZNF382.此基因长2824bp,含5个外显子,4个内含子,在基因组DNA上长约23kb.它编码548个氨基酸,在氮末端含一个KRAB框,碳末端含一个未成形的锌指(VZF)和9个锌指(ZF).Northern杂交结果表明,ZNF382mRNA在早期胚胎时期(至少在妊娠34d之前)就开始表达,在不同时期人类胚胎组织中广泛表达,包括小脑、肾、大脑、肺、心脏、骨骼肌、舌和肾上腺.在成人组织其表达限制在心脏,其结构和表达特征预示着ZNF382在心脏发育和功能的发挥起着潜在的作用. 展开更多

关键词 人类基因组 KRAB/C2H2型锌指蛋白 人类胚胎组织 基因表达 基因克隆 心脏发育

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人类新基因ZNF322的研究进展

14

作者 李永青 王跃群 +3 位作者 袁婺洲 邓云 朱传炳 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2006年第3期69-72,共4页

根据计算机克隆的ZNF322基因序列设计引物,从人类胚胎心脏文库中克隆了ZNF322基因.该基因位于染色体6p22.1,编码由402个氨基酸残基组成、含有9个连续排列的C2H2型锌指蛋白质.Northern杂交的结果表明该基因在成人所有被检测组织中表达。... 根据计算机克隆的ZNF322基因序列设计引物,从人类胚胎心脏文库中克隆了ZNF322基因.该基因位于染色体6p22.1,编码由402个氨基酸残基组成、含有9个连续排列的C2H2型锌指蛋白质.Northern杂交的结果表明该基因在成人所有被检测组织中表达。亚细胞定位研究证明ZNF322蛋白分布在胞核和胞质中.报告基因分析显示ZNF322是一种潜在的转录激活因子. 展开更多

关键词 ZNF322基因 锌指蛋白 基因表达 转录因子

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中国常染色体显性遗传骨胳石化症(II型)家系突变基因筛查研究初报

15

作者 朱传炳 李芳 +5 位作者 吴嵩龄 李永青 王跃群 袁婺州 邓云 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2006年第2期104-105,共2页

为寻找骨胳石化症II的致病基因,从一患该病的家系成员收集血液,制备基因组DNA.应用PCR(聚合链式反应)技术和直接测序分析ClCN7的24个外显子,寻找基因变异.结果表明,除一些内含子中存在个别多态性外,所有成员均未检测到ClCN7基因突变,提... 为寻找骨胳石化症II的致病基因,从一患该病的家系成员收集血液,制备基因组DNA.应用PCR(聚合链式反应)技术和直接测序分析ClCN7的24个外显子,寻找基因变异.结果表明,除一些内含子中存在个别多态性外,所有成员均未检测到ClCN7基因突变,提示该基因不是本病常见的致病基因,在这个家系中ADOII可能归因于其他基因的突变. 展开更多

关键词 骨胳石化症 ClCN7 突变分析 多态性

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人类RING型锌指蛋白DTX2的全长cDNA克隆与序列分析

16

作者 易正芳 李永青 +5 位作者 袁婺洲 王跃群 朱传炳 刘芳 吴自荣 吴秀山 《华东师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期123-126,133,共5页

鉴定了一个人类WWE与RING型锌指基因DTX2,位于人染色体7q11．23．通过RACE获得的全长cDNA显示,DTX2编码包含两个WWE区域与一个RING锌指区域的蛋白．

关键词 DTX2 WWE区域 Ring-锌指蛋白cDNA 序列分析

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人类心血管系统的研究历程

17

作者 叶湘漓 王跃群 +1 位作者 吴秀山 李大力 《生物学教学》 2014年第9期28-31,共4页

心血管疾病严重危害人类的健康，已成为生物医学界关注的焦点。心血管系统的研究经历了漫长的历程，可以分为经验学、生理学和分子生物学三个时期，每个时期都有代表性人物和标志性事件。

关键词 心血管系统 心血管疾病 研究历程

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斑马鱼hand2基因的克隆、抗体制备及分析 被引量：6

18

作者 朱婷 黄文 +6 位作者 王跃群 李永青 袁婺洲 莫小阳 万永奇 吴秀山 邓云 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第1期108-113,共6页

为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST... 为利用斑马鱼动物模型进一步研究bHLH转录因子家庭重要成员hand2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼hand2基因.将所得片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并通过IPTG诱导表达出GST-Hand2融合蛋白,经GST亲和层析法纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体,利用western b lotting和免疫组化的方法对抗体进行分析.分析表明:斑马鱼hand2基因成熟肽编码区含有627 bp,编码208个氨基酸,与人Hand2蛋白的同源性达到83%;IPTG诱导表达后,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71%,经GST纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带.融合蛋白相对分子质量约为49 000.分析表明,制备的抗体具有很好的特异性. 展开更多

关键词 hand2 斑马鱼 原核表达 多克隆抗体

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ZNF425基因抑制急性T淋巴细胞白血病细胞的凋亡 被引量：3

19

作者 朱双丽 刘志强 +8 位作者 刘文邦 江志钢 林礼 梁积峰 陈宇 王跃群 范雄伟 李淑均 吴秀山 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期42-48,共7页

为了解锌指(Zinc finger,ZNF)基因在癌症发生中的作用,利用生物信息学在CCLE数据库中分析得到ZNF425在白血病细胞系中存在高表达;在COSMIC和ICGC数据库中发现ZNF425在癌症患者的造血和淋巴组织中发生突变,并且表达存在差异。在急性T淋... 为了解锌指(Zinc finger,ZNF)基因在癌症发生中的作用,利用生物信息学在CCLE数据库中分析得到ZNF425在白血病细胞系中存在高表达;在COSMIC和ICGC数据库中发现ZNF425在癌症患者的造血和淋巴组织中发生突变,并且表达存在差异。在急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞系瞬时过表达ZNF425,能抑制Jurkat细胞凋亡但Jurkat的细胞周期却不受影响,Western Blot检测发现过表达ZNF425导致ERK活化受到抑制。本研究结果首次揭示了ZNF425在血癌细胞中的功能,可能通过影响癌症细胞的凋亡调节癌症的发生。 展开更多

关键词 ZNF425 生物信息学 细胞周期 细胞凋亡 MAPK信号

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斑马鱼HAS2基因的克隆、抗体制备及分析 被引量：2

20

作者 杨建华 杨青 +5 位作者 吴秀山 袁婺洲 王跃群 李永青 莫小阳 万永奇 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期73-77,共5页

HAS2是斑马鱼心脏发育的一个标志基因,为了利用斑马鱼动物模型进一步研究HAS2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼HAS2基因的片段.将所得的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-HA... HAS2是斑马鱼心脏发育的一个标志基因,为了利用斑马鱼动物模型进一步研究HAS2基因在心脏发育中的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了斑马鱼HAS2基因的片段.将所得的片段插入原核表达载体pGEX-4T-1中,并将重组质粒(pGEX-4T-1-HAS2)转化大肠杆菌(E.coli)BL21,IPTG诱导表达GST-HAS2融合蛋白;通过尿素洗涤沉淀蛋白并切胶回收纯化融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体活性.生物信息学分析结果表明:斑马鱼HAS2基因的开放阅读框含有1 658 bp,编码552个氨基酸;SDS-PAGE电泳分析显示,IPTG诱导表达的融合蛋白相对分子质量约为4.5×104;Western blotting分析表明,制备的抗体具有良好的特异性. 展开更多

关键词 HAS2 斑马鱼 原核表达 多克隆抗体

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