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桑树组织培养诱导多倍体植株 被引量:5
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作者 王茜龄 周金星 +2 位作者 余茂德 徐立 李镇刚 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期164-167,共4页
Under aseptic conditions, hypocotyls of mulberry were averagely cut into 3 segments which were then cultured on MS solid medium supplemented with 3.0 mg5L -1 6-BA, 0.3 mg5L -1 IAA, 1.0 mg5L -1 AgNO3 to select the best... Under aseptic conditions, hypocotyls of mulberry were averagely cut into 3 segments which were then cultured on MS solid medium supplemented with 3.0 mg5L -1 6-BA, 0.3 mg5L -1 IAA, 1.0 mg5L -1 AgNO3 to select the best region of hypocotyls for getting the more caesptose shoots. In this study, the tip part of hypocotyls(near the germ) developed quickly and induced adventitious buds easily. The caesptose shoots were dipped into 1,1.5, 2.5 g5L -1 colchicines solution for 2 or 3 days, or dropped with 1.5, 2, 2.5 g5L -1 colchicines solution 2 times a day for 5 days, and then transferred to fresh medium. Both the dipped-and dropped-treatments induced variant shoots. Examination of the chromosomes of the shoot tip cells of the regenerated plantlets revealed that they were either tetraploids or chineras. The rate of tetraploids produced from the dipped-and dropped-treatments was 14% and 20% respectively with the chromosomes number of 56(2n=4x=56) as compared to the diploid(2n=2x=28). 展开更多
关键词 桑树 下胚轴 组织培养 秋水仙碱 多倍体植株
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桑椹中酚类物质极性分布及抗氧化活性评价 被引量:20
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作者 喻艳 逯海朋 +6 位作者 贾亚楠 向伟 粟君 曾令树 敬成俊 王茜龄 徐立 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期73-79,共7页
采用超声波辅助,用不同极性的溶剂提取红果2号桑椹,测定并分析各提取浸膏的酚类含量,自由基清除能力、抗脂质过氧化能力、总还原力和DNA保护潜力。研究结果表明,乙醇提取物浸膏(absolute ethanol extracts of fruit,FAE)的酚类含量最高,... 采用超声波辅助,用不同极性的溶剂提取红果2号桑椹,测定并分析各提取浸膏的酚类含量,自由基清除能力、抗脂质过氧化能力、总还原力和DNA保护潜力。研究结果表明,乙醇提取物浸膏(absolute ethanol extracts of fruit,FAE)的酚类含量最高,为3.65 mg GAE/g dw,且总还原力和羟基自由基(·OH)清除力最强(P<0.05);乙酸乙酯提取物浸膏(ethyl acetate extracts of fruit,FEE)的DPPH自由基(DPPH·)清除力(0.71mg/m L)和抗脂质过氧化能力最强;水提取物浸膏(water extracts of fruit,FWE)的ABTS自由基(ABTS+·)清除力最强(3.52 mg/m L),且能有效保护DNA不被损伤;石油醚提取物浸膏(petroleum ether extracts of fruit,FPE)酚类含量最低,且4种活性均最弱。基于实验结果,红果2号桑椹具有作为功能性保健品(天然抗氧化剂)的巨大潜力。 展开更多
关键词 桑椹 酚类 抗氧化 清除自由基 DNA损伤保护
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桑树查尔酮异构酶基因的克隆与原核表达分析 被引量:14
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作者 刘长英 赵爱春 +5 位作者 李军 吕蕊花 余亚圣 王茜龄 鲁成 余茂德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期39-45,共7页
以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编... 以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编码219个氨基酸。预测MaCHI编码蛋白质的分子质量为23.8ku,理论等电点为5.29。采用RT-PCR法分析MaCHI在不同组织中的表达水平,在叶片和果中的表达量较高,在根中表达量较低。构建pET-28a(+)-MaCHI原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。 展开更多
关键词 桑树 查尔酮异构酶 基因克隆 组织表达 原核表达
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外源乙烯利与1-MCP处理对桑椹中乙烯和花青素相关代谢基因表达的影响 被引量:11
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作者 余建 赵爱春 +6 位作者 刘长英 梁燕梅 朱攀攀 蔡雨翔 王茜龄 李镇刚 余茂德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期138-148,共11页
【目的】以桑品种‘嘉陵40号’的桑椹为试验材料,探究乙烯在桑椹发育进程中的作用和乙烯相关基因的表达模式,为今后有效开发桑椹的经济价值和通过分子生物学手段调控桑椹成熟期提供理论依据。【方法】桑盛花期后21天(21DAF)和26天(26DA... 【目的】以桑品种‘嘉陵40号’的桑椹为试验材料,探究乙烯在桑椹发育进程中的作用和乙烯相关基因的表达模式,为今后有效开发桑椹的经济价值和通过分子生物学手段调控桑椹成熟期提供理论依据。【方法】桑盛花期后21天(21DAF)和26天(26DAF),分别用100 mg·L^(-1)乙烯利喷洒桑椹表面,采摘后桑椹经0.5μL·L^(-1)乙烯抑制剂1-MCP熏蒸处理,测定其花青素和总糖含量,并提取桑椹的总RNA及合成cDNA模板,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析乙烯生物合成基因MaACO2和MaACS3,乙烯信号转导基因MaETR1,MaETR2,MaCTR1,MaEIN2和MaEIL2,以及花青素生物合成下游基因MaDFR和MaANS的转录表达。【结果】桑椹经过乙烯利处理后,花青素含量和总糖含量与对照相比都有明显增加,与花青素合成有关的基因表达也受乙烯利上调,经1-MCP熏蒸的桑椹花青素含量和总糖含量与对照相比都有所下降。在21DAF桑椹中,乙烯相关基因的表达经乙烯利处理后显著上调,而对1-MCP具有不同的响应模式,其中,MaACO2,MaACS3以及MaEIL2表达下调,MaETR1,MaCTR1和MaEIN2的表达量在各时段显著上调,MaETR2表达量在12 h无明显变化,其他时段上调。26DAF桑椹中,经1-MCP的熏蒸而下调了乙烯各基因的表达,而乙烯利的处理对各基因表达具有不同的影响,与对照相比,处理后32 h,MaACO2,MaETR1,MaETR2,MaEIN2和MaEIL2的表达上调,MaACS3和MaCTR1的表达则下调。【结论】乙烯利处理能够诱导桑椹乙烯生物合成和花青素生物合成相关基因的上调表达,对乙烯信号转导基因也有一定调控作用,且能促进桑椹花青素和总糖含量的积累,并能加快桑椹的发育进程。乙烯抑制剂1-MCP的熏蒸能抑制乙烯信号转导各元件基因的表达,阻止乙烯信号转导和传递,且抑制桑椹中花青素和总糖含量的积累。 展开更多
关键词 乙烯利 1-MCP 花青素 基因表达 信号转导
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桑椹发育中花青素、叶绿素含量变化及相关基因的表达分析 被引量:10
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作者 刘长英 李军 +5 位作者 赵爱春 王茜龄 吕蕊花 王晓红 鲁成 余茂德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第9期59-66,共8页
以新选育果叶兼用品系‘嘉陵40号’桑椹为材料,测定不同发育时期桑椹的花青素和叶绿素的含量,并分析花青素合成相关酶基因、Rubisco编码基因和脱镁叶绿酸a加氧酶基因(PaO)的表达差异。花青素含量随着桑椹发育逐渐上升,叶绿素的含量先下... 以新选育果叶兼用品系‘嘉陵40号’桑椹为材料,测定不同发育时期桑椹的花青素和叶绿素的含量,并分析花青素合成相关酶基因、Rubisco编码基因和脱镁叶绿酸a加氧酶基因(PaO)的表达差异。花青素含量随着桑椹发育逐渐上升,叶绿素的含量先下降后上升。与花青素合成有关的酶基因随着桑椹发育呈现不同的表达模式,Rubisco编码基因RBCL和RBCS表达量逐渐降低,PaO1和PaO2的表达量都呈先下降后逐渐上升,然后再下降的表达模式。使用ABA、乙烯利和1-MCP等试剂处理桑椹,经分析在生化上ABA和乙烯利能促进花青素合成,抑制叶绿素的合成,在基因表达上能促进花青素合成相关基因的表达,而抑制Rubisco编码基因的表达;1-MCP能抑制花青素的合成,并对花青素合成基因的表达也具抑制作用。 展开更多
关键词 桑椹 花青素 叶绿素 乙烯 ABA 1-MCP
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Monellin-EGFP融合蛋白在毕赤酵母中的表达 被引量:3
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作者 金筱耘 赵爱春 +4 位作者 李军 李镇刚 王茜龄 吴存容 余茂德 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第13期171-175,共5页
根据已报道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母GS115中,并获得高效表达的... 根据已报道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母GS115中,并获得高效表达的重组子pPIC9K-M-E。经PCR检测,SDS-PAGE和Western Blot杂交证实已表达出融合蛋白,该蛋白经纯化与盲测实验,结果显示其甜度约为标准蔗糖的500倍。 展开更多
关键词 Monellin甜蛋白 绿色荧光蛋白 真核表达 桑树
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β-1,3-葡聚糖酶基因克隆、表达及抗菌活性的研究 被引量:2
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作者 李镇刚 赵爱春 +3 位作者 王茜龄 金筱耘 李军 余茂德 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第13期191-196,共6页
通过RT-PCR的方法分别从小麦和水稻的cDNA中克隆获得β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu基因),分别命名为TaGlu9507和OsGlu30。它们的序列分析表明这两个克隆均含一个1002bp的开放阅读框(ORF),编码334个氨基酸,各自的N-端含有一个长20和29个氨基... 通过RT-PCR的方法分别从小麦和水稻的cDNA中克隆获得β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu基因),分别命名为TaGlu9507和OsGlu30。它们的序列分析表明这两个克隆均含一个1002bp的开放阅读框(ORF),编码334个氨基酸,各自的N-端含有一个长20和29个氨基酸残基的信号肽序列。将不含信号肽序列的TaGlu9507和OsGlu30编码区DNA片段分别克隆进pET28-a(+)表达载体,并转入大肠杆菌BL21(DE3),经0.5mmol/L IPTG诱导3h后获得了高量表达,表达量分别占大肠杆菌可溶性蛋白的49.7%和26.7%,表达产物对黑曲霉、酵母等真菌生长均有较为明显的抑制作用。本结果更进一步表明β-1,3-葡聚糖酶基因是植物真菌病防治的潜在目的基因群之一。 展开更多
关键词 Glu基因 CDNA 原核表达 植物真菌病 基因克隆
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