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榛子胚珠发育相关基因ChARF1的原核表达及多克隆抗体制备
被引量：
1
1
作者
黄立龙
魏珩
+3 位作者
王秋缘
刘春明
刘剑锋
程云清
《东北师大学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2022年第2期106-112,共7页
为解析ChARF1基因在榛子胚珠发育中的调控作用,以平欧杂交榛(Corylus heterophylla×C.avellana)“达维”成熟期胚珠为实验材料,克隆了在榛子胚珠发育不同时期显著差异表达的ARF同源基因,构建了其原核表达载体,并制备了该蛋白的多...
为解析ChARF1基因在榛子胚珠发育中的调控作用,以平欧杂交榛(Corylus heterophylla×C.avellana)“达维”成熟期胚珠为实验材料,克隆了在榛子胚珠发育不同时期显著差异表达的ARF同源基因,构建了其原核表达载体,并制备了该蛋白的多隆抗体.结果表明:ChARF1与胡桃(Juglans regia)ARF(XM_035695460.1)参考序列亲缘关系最近,与拟南芥AtARF1/2和番茄SlARF2聚类于同一大进化枝.以ChARF1基因N端前380个氨基酸(N-380)特异序列构建pET-28a-SUMO-ChARF1(N-380)原核表达载体,诱导表达后获得了包涵体形式存在的相对分子质量为66 000的抗原蛋白,纯化后免疫2只实验级雄性日本大耳白兔,最终获得能够特异性检测抗原蛋白的ChARF1(N-380)多克隆抗体E7200和E7201,二者效价均达到1∶512 000.
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关键词
榛子
ARF
原核表达
多克隆抗体
Western
Blot
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职称材料
题名
榛子胚珠发育相关基因ChARF1的原核表达及多克隆抗体制备
被引量：
1
1
作者
黄立龙
魏珩
王秋缘
刘春明
刘剑锋
程云清
机构
吉林师范大学吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室
吉林师范大学生命科学学院
出处
《东北师大学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2022年第2期106-112,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(32171840)
吉林省科技厅中青年科技创新创业卓越人才项目(20210509033RQ)。
文摘
为解析ChARF1基因在榛子胚珠发育中的调控作用,以平欧杂交榛(Corylus heterophylla×C.avellana)“达维”成熟期胚珠为实验材料,克隆了在榛子胚珠发育不同时期显著差异表达的ARF同源基因,构建了其原核表达载体,并制备了该蛋白的多隆抗体.结果表明:ChARF1与胡桃(Juglans regia)ARF(XM_035695460.1)参考序列亲缘关系最近,与拟南芥AtARF1/2和番茄SlARF2聚类于同一大进化枝.以ChARF1基因N端前380个氨基酸(N-380)特异序列构建pET-28a-SUMO-ChARF1(N-380)原核表达载体,诱导表达后获得了包涵体形式存在的相对分子质量为66 000的抗原蛋白,纯化后免疫2只实验级雄性日本大耳白兔,最终获得能够特异性检测抗原蛋白的ChARF1(N-380)多克隆抗体E7200和E7201,二者效价均达到1∶512 000.
关键词
榛子
ARF
原核表达
多克隆抗体
Western
Blot
Keywords
hazel
ARF
procaryotic expression
polyclonal antibody
Western Blot
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S664.4 [农业科学—果树学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
榛子胚珠发育相关基因ChARF1的原核表达及多克隆抗体制备
黄立龙
魏珩
王秋缘
刘春明
刘剑锋
程云清
《东北师大学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2022
1
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