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PRL-3基因对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响
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作者 杨羽淇 王盈雯 +1 位作者 贾博 郭庆东 《中国医药导报》 CAS 2023年第11期14-18,共5页
目的研究PRL-3基因在胶质母细胞瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响。方法通过TCGA数据库分析PRL-3基因在胶质母细胞瘤及正常组织中表达情况,进一步选取空军军医大学第一附属医院诊治的15例胶质母细胞瘤患者术后肿瘤组织... 目的研究PRL-3基因在胶质母细胞瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响。方法通过TCGA数据库分析PRL-3基因在胶质母细胞瘤及正常组织中表达情况,进一步选取空军军医大学第一附属医院诊治的15例胶质母细胞瘤患者术后肿瘤组织(原发性10例,复发性5例),采用免疫组织化学法检测PRL-3阳性细胞在胶质母细胞瘤中的表达情况。选取人胶质母细胞瘤LN229细胞系及替莫唑胺耐药的LN229/TMZ-R细胞系,采用qRT-PCR、Western blot检测PRL-3 mRNA及蛋白的表达情况。选取LN229、SHG44细胞系及对替莫唑胺不敏感的U87细胞系,分别设置正常组、对照组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组。比较正常组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组PRL-3 mRNA表达情况以验证PRL-3过表达及下调是否成功。然后将对照组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组采用替莫唑胺(LN229、SHG44细胞系加入替莫唑胺100μmol/L,U87细胞系加入替莫唑胺500μmol/L)进行处理,正常组不处理,72 h后采用CCK-8法测定细胞活性。结果数据库分析显示,原发性胶质母细胞瘤中PRL-3表达高于正常组织,且随肿瘤级别增高而升高(P<0.05)。复发性胶质母细胞瘤组织中PRL-3阳性细胞免疫组织化学法评分高于原发性胶质母细胞瘤组织(P<0.05)。LN229/TMZ-R细胞系中PRL-3 mRNA表达高于LN229细胞系(P<0.05),PRL-3蛋白在LN229/TMZ-R细胞系中高表达。PRL-3过表达组PRL-3 mRNA高于正常组,PRL-3下调组PRL-3 mRNA低于正常组(P<0.05)。在LN229、SHG44、U87细胞系中,对照组细胞活性低于正常组,PRL-3过表达组细胞活性高于对照组,PRL-3下调组细胞活性低于对照组(P<0.05)。结论PRL-3基因低表达可以增强胶质母细胞瘤对替莫唑胺治疗的敏感性,有望成为协同替莫唑胺化疗的有益靶点。 展开更多
关键词 PRL-3基因 胶质母细胞瘤 替莫唑胺 化疗
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lncRNA FTX对结肠癌伊立替康耐药株增殖、迁移能力的影响
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作者 程柏杨 潘鹭翔 +2 位作者 朱茂荣 王盈雯 顾锦涛 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第8期961-967,共7页
目的研究长链非编码RNA FTX(long noncoding RNA FTX,lncRNA FTX)对结肠癌细胞伊立替康(irinotecan,CPT-11)耐药株增殖、迁移的影响。方法对从lnCAR数据库(https://lncar.renlab.org/)中获取的80例临床样本FTX的表达情况以及70例结肠癌... 目的研究长链非编码RNA FTX(long noncoding RNA FTX,lncRNA FTX)对结肠癌细胞伊立替康(irinotecan,CPT-11)耐药株增殖、迁移的影响。方法对从lnCAR数据库(https://lncar.renlab.org/)中获取的80例临床样本FTX的表达情况以及70例结肠癌患者生存率进行统计学分析。采用药物浓度梯度构建人结肠癌伊立替康耐药细胞株(HCT-116/CPT-11R),通过CCK-8(cell counting kit-8)测定其耐药指数,并通过荧光实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测正常结肠细胞NCM460、结肠癌细胞HCT-116以及构建的耐药细胞株的FTX表达水平。构建敲低lncRNA FTX的慢病毒载体(sh-FTX)及对照空白载体(sh-NC)转染HCT-116/CPT-11R耐药株中,经过嘌呤霉素筛选获得lncRNA FTX稳定下调的结肠癌细胞耐药株,并通过qPCR鉴定敲低效率。通过克隆形成实验及CCK-8实验分别检测lncRNA FTX对sh-NC组、sh-FTX组耐药细胞克隆形成能力及生长活力的影响。利用划痕实验检测lncRNA FTX对sh-NC组、sh-FTX组耐药株细胞迁移能力的影响。通过Western blot检测sh-NC组、sh-FTX组耐药株细胞增殖相关蛋白c-myc和迁移相关蛋白Vimentin、MTA-1表达水平。结果统计数据显示,结肠癌患者的FTX表达高于正常人(P<0.01);且生存分析结果显示FTX低表达组的生存率高于FTX高表达组(P<0.05),其中低表达组患者的5年生存率约为高表达组的5倍。结肠癌伊立替康耐药株HCT-116/CPT-11R构建成功,耐药株中lncRNA FTX的表达水平显著高于正常结肠细胞以及结肠癌细胞(P<0.01)。sh-FTX能显著降低耐药细胞株中FTX的表达水平(P<0.001)。与sh-NC组比较,sh-FTX组HCT-116/CPT-11R的增殖能力和迁移能力被显著抑制(P<0.005)。lncRNA FTX被敲低后,HCT-116/CPT-11R细胞中增殖相关蛋白c-myc以及转移相关蛋白Vimentin、MTA-1蛋白表达水平降低,HCT-116耐药株的迁移和增殖能力被显著抑制(P<0.05或P<0.005)。结论lncRNA FTX在结肠癌细胞系耐药株HCT-116/CPT-11R中高表达,体外实验发现敲低lncRNA FTX能显著抑制HCT-116/CPT-11R增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 结肠癌 耐药 长链非编码RNA FTX 增殖 迁移
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