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1株古细菌海藻糖合成酶系在枯草芽孢杆菌中的诱导表达
被引量：
5
1
作者
王珊瑛
李由然
+3 位作者
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第21期124-130,共7页
来源于古细菌嗜酸硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltooligosylterhalose synthase,MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)联合作用,可以利用淀粉为底物生...
来源于古细菌嗜酸硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltooligosylterhalose synthase,MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)联合作用,可以利用淀粉为底物生成海藻糖。本研究构建了6种枯草芽孢杆菌一大肠杆菌穿梭表达载体,将密码子优化后的MTSase和MTHase编码基因在木糖异构酶基因的启动子及其阻遏蛋白介导下实现了在枯草芽孢杆菌中的功能表达,木糖启动子分别来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。在以5 g/L甘油为碳源,24 g/L蛋白胨为氮源时,菌体培养8 h后加入终质量浓度为6 g/L的木糖,37℃诱导16 h后重组MTSase、MTHase产生联合作用,海藻糖转化率达到33.57%。实现了MTSase、MTHase在枯草芽孢杆菌中的功能表达。
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关键词
穿梭质粒
嗜酸硫化叶菌
枯草芽孢杆菌
诱导表达
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职称材料
嗜热放线菌海藻糖合成酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达
被引量：
1
2
作者
李由然
王珊瑛
+4 位作者
杨韵霏
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1148-1155,共8页
海藻糖合成酶可将麦芽糖异构化为海藻糖,是海藻糖酶法生物转化的中心酶制剂。为了实现海藻糖合成酶在食品安全型表达宿主中高效生产,进而应用于食品级海藻糖的酶法合成,构建了革兰氏阳性菌重组表达质粒并转化入地衣芽孢杆菌。重组质粒...
海藻糖合成酶可将麦芽糖异构化为海藻糖,是海藻糖酶法生物转化的中心酶制剂。为了实现海藻糖合成酶在食品安全型表达宿主中高效生产,进而应用于食品级海藻糖的酶法合成,构建了革兰氏阳性菌重组表达质粒并转化入地衣芽孢杆菌。重组质粒携带了来自于嗜热放线菌Thermomonospora curvata海藻糖合成酶的编码基因,在地衣芽孢杆菌木糖异构酶启动子及其阻遏蛋白的介导下表达,胞内海藻糖合成酶发酵活力为12.1 U/m L。考察了不同培养条件对重组菌生长和产酶的影响,结果显示质量分数4%的麦芽糊精和质量分数0.4%的豆饼粉分别为产酶适宜的碳源和氮源;菌体培养10 h后加入终质量浓度为1 g/d L的诱导剂,于37℃诱导12 h后重组菌产酶最高达到23.7 U/m L。
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关键词
海藻糖合成酶
嗜热放线菌
地衣芽孢杆菌
诱导表达
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职称材料
紫菜不同品系的AFLP遗传差异性分析
被引量：
2
3
作者
王鑫
王珊瑛
+6 位作者
王苗苗
王亚东
朱辰娴
陆勤勤
姜波
张涛
朱建一
《江苏农业科学》
北大核心
2013年第5期38-41,共4页
采用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对6个紫菜品系进行遗传差异性分析。结果表明,在42对引物中,有6对能得到重复性较好的多态性条带,共扩增出141条谱带,其中133条为多态性谱带,多态位点的比例达94.33%。基于引物扩增结果计算遗传相似性,...
采用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对6个紫菜品系进行遗传差异性分析。结果表明,在42对引物中,有6对能得到重复性较好的多态性条带,共扩增出141条谱带,其中133条为多态性谱带,多态位点的比例达94.33%。基于引物扩增结果计算遗传相似性,结果显示不同紫菜品系间存在差异。UPGMA、NJ法聚类分析结果表明,条斑紫菜品系Y001和Y-L0602遗传相似系数高,聚为一类;条斑紫菜和坛紫菜遗传重组品系Y-H034和H-Y035聚为一类,之后与Y-H017品系聚集;坛紫菜H017品系与其他供试品系遗传距离较远,聚类在最外侧。各品系间遗传距离与其选育方法有关,筛选获得的遗传重组后代表现出与条斑紫菜更近的亲缘关系。
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关键词
紫菜
AFLP
分子标记
遗传重组
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职称材料
题名
1株古细菌海藻糖合成酶系在枯草芽孢杆菌中的诱导表达
被引量：
5
1
作者
王珊瑛
李由然
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
机构
江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学生物工程学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016年第21期124-130,共7页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31401674)
江南大学自主重点项目(JUSRP51503)
文摘
来源于古细菌嗜酸硫化叶菌(Sulfolobus acidocaldarius)的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltooligosylterhalose synthase,MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖水解酶(maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)联合作用,可以利用淀粉为底物生成海藻糖。本研究构建了6种枯草芽孢杆菌一大肠杆菌穿梭表达载体,将密码子优化后的MTSase和MTHase编码基因在木糖异构酶基因的启动子及其阻遏蛋白介导下实现了在枯草芽孢杆菌中的功能表达,木糖启动子分别来源于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。在以5 g/L甘油为碳源,24 g/L蛋白胨为氮源时,菌体培养8 h后加入终质量浓度为6 g/L的木糖,37℃诱导16 h后重组MTSase、MTHase产生联合作用,海藻糖转化率达到33.57%。实现了MTSase、MTHase在枯草芽孢杆菌中的功能表达。
关键词
穿梭质粒
嗜酸硫化叶菌
枯草芽孢杆菌
诱导表达
Keywords
shuttle vector
Sulfolobus acidocaldarius
Bacillus subtilis
inducible expression
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
嗜热放线菌海藻糖合成酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达
被引量：
1
2
作者
李由然
王珊瑛
杨韵霏
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
机构
粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学生物工程学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1148-1155,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31401674)
江南大学自主科研重点项目(JUSRP51503)
文摘
海藻糖合成酶可将麦芽糖异构化为海藻糖,是海藻糖酶法生物转化的中心酶制剂。为了实现海藻糖合成酶在食品安全型表达宿主中高效生产,进而应用于食品级海藻糖的酶法合成,构建了革兰氏阳性菌重组表达质粒并转化入地衣芽孢杆菌。重组质粒携带了来自于嗜热放线菌Thermomonospora curvata海藻糖合成酶的编码基因,在地衣芽孢杆菌木糖异构酶启动子及其阻遏蛋白的介导下表达,胞内海藻糖合成酶发酵活力为12.1 U/m L。考察了不同培养条件对重组菌生长和产酶的影响,结果显示质量分数4%的麦芽糊精和质量分数0.4%的豆饼粉分别为产酶适宜的碳源和氮源;菌体培养10 h后加入终质量浓度为1 g/d L的诱导剂,于37℃诱导12 h后重组菌产酶最高达到23.7 U/m L。
关键词
海藻糖合成酶
嗜热放线菌
地衣芽孢杆菌
诱导表达
Keywords
Trehalose synthase,Thermomonospora curvata,Bacillus lichenifotmis ,inducible expression
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
紫菜不同品系的AFLP遗传差异性分析
被引量：
2
3
作者
王鑫
王珊瑛
王苗苗
王亚东
朱辰娴
陆勤勤
姜波
张涛
朱建一
机构
常熟理工学院生物与食品工程学院
江苏省水产技术推广站
江苏省海洋水产研究所
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2013年第5期38-41,共4页
基金
农业部公益性行业科研专项(编号:200903030)
国家海洋局海洋公益性行业科研专项(编号:201105023)
+2 种基金
国家"863"计划(编号:2012AA10A406-6)
江苏省农业科技支撑计划(编号:BE2011376
BE2011375)
文摘
采用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对6个紫菜品系进行遗传差异性分析。结果表明,在42对引物中,有6对能得到重复性较好的多态性条带,共扩增出141条谱带,其中133条为多态性谱带,多态位点的比例达94.33%。基于引物扩增结果计算遗传相似性,结果显示不同紫菜品系间存在差异。UPGMA、NJ法聚类分析结果表明,条斑紫菜品系Y001和Y-L0602遗传相似系数高,聚为一类;条斑紫菜和坛紫菜遗传重组品系Y-H034和H-Y035聚为一类,之后与Y-H017品系聚集;坛紫菜H017品系与其他供试品系遗传距离较远,聚类在最外侧。各品系间遗传距离与其选育方法有关,筛选获得的遗传重组后代表现出与条斑紫菜更近的亲缘关系。
关键词
紫菜
AFLP
分子标记
遗传重组
分类号
S917 [农业科学—水产科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1株古细菌海藻糖合成酶系在枯草芽孢杆菌中的诱导表达
王珊瑛
李由然
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2016
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
嗜热放线菌海藻糖合成酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达
李由然
王珊瑛
杨韵霏
顾正华
张梁
丁重阳
石贵阳
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
紫菜不同品系的AFLP遗传差异性分析
王鑫
王珊瑛
王苗苗
王亚东
朱辰娴
陆勤勤
姜波
张涛
朱建一
《江苏农业科学》
北大核心
2013
2
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