目的筛选高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中差异表达长链非编码RNA(lncRNA),分析其作用。方法将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。对照组正常饲养4周,模型组给予4.5%高糖腹膜透析液腹腔注射4周(1 m L/kg、1次/d...目的筛选高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中差异表达长链非编码RNA(lncRNA),分析其作用。方法将20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组,每组10只。对照组正常饲养4周,模型组给予4.5%高糖腹膜透析液腹腔注射4周(1 m L/kg、1次/d)。取两组壁层腹膜组织,进行HE染色,并采用Western blotting法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,结果均提示转分化模型建立成功。采用芯片技术筛选模型组与对照组差异表达lncRNA,应用生物信息学方法分析lncRNA芯片结果,采用RT-PCR法进行验证。结果芯片筛选结果显示,两组差异表达(≥2倍、P<0.05)lncRNA共757条,差异表达mRNA共1 431条。差异表达倍数较大(>5倍),长度为500~2 000 nt,表达丰度在1 000以上的2个上调和2个下调的lncRNA分别为ri|4732442J12|PX00051O23|2580、NONMMUT055611、NONMMUT002253、NONMMUT064302。差异表达lncRNA功能与细胞膜结合蛋白组成、膜蛋白基因转录、炎症防御反应、信号转导通路等有关;差异表达mRNA可能参与真核生物翻译过程、膜蛋白合成等途径。模型组NONMMUT002253、NONMMUT064302相对表达量低于对照组,ri|4732442J12|PX00051O23|2580、NONMMUT055611相对表达量高于对照组(P均<0.05),结果与芯片检测结果基本一致。结论高糖诱导腹膜间皮细胞转分化小鼠模型中存在差异表达lncRNA,差异表达lncRNA参与腹膜间皮细胞转分化的形成。展开更多
