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烯醇化酶活性测定的三种方法及其评价 被引量:3
1
作者 王毓三 马莹 陈江华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期114-117,共4页
本文介绍烯醇化酶总活性测定的三种方法,并作简要评价.直接分光光度法.最适pH7.4,Km4~7×10^(-5)mol/L,适用于层析液中酶活性的检测.PK-LDH 偶联法和PK-HK-G6PD 偶联法均适用于血清烯醇化酶活性的测定.前者工具酶较少,空白反应低,... 本文介绍烯醇化酶总活性测定的三种方法,并作简要评价.直接分光光度法.最适pH7.4,Km4~7×10^(-5)mol/L,适用于层析液中酶活性的检测.PK-LDH 偶联法和PK-HK-G6PD 偶联法均适用于血清烯醇化酶活性的测定.前者工具酶较少,空白反应低,精密度较好,更适用于常规工作.30名健康人血清烯醇化酶总活性为17.7±7.75U/L。 展开更多
关键词 烯醇化酶 活性测定
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基质效应 被引量:27
2
作者 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第U08期112-115,共4页
关键词 基质效应 临床化学分析 检验医学
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神经元特异烯醇化酶的纯化方法
3
作者 王毓三 陈江华 +2 位作者 马莹 赵建华 唐美德 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期179-181,共3页
从牛脑制备NSE纯品.纯化步骤依次为硫酸铵分级沉淀,DEAE—Sephacel离子交换层析,Sephacryl—s—300凝胶过滤层析和DEAE—Sephadex A—50离子交换层析,所得NSE 纯品,PAGE呈单一区带,SDS—PAGE 亚基分子量46KD,IEF—PAGE pI 4.7~4.9,同... 从牛脑制备NSE纯品.纯化步骤依次为硫酸铵分级沉淀,DEAE—Sephacel离子交换层析,Sephacryl—s—300凝胶过滤层析和DEAE—Sephadex A—50离子交换层析,所得NSE 纯品,PAGE呈单一区带,SDS—PAGE 亚基分子量46KD,IEF—PAGE pI 4.7~4.9,同工酶电泳仅显示γγ酶活性区带,酶比活性30.1 U/mg 蛋白,得率38.6%. 展开更多
关键词 烯醇化酶 神经元细胞 纯化
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《临床检验杂志》创建过程的回忆
4
作者 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期732-733,共2页
《临床检验杂志》走过了30年的历程,现已成为中国科技论文统计源期刊,中国科学引文数据库医学类核心期刊,中国临床医学、特种医学核心期刊和中国学术期刊综合评价数据库来源期刊以及中国生物医学核心期刊,中国期刊网、中国学术期刊光盘... 《临床检验杂志》走过了30年的历程,现已成为中国科技论文统计源期刊,中国科学引文数据库医学类核心期刊,中国临床医学、特种医学核心期刊和中国学术期刊综合评价数据库来源期刊以及中国生物医学核心期刊,中国期刊网、中国学术期刊光盘版全文收录期刊等。作为"双效期刊",2001年进入全国期刊方阵,2005年成为国家期刊奖百种重点期刊,在学术地位上列于国内同类检验杂志的前列。受到我国广大检验工作者的欢迎和好评。 展开更多
关键词 临床检验杂志 创刊 回顾 纪念
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血清结合胆红素酶法测定在自动生化分析仪上的应用 被引量:3
5
作者 赵建华 蒋胜高 +1 位作者 罗浔阳 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期419-422,共4页
目的 建立酶法测定血清结合胆红素的全自动分析方法 ,并在肝胆疾病患者中临床应用。方法 通过试剂的合理组合 ,分析参数和操作程序的设定 ,建立结合胆红素 (CB)的全自动分析方法 ,同时对总胆红素进行自动化酶法测定。结果 酶法CB测... 目的 建立酶法测定血清结合胆红素的全自动分析方法 ,并在肝胆疾病患者中临床应用。方法 通过试剂的合理组合 ,分析参数和操作程序的设定 ,建立结合胆红素 (CB)的全自动分析方法 ,同时对总胆红素进行自动化酶法测定。结果 酶法CB测定 :精密度 ,批内n =2 0 , x =6 .4 8μmol/L ,s=0 .11,CV =1.7%和n =2 0 , x =77.9μmol/L ,s=0 .4 2 ,CV =0 .5 3% ;批间n =10 , x =9.4 6 μmol/L ,s=0 .17,CV =1.83%和n =10 , x =5 9.7μmol/L ,s=1.4 3,CV =2 .39% ;线性范围至少可达 340 μmol/L ;比对实验 :与Beckman重氮法试剂 (在BeckmanCX7型生化分析仪上 )比较 ,Y(酶法 ) =0 .75 9X1- 2 .82、r =0 .991,与IagnosticumRT重氮法试剂 (日立 76 0 0 0 2 0型分析仪 )比较 ,Y =0 .84 1X2 - 4 .39、r=0 .96 3。临床研究显示 :与重氮法直接胆红素值相比 ,本法测定CB值能够更灵敏地反映黄疸患者的胆红素分泌功能。结论 建立的CB全自动分析方法具有良好的分析特性 ,可在临床推广应用。 展开更多
关键词 结合胆红素 酶法测定 自动生化分析仪 重氮法 黄疸
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血浆血红蛋白的分光光度法直接测定 被引量:8
6
作者 程梅 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期286-288,共3页
用分光光度计直接测定血浆血红蛋白浓度,操作简单,试剂单一稳定,具有较好的精密度和准确度,批内变异为CV1.8%(X=78.6mg/L),CV0.79%(X=774.6mg/L),批间变异为CV5.08%(X=67.7... 用分光光度计直接测定血浆血红蛋白浓度,操作简单,试剂单一稳定,具有较好的精密度和准确度,批内变异为CV1.8%(X=78.6mg/L),CV0.79%(X=774.6mg/L),批间变异为CV5.08%(X=67.75mg/L),CV3.37%(X=404.9mg/L),线性范围至少可达2000mg/L。本法与HICN法及Crosby法平行对比测定,显示三者结果具有良好的一致性。 展开更多
关键词 血红蛋白 血浆 分光光度法
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醛缩酶同工酶琼脂糖电泳测定法 被引量:4
7
作者 赵建华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期9-12,共4页
建立分离血清醛缩酶同工酶的方法。利用不连续缓冲体系琼脂糖凝胶电泳进行分离,ALD-GLAPD酶偶联反应与PMS-四唑盐递氢呈色系统来显示酶活性区带。20名健康成人血清醛缩酶同工酶电泳,结果显示两条清晰的酶活性区带AL... 建立分离血清醛缩酶同工酶的方法。利用不连续缓冲体系琼脂糖凝胶电泳进行分离,ALD-GLAPD酶偶联反应与PMS-四唑盐递氢呈色系统来显示酶活性区带。20名健康成人血清醛缩酶同工酶电泳,结果显示两条清晰的酶活性区带ALD-A和ALD-B;同时,实验条件的研究也显示:在pH8.2、终末反应物浓度FDP7mmol/L、NAD5mg/L和GLAPD3U/L时区带显色最佳。该方法简便、可靠、对临床肝癌及肝硬化的诊断有一定的辅助价值。 展开更多
关键词 醛缩酶同工酶 电泳 琼脂糖凝胶 血清 肝癌 肝硬化
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3-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性 被引量:5
8
作者 陈江华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期287-290,共4页
探讨用3-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶(ALD)活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度:TEA100mmol/L,FDP4mmol/L,碘乙酸0.22mmol/L,NADH0.26mmol/L,GDH≥100... 探讨用3-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶(ALD)活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度:TEA100mmol/L,FDP4mmol/L,碘乙酸0.22mmol/L,NADH0.26mmol/L,GDH≥1000U/L,TPI≥1500U/L,LD≥1000U/L。最适pH在7.8~8.0,Km为7.2×10-3mmol/L。批内CV:酶活性在7.34U/L和65.06U/L时,CV分别为5.7%和1.4%;批间CV:酶活性在11.89U/L和100.08U/L时,CV分别为6.0%和3.3%,酶活性线性范围至少可达180U/L。健康人60名,ALD活性为4.53±1.17(x±s)U/L,男女两组均值无显著性差异。本文对TEA-HCl(pH8.0)、Tris-HCl(pH8.0)和Colidine-HCl(pH7.5)三种缓冲液用于ALD活性测定效果进行了评价,结果表明在TEA缓冲液中所测ALD活性最高;TEA和Colidine两种缓冲液的浓度在25~150mmol/L范围内对ALD活性无影响,Tris缓冲液在50mmol/L时测得酶活性较高,缓冲液浓度过高或过低。 展开更多
关键词 血清 醛缩酶 酶偶联法 磷酸甘油脱氢酶
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血清游离轻链测定中应考虑的问题 被引量:3
9
作者 武建国 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期165-167,共3页
关键词 血清 游离轻链 测定 问题 免疫球蛋白轻链 多发性骨髓瘤
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改革开放30年医学检验专业的发展与反思 被引量:3
10
作者 武建国 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-2,共2页
关键词 医学检验 改革开放 发展
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以N-甲基葡胺为磷酸化受体测定血清碱性磷酸酶的实验探讨 被引量:1
11
作者 蒋胜高 王波 +1 位作者 王毓三 赵建华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期271-273,共3页
目的评估以N-甲基葡胺作为磷酸化受体缓冲液测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性的方法。方法通过对试剂的合理组合和实验条件的优选,建立基于N-甲基葡胺的血清ALP测定方法,并与基于其他缓冲液的推荐方法进行对比。结果精密度,批内:CV=0... 目的评估以N-甲基葡胺作为磷酸化受体缓冲液测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性的方法。方法通过对试剂的合理组合和实验条件的优选,建立基于N-甲基葡胺的血清ALP测定方法,并与基于其他缓冲液的推荐方法进行对比。结果精密度,批内:CV=0.62%,批间:CV=2.3%;线性范围至少可达到2073U/L;分别与以2-氨基-2-甲基-1.丙醇(AMP,X1)和二乙醇胺(DEA,X2)为磷酸化受体的ALP测定法比较:Y=1.29X1+13.25,r=0.999;Y=0.65X2+19.19,r=0.998。健康成人参考区间为44~133U/L[(80.33±20.97)U/L]。结论N-甲基葡胺可替代AMP或DEA作为磷酸化受体缓冲液用于临床血清ALP活性的常规测定。 展开更多
关键词 血清 碱性磷酸酶 N-甲基葡胺
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3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性 被引量:1
12
作者 陈江华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期280-282,共3页
建立血清醛缩酶活性的3磷酸甘油醛脱氢酶偶联测定法。用底物1, 6二磷酸果糖启动酶促反应, 连续监测NADH生成速率。反应条件: 温度37°C, pH 83, 各反应物的终末浓度: 三乙醇胺50 m m ol/L, 1,... 建立血清醛缩酶活性的3磷酸甘油醛脱氢酶偶联测定法。用底物1, 6二磷酸果糖启动酶促反应, 连续监测NADH生成速率。反应条件: 温度37°C, pH 83, 各反应物的终末浓度: 三乙醇胺50 m m ol/L, 1, 6二磷酸果糖45 m m ol/L, 砷酸钠10 m m ol/L,氧化型辅酶Ⅰ6 m m ol/L,3磷酸甘油醛脱氢酶2500U/L,磷酸丙糖异构酶500 U/L,乳酸脱氢酶1500U/L,血清与试剂容积比0043。参考值x= 676 U/L, s= 103 U/L, 本法 (Y) 与3磷酸甘油脱氢酶偶联法 (X) 相关性: Y=08X+ 36, r= 09931。 展开更多
关键词 醛缩酶 酶偶联法 血清诊断 GLAPD
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血清无机磷的酶法测定
13
作者 潘秋荣 赵建华 +1 位作者 陈江华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期152-153,共2页
建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法。方法线性范围为0~3mmol/L,变异系数批内x=1.03mmol/L,n=20,CV=1.21%;批间:x=1.28mmol/L,n=20,CV=3.7%。与钼酸铵紫外光度法相... 建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法。方法线性范围为0~3mmol/L,变异系数批内x=1.03mmol/L,n=20,CV=1.21%;批间:x=1.28mmol/L,n=20,CV=3.7%。与钼酸铵紫外光度法相关性为:r=0.9942,Y=0.9509X+0.0541。参考值范围为0.98~1.55mmol/L。 展开更多
关键词 无机磷 酶偶联法 血清诊断
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血清结合胆红素的酶法测定 被引量:6
14
作者 许国荣 赵建华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期325-327,共3页
目的 建立用胆红素氧化酶 (BOD)作为催化剂 ,选择性地测定血清结合胆红素 (CB)的新方法。方法 测定条件为 :0 1mol/L甘氨酸缓冲液、pH 10 0 ,BOD活性 0 5~ 0 8U/反应管 ,反应时间 2分钟。结果 线性至少可达到 2 2 0 μmol/L ;... 目的 建立用胆红素氧化酶 (BOD)作为催化剂 ,选择性地测定血清结合胆红素 (CB)的新方法。方法 测定条件为 :0 1mol/L甘氨酸缓冲液、pH 10 0 ,BOD活性 0 5~ 0 8U/反应管 ,反应时间 2分钟。结果 线性至少可达到 2 2 0 μmol/L ;精密度为批内CV 1 71~ 3 98%、批间CV 8 0~ 9 72 % ;正常参考值范围为 0~ 3 14μmol/L ;与偶氮法所测结果相关性较好。结论 本文所建立的CB测定方法具有良好的分析特异性 。 展开更多
关键词 胆红素 胆红素氧化酶 胆汁郁积 BOD
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血清γ-谷氨酰移换酶连续监测法 被引量:2
15
作者 贺福如 许斌 +1 位作者 王毓三 蒋胜高 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期5-6,共2页
本文参照IFCC推荐的GGT测定参考方法,用γ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(Glu CANA)作供体底物,对连续监测法的实验条件进行了探讨。Glu CANA 水溶性好,非酶水解程度小,试剂稳定,易保存.应用RSM 对GGT 的最适测定条件进行分析,确定Glu CAN... 本文参照IFCC推荐的GGT测定参考方法,用γ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺(Glu CANA)作供体底物,对连续监测法的实验条件进行了探讨。Glu CANA 水溶性好,非酶水解程度小,试剂稳定,易保存.应用RSM 对GGT 的最适测定条件进行分析,确定Glu CANA(A)和双甘肽(B)的最适浓度分别为6mmol/L 和150mmol/L。最适pH7.90(30℃).K_m^A=0.73mmol/L.K_m^B=16.2mmol/L。5-氨基-2-硝基苯甲酸ε_(410nm)=791.66m^2·mol^(-1).实验表明,100mmol/L Tris 对GGT 活性有轻度抑制.OCV=1.72~3.1%,RCV=2.85~4.43%。酶活性在460U/L 内呈线性关系.132名健康成人血清GGT 结果(x±S,30℃)男性(n=70)为16.94±7.9U/L。女性(n=62)为11.57±6.88U/L。男女两组均值差异显著. 展开更多
关键词 GGT 生物化学 检验 血清
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神经元特异烯醇化酶琼脂糖电泳测定方法 被引量:3
16
作者 龚正华 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期58-60,共3页
本法用琼脂糖凝胶电泳分离烯醇化酶同工酶,利用PK-HK-G6PD 醇偶联艮应系统,显示酶活性区带.经先密度计扫描,报告NSE 区带的百分含量.对各反应物的最佳浓度、最适pH、检测精密度进行了实验探讨.58名健康人血清烯醇化醇同工酶电泳,αα似... 本法用琼脂糖凝胶电泳分离烯醇化酶同工酶,利用PK-HK-G6PD 醇偶联艮应系统,显示酶活性区带.经先密度计扫描,报告NSE 区带的百分含量.对各反应物的最佳浓度、最适pH、检测精密度进行了实验探讨.58名健康人血清烯醇化醇同工酶电泳,αα似型占88±5.8%。αr型占11.7±5.7%。未检出rr 型区带.初步临床应用表明肺小细胞癌、肺腺癌患者,血清NSE 区带检出率约50%. 展开更多
关键词 烯醇化酶 NSE 琼脂糠电泳 测定
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离子选择电极法检测HiCN试剂中CN^—浓度 被引量:2
17
作者 贺福如 王毓三 蒋胜高 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期299-300,共2页
本文应用氰离子选择电极建立一种简便、快速检测HiCN试剂中CN-浓度的方法,通过HiCN试剂中CN-电位测定与Hb测定转化反应后吸收光谱曲线的对比分析,证实试剂存放后Hb结果降低是CN-浓度下降所致。应用电极法定期监... 本文应用氰离子选择电极建立一种简便、快速检测HiCN试剂中CN-浓度的方法,通过HiCN试剂中CN-电位测定与Hb测定转化反应后吸收光谱曲线的对比分析,证实试剂存放后Hb结果降低是CN-浓度下降所致。应用电极法定期监测CN-浓度是提高Hb测定准确性的有效措施之一。 展开更多
关键词 离子选择电极 氰离子 氰化高铁血红蛋白
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神经元特异烯醇化酶单克隆抗体的制备
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作者 赵建华 王毓三 +2 位作者 陈江华 季坤元 陈育英 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期182-184,共3页
用NSE粗制品免疫雌性BALB/C小鼠,经免疫小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞SP 2/0的融合,ELISA法筛选,建立了四株持续分泌抗NSE单抗的杂交瘤细胞。免疫沉淀法,单抗素和柱纯化抗原鉴定等方法证实所分泌单抗对NSE 具有良好的特异性,注入同系小鼠腹... 用NSE粗制品免疫雌性BALB/C小鼠,经免疫小鼠脾细胞和鼠骨髓瘤细胞SP 2/0的融合,ELISA法筛选,建立了四株持续分泌抗NSE单抗的杂交瘤细胞。免疫沉淀法,单抗素和柱纯化抗原鉴定等方法证实所分泌单抗对NSE 具有良好的特异性,注入同系小鼠腹腔可诱生含较高效价的抗NSE的腹水。这四株细胞分泌IgG_1亚类抗体、且检查其染色体数目均大于90条。 展开更多
关键词 烯醇化酶 神经元细胞 单克隆抗体
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血清葡萄糖的葡萄糖脱氢酶测定法 被引量:8
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作者 梁志超 刘敏 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期20-21,共2页
血清葡萄糖的葡萄糖脱氢酶测定法梁志超,刘敏,王毓三(江苏省肿瘤医院检验科,南京210009)关键词葡萄糖,葡萄糖脱氢酶,血清早在1975年,人们制备了高纯度的细菌葡萄糖脱氢酶(Glucosedehydrogenase... 血清葡萄糖的葡萄糖脱氢酶测定法梁志超,刘敏,王毓三(江苏省肿瘤医院检验科,南京210009)关键词葡萄糖,葡萄糖脱氢酶,血清早在1975年,人们制备了高纯度的细菌葡萄糖脱氢酶(Glucosedehydrogenase,下称GDH),从而推出一种具有高... 展开更多
关键词 葡萄糖 葡萄糖脱氢酶 血清
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套式聚合酶链反应检测HTLV-I DNA方法的建立与初步应用 被引量:1
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作者 孟钵 谈维 +4 位作者 孙启俊 柯苑 袁红 赵进生 王毓三 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期270-272,共3页
目的 建立一种简便、快速的人类嗜T -淋巴细胞病毒Ⅰ型 (HTLV I)DNA检测方法并用于标本检测。方法 采用快速法制备DNA模板 ,以HTLV Ⅰ基因组pX区特定片段为靶基因 ,设计并合成引物 ,建立套式聚合酶链 (PCR)检测方法。结果 用该法检... 目的 建立一种简便、快速的人类嗜T -淋巴细胞病毒Ⅰ型 (HTLV I)DNA检测方法并用于标本检测。方法 采用快速法制备DNA模板 ,以HTLV Ⅰ基因组pX区特定片段为靶基因 ,设计并合成引物 ,建立套式聚合酶链 (PCR)检测方法。结果 用该法检测献血者标本 10 0 9例 ,阳性 16例 ;检测经明胶颗粒凝集试验 (PA)呈抗 HTLV Ⅰ阳性标本 36例 ,阳性 12例 ;检测已知HTLV ⅠDNA阳性标本 10例 ,结果均阳性。结论 该法具有快速、简便、特异性好等优点 ,具有推广应用价值。 展开更多
关键词 套式PCR 血清诊断 HTLV-I-DNA RNA病毒
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