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福氏志贺菌主动外排基因acrA的克隆及原核表达 被引量:2
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作者 王松泰 张继瑜 +3 位作者 魏小娟 付元芳 曹小安 邱昌庆 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期933-936,共4页
目的对福氏志贺菌外排基因acrA进行克隆和原核表达,为进一步研究其在志贺菌外排机制中的作用奠定基础。方法参考福氏志贺菌2aacrA基因序列设计一对特异引物,在引物的5′和3′端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点序列。以福氏志贺... 目的对福氏志贺菌外排基因acrA进行克隆和原核表达,为进一步研究其在志贺菌外排机制中的作用奠定基础。方法参考福氏志贺菌2aacrA基因序列设计一对特异引物,在引物的5′和3′端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点序列。以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增acrA基因并与pMD18-T载体连接,然后转化DH5α。提取重组质粒pMD18-acrA,经BamHI/SalI双酶切并与载体pET30a连接后转化宿主菌BL21(DE3)pLys,通过IPTG诱导表达目的蛋白。结果克隆的acrA基因长度为1122bp,核苷酸序列与GenBank上公布的序列完全相同。原核表达经SDS-PAGE及WesternBlotting检测和鉴定,结果表明重组载体pET-30a-acrA可成功地在大肠杆菌中表达AcrA蛋白。结论成功构建了福氏志贺菌acrA基因的原核表达质粒,并在大肠杆菌中得到有效表达,该研究为了解AcrA蛋白的特性、功能以及对福氏志贺菌多药耐药机理的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 福氏志贺菌 acrA基因 克隆 原核表达
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萃淋树脂在有色金属分离中的研究和应用 被引量:9
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作者 王松泰 谈定生 刘书祯 《中国有色冶金》 北大核心 2008年第1期27-30,共4页
对萃淋树脂在稀有金属、责金属和重金属等有色金属分离和提纯中的研究及应用进行了综述。萃淋树脂分离法是一种具有高选择性、多级高效性、操作简便、环境友好的分离技术,为解决稀贵金属由于分布散、含量低、性质相似、价态易变而难以... 对萃淋树脂在稀有金属、责金属和重金属等有色金属分离和提纯中的研究及应用进行了综述。萃淋树脂分离法是一种具有高选择性、多级高效性、操作简便、环境友好的分离技术,为解决稀贵金属由于分布散、含量低、性质相似、价态易变而难以分离的问题开拓了一条新途径。 展开更多
关键词 萃淋树脂 有色金属 分离
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影响铝合金轮毂电镀层内应力的工艺研究 被引量:1
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作者 王松泰 陈磊 +1 位作者 谈定生 戚飞鹏 《电镀与精饰》 CAS 2008年第3期13-15,共3页
研究了铝合金材料多层电镀过程中的镀层内应力变化,结果表明半光亮镍镀层内应力增加最显著。而半光亮镍镀层内应力随镀液pH、阴极电流密度和氯离子质量浓度的增加而增大,随温度的升高而减小,由此提出了降低铝合金轮毂电镀层内应力的措施。
关键词 铝合金 轮毂 电镀工艺 内应力
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福氏志贺菌主动外排基因acrB的克隆与序列分析
4
作者 王松泰 张继瑜 +3 位作者 魏小娟 付元芳 曹小安 邱昌庆 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第6期6-8,24,共4页
以福氏志贺菌2a型菌株基因组为模板,经PCR扩增得acrB基因,将该基因克隆到pMD18-T Vector载体,将重组质粒进行PCR和酶切鉴定及序列测定.结果表明:测定序列与Genbank收录的福氏志贺菌参考序列同源性为99.7%,与大肠杆菌的acrB基因... 以福氏志贺菌2a型菌株基因组为模板,经PCR扩增得acrB基因,将该基因克隆到pMD18-T Vector载体,将重组质粒进行PCR和酶切鉴定及序列测定.结果表明:测定序列与Genbank收录的福氏志贺菌参考序列同源性为99.7%,与大肠杆菌的acrB基因序列比较分析,序列同源性在98%~99%之间,说明志贺菌主动外排基因acrB在碱基序列和编码的氨基酸序列上均与大肠杆菌有很高的同源性,它可能是志贺菌引起多重耐药的主要原因. 展开更多
关键词 志贺菌 acrB基因 克隆 序列分析
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志贺菌耐药性研究进展 被引量:1
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作者 牛建荣 张继瑜 +6 位作者 魏小娟 王松泰 李剑勇 周绪正 吴培星 胡振英 李金善 《动物医学进展》 CSCD 2008年第1期73-76,共4页
概述了致病性志贺菌的分类,对家畜及人类造成的危害,临床多重耐药性严重状况。从分子生物学角度介绍了志贺菌主要耐药性acrAB-tolC主动外排系统的作用特点及耐药性相关药物外输蛋白marA、acrA、acrB,基因hdeA、tolB、tol A、tol Q等研... 概述了致病性志贺菌的分类,对家畜及人类造成的危害,临床多重耐药性严重状况。从分子生物学角度介绍了志贺菌主要耐药性acrAB-tolC主动外排系统的作用特点及耐药性相关药物外输蛋白marA、acrA、acrB,基因hdeA、tolB、tol A、tol Q等研究进展,并阐述了克服志贺菌耐药性的对策。 展开更多
关键词 志贺菌 耐药性 acrAB—tolC主动外排系统 基因 外输送蛋白
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福氏志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体构建及其鉴定 被引量:1
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作者 魏小娟 张继瑜 +5 位作者 王松泰 牛建荣 李剑勇 周旭正 吴培星 李金善 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第11期26-28,共3页
目的构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定。方法采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-marA,重组子经... 目的构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定。方法采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-marA,重组子经限制性内切酶分析、PCR及测序鉴定后,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定。结果经鉴定证实原核表达载体pET-30a-marA构建成功,且在大肠杆菌BL21中获得了MarA与His的融合表达,且表达蛋白产物的分子质量大小与预期值一致,并可被特异性抗体所识别。结论MarA在大肠杆菌中获得了高效的表达,为进一步研究其免疫学特性和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 志贺菌 marA 原核表达
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志贺菌耐药性的分子机制
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作者 魏小娟 张继瑜 +4 位作者 李剑勇 周绪正 牛建荣 李金善 王松泰 《畜牧兽医杂志》 2008年第3期34-35,共2页
随着抗菌药物的广泛应用,耐药及多重耐药细菌已经严重威胁着人类和动物的健康。志贺菌的耐药机制主要是产生灭活酶、细胞壁的改变、主动外排以及作用靶位结构的改变。本文对其耐药机制的研究进展作简要综述。
关键词 志贺菌 耐药性 分子机制
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兰州市城关区犬弓形虫病流行情况血清学调查与分析 被引量:2
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作者 宋世斌 王松泰 +2 位作者 何强 朱永军 敬淑燕 《畜牧兽医杂志》 2015年第3期86-88,共3页
为研究兰州市城关区犬弓形虫病的流行情况,本试验采用宠物用弓形虫抗体快速检测卡和/或弓形虫间接血凝试验(IHA),对城关区3家宠物诊所就诊犬和兰州市流浪动物救助站流浪犬共计439只进行检测分析.结果表明:3家宠物诊所就诊犬感染率分... 为研究兰州市城关区犬弓形虫病的流行情况,本试验采用宠物用弓形虫抗体快速检测卡和/或弓形虫间接血凝试验(IHA),对城关区3家宠物诊所就诊犬和兰州市流浪动物救助站流浪犬共计439只进行检测分析.结果表明:3家宠物诊所就诊犬感染率分别为7.1%、6.9%、6.5%,均低于平均感染率7.5%,流浪动物救助站流浪犬感染率较高,为10.2%;犬弓形虫的感染率随着年龄的增长也在增加,调查中<1岁犬感染率3.2%,1~3岁和3~6岁年龄段分别为5.6%和6.0%,>6岁犬感染率11.34%;但不同性别犬对弓形虫的感染差异不显著. 展开更多
关键词 城关区 弓形虫 血清学分析
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