旨在揭示猪睾丸支持细胞对急性热应激的代谢应答。本研究于急性热应激前(Control组)、急性热应激(43℃,0.5 h)刚结束(HS0.5组)和急性热应激后恢复36 h(HS0.5-R36组)收集猪睾丸支持细胞(每组3个重复)进行液相质谱(LC-MS/MS)检测,ELISA验...旨在揭示猪睾丸支持细胞对急性热应激的代谢应答。本研究于急性热应激前(Control组)、急性热应激(43℃,0.5 h)刚结束(HS0.5组)和急性热应激后恢复36 h(HS0.5-R36组)收集猪睾丸支持细胞(每组3个重复)进行液相质谱(LC-MS/MS)检测,ELISA验证差异代谢物。通过CCK-8、EdU和Annexin V FITC/PI试剂盒检测关键差异代谢物对猪睾丸支持细胞的细胞活力、细胞增殖和细胞凋亡效应。利用ROS、RH123和Mito Tracker染色检测细胞ROS水平、线粒体分布与线粒体膜电位情况。结果,急性热应激前后(HS0.5 vs. Control)、恢复36 h相对急性热应激刚结束(HS0.5-R36 vs. HS0.5)、恢复36 h相对急性热应激前(HS0.5-R36 vs. Control)分别诱导33个、57个和115个显著差异(P<0.05;VIP>1.00)二级代谢物。通路富集分析显示,显著差异代谢物主要参与牛磺酸和亚牛磺酸代谢等通路。ELISA验证结果显示,急性热应激显著降低牛磺酸和γ-氨基丁酸水平,与代谢组检测的变化趋势一致。HS0.5-R36 vs. Control牛磺酸下降约5.7μmol·L^(-1),而添加5.7μmol·L^(-1)牛磺酸处理猪睾丸支持细胞48 h显著增加细胞存活率、促进增殖、抑制凋亡和增强线粒体功能(P<0.05)。急性热应激显著改变猪睾丸支持细胞的代谢,显著降低的牛磺酸部分介导了急性热应激对猪睾丸支持细胞的功能损伤。本研究结果为猪睾丸支持细胞热应激损伤拯救提供了新的参考。展开更多
文摘旨在揭示猪睾丸支持细胞对急性热应激的代谢应答。本研究于急性热应激前(Control组)、急性热应激(43℃,0.5 h)刚结束(HS0.5组)和急性热应激后恢复36 h(HS0.5-R36组)收集猪睾丸支持细胞(每组3个重复)进行液相质谱(LC-MS/MS)检测,ELISA验证差异代谢物。通过CCK-8、EdU和Annexin V FITC/PI试剂盒检测关键差异代谢物对猪睾丸支持细胞的细胞活力、细胞增殖和细胞凋亡效应。利用ROS、RH123和Mito Tracker染色检测细胞ROS水平、线粒体分布与线粒体膜电位情况。结果,急性热应激前后(HS0.5 vs. Control)、恢复36 h相对急性热应激刚结束(HS0.5-R36 vs. HS0.5)、恢复36 h相对急性热应激前(HS0.5-R36 vs. Control)分别诱导33个、57个和115个显著差异(P<0.05;VIP>1.00)二级代谢物。通路富集分析显示,显著差异代谢物主要参与牛磺酸和亚牛磺酸代谢等通路。ELISA验证结果显示,急性热应激显著降低牛磺酸和γ-氨基丁酸水平,与代谢组检测的变化趋势一致。HS0.5-R36 vs. Control牛磺酸下降约5.7μmol·L^(-1),而添加5.7μmol·L^(-1)牛磺酸处理猪睾丸支持细胞48 h显著增加细胞存活率、促进增殖、抑制凋亡和增强线粒体功能(P<0.05)。急性热应激显著改变猪睾丸支持细胞的代谢,显著降低的牛磺酸部分介导了急性热应激对猪睾丸支持细胞的功能损伤。本研究结果为猪睾丸支持细胞热应激损伤拯救提供了新的参考。