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F_1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究
被引量:
2
1
作者
王守栋
房国锋
+3 位作者
曾勇庆
陈伟
李川皓
王延东
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期16-24,共9页
为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性。本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪。对繁殖得到的F1代个体进行PCR、...
为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性。本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪。对繁殖得到的F1代个体进行PCR、荧光定量PCR及Western blot检测,对屠宰的4头阳性猪采用绝对定量PCR进行转基因拷贝数鉴定,F1代个体达100kg左右时抽样屠宰进行肉质及抗氧化性能测定。结果表明,F1代阳性率为30.23%。阳性组CuZnSOD在5种组织中的RNA和蛋白水平上的表达量较阴性组均上调。本试验得到的标准曲线:ΔCt=-3.121 6lgN+17.281(R2=0.992 1,P<0.001),4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为25.89、80.61、106.69、83.03。肉质及抗氧化性能测定结果显示,阳性组肌肉滴水损失显著低于阴性组(P<0.05);阳性组肌肉T-SOD1d、T-SOD2d活性显著高于阴性组,MDA1d、MDA2d含量显著低于阴性组(P<0.05)。研究结果表明:CuZnSOD基因的过表达可以提高肌肉的抗氧化性能,降低滴水损失,进而改善肉质,同时,证明磁性纳米颗粒介导的精子载体法可以用于制备转基因动物。
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关键词
CUZNSOD
磁性纳米颗粒
转基因猪
肉质
抗氧化性能
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职称材料
母猪繁殖障碍的原因分析及综合防制
被引量:
18
2
作者
王守栋
肖建森
+3 位作者
曾勇庆
陈冰
田洪强
张自广
《养猪》
2013年第2期45-48,共4页
当前,母猪繁殖障碍在规模化猪场普遍存在,已成为影响养猪生产经济效益的重要因素之一。引起母猪繁殖障碍的原因错综复杂,有非传染性因素和传染性疾病因素,有些是由单一因素所引发,而更多的则是多种因素所引发,只有采取综合性防制措施,...
当前,母猪繁殖障碍在规模化猪场普遍存在,已成为影响养猪生产经济效益的重要因素之一。引起母猪繁殖障碍的原因错综复杂,有非传染性因素和传染性疾病因素,有些是由单一因素所引发,而更多的则是多种因素所引发,只有采取综合性防制措施,才能使母猪繁殖障碍得到有效控制,从根本上提高规模化养猪的经济效益。本文在分析引起母猪繁殖障碍原因的基础上,提出其综合防制的技术措施。
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关键词
母猪
繁殖障碍
非传染性因素
传染性因素
综合防制
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职称材料
春季养猪生产中存在的问题及饲养管理技术措施
被引量:
6
3
作者
王守栋
相伟
曾勇庆
《猪业科学》
2014年第3期102-104,共3页
春季是养猪生产的最佳季节,同时也是猪流行性疾病的高发季节,此阶段气温多变、各种病原微生物大量孽生繁殖、猪体免疫能力较弱,如果饲养管理不当,猪只容易患上各种传染性疾病,严重影响种猪的繁殖与商品猪的生长发育。扼要总结了春季养...
春季是养猪生产的最佳季节,同时也是猪流行性疾病的高发季节,此阶段气温多变、各种病原微生物大量孽生繁殖、猪体免疫能力较弱,如果饲养管理不当,猪只容易患上各种传染性疾病,严重影响种猪的繁殖与商品猪的生长发育。扼要总结了春季养猪生产中存在的问题,并提出一些饲养管理技术措施,旨在为广大养殖场(户)提供技术参考。
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关键词
春季
养猪技术
存在问题
饲养管理
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职称材料
对历史上土地集中的再评价
被引量:
1
4
作者
王守栋
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007年第25期8006-8007,8020,共3页
对历史上几个典型时期的土地集中进行了再评价,重点探讨了土地集中和经济发展的关系,最后结合当前的农村改革进行了一定反思。
关键词
土地
集中
经济
发展
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职称材料
大学新生“磨合期”问题刍议
被引量:
1
5
作者
王守栋
《继续教育研究》
北大核心
2009年第4期61-62,共2页
由于当前中学教育和大学教育存在的客观差异,大学新生入校后普遍面临着学习、生活等各个方面的转型,需要一定时间的"磨合",才能适应大学生活。"磨合期"对学生来说即是对适应能力的锻炼,也是对心理承受力的一种考验...
由于当前中学教育和大学教育存在的客观差异,大学新生入校后普遍面临着学习、生活等各个方面的转型,需要一定时间的"磨合",才能适应大学生活。"磨合期"对学生来说即是对适应能力的锻炼,也是对心理承受力的一种考验。适应能力较弱的学生,"磨合期"较长,且极易出现心理问题,这就需要老师的关爱与诱导,帮助这些学生安全度过"磨合期"。
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关键词
大学新生
磨合
适应
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职称材料
RNA干扰沉默PID1基因肉兔模型的构建
被引量:
5
6
作者
徐正刚
杨伦
+5 位作者
曾勇庆
张哲
陈伟
杨云
房国锋
王守栋
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期750-756,共7页
为进一步研究PID1基因的功能,本试验在前期构建并筛选得到的高效PID1RNA干扰表达载体pGPU6/GFP/Neo-PID1-2的基础上,利用精子介导法制备RNA干扰PID1转基因肉兔模型。对繁殖的F1代肉兔个体进行活体荧光检测、PCR、RT-PCR和Western blot检...
为进一步研究PID1基因的功能,本试验在前期构建并筛选得到的高效PID1RNA干扰表达载体pGPU6/GFP/Neo-PID1-2的基础上,利用精子介导法制备RNA干扰PID1转基因肉兔模型。对繁殖的F1代肉兔个体进行活体荧光检测、PCR、RT-PCR和Western blot检测,并对不同组别(阳性组、阴性组和空白对照组)体重达3.0kg左右的F1代肉兔抽样屠宰进行肌内脂肪的测定。研究结果表明:外源基因和绿色荧光蛋白基因(GFP)在转基因兔后代中可成功表达,试验组得到F1代个体106只,其中阳性兔7只,转基因阳性率为6.60%。PID1基因RNAi阳性兔与阴性兔、空白对照兔相比,RT-PCR检测PID1基因mRNA表达量显著降低(P<0.05),Western blot测得PID1蛋白表达水平呈下降趋势,肌内脂肪的含量显著降低(P<0.05);综上表明,PID1基因与肌内脂肪沉积密切相关。本研究从RNAi肉兔模型构建的角度进一步验证了PID1基因对肌内脂肪沉积影响的功能,也为下一步研究制备高肌内脂肪优质PID1转基因猪奠定了基础。
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关键词
新西兰肉兔
PID1基因
RNA干扰
肌内脂肪
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职称材料
猪神经元蛋白3.1基因3'侧翼区多聚腺苷酸数目多态性及其与肉质性状的关系
7
作者
杨云
曾勇庆
+4 位作者
张哲
徐正刚
陈伟
房国锋
王守栋
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期237-244,共8页
选取54头莱芜猪和40头鲁莱黑猪,宰后测定肉质性状,利用聚合酶链反应及单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)技术检测其神经元蛋白3.1(neuronal protein 3.1,P311)基因3'侧...
选取54头莱芜猪和40头鲁莱黑猪,宰后测定肉质性状,利用聚合酶链反应及单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)技术检测其神经元蛋白3.1(neuronal protein 3.1,P311)基因3'侧翼区2个多聚腺苷酸(poly A)结构的长度多态性,测序确定连续腺苷酸的数目,并与肉质性状进行关联分析,以期发现有效多态位点.结果表明:1)在莱芜猪和鲁莱黑猪中共检测出2个连续腺苷酸数目的多态位点poly A-L1和poly A-L2,两者的poly A数目分别为18、15和15、12,2个位点的3种基因型分别记为poly A-L1位点的MM型、NN型和MN型,以及poly A-L2位点的BB型、DD型和BD型;这2个多态位点在莱芜猪和鲁莱黑猪群体中均处于哈代-温伯格平衡(P>0.05),其多态性在2个猪种间的分布差异在统计学上均不显著.2)莱芜猪poly A-L1位点的3种基因型之间在肉质性状上均未表现出统计学上的显著差异,但MN型个体各项肉质性状普遍优于2个纯合型,肉质较好,鲁莱黑猪中的结果与此相同.3)莱芜猪poly A-L2位点的3种基因型之间在肉质性状上均未表现出统计学上的显著差异,但鲁莱黑猪在该位点处的失水率和烹饪损失指标在统计学上差异显著,其中DD型个体的失水率显著高于BD型个体,BB型和DD型个体的烹饪损失显著高于BD型,其余各指标的基因型间在统计学上差异不显著.总之,在这2个位点处普遍表现为杂合型的肉质性状优于纯合型,生产中应重视2个纯合型个体间的杂交利用,以产生更多肉质优良的杂合型个体.
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关键词
猪
神经元蛋白3.1基因
3′侧翼区
多态性
肉质性状
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职称材料
题名
F_1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究
被引量:
2
1
作者
王守栋
房国锋
曾勇庆
陈伟
李川皓
王延东
机构
山东农业大学动物科技学院
山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期16-24,共9页
基金
国家转基因重大专项(2013ZX08006-002
2011ZX08006-002)
+1 种基金
山东省现代农业(生猪)产业技术体系建设专项(SDAIT-06-022-03)
山东省农业良种工程重大课题(2013LZ02-015)
文摘
为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性。本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪。对繁殖得到的F1代个体进行PCR、荧光定量PCR及Western blot检测,对屠宰的4头阳性猪采用绝对定量PCR进行转基因拷贝数鉴定,F1代个体达100kg左右时抽样屠宰进行肉质及抗氧化性能测定。结果表明,F1代阳性率为30.23%。阳性组CuZnSOD在5种组织中的RNA和蛋白水平上的表达量较阴性组均上调。本试验得到的标准曲线:ΔCt=-3.121 6lgN+17.281(R2=0.992 1,P<0.001),4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为25.89、80.61、106.69、83.03。肉质及抗氧化性能测定结果显示,阳性组肌肉滴水损失显著低于阴性组(P<0.05);阳性组肌肉T-SOD1d、T-SOD2d活性显著高于阴性组,MDA1d、MDA2d含量显著低于阴性组(P<0.05)。研究结果表明:CuZnSOD基因的过表达可以提高肌肉的抗氧化性能,降低滴水损失,进而改善肉质,同时,证明磁性纳米颗粒介导的精子载体法可以用于制备转基因动物。
关键词
CUZNSOD
磁性纳米颗粒
转基因猪
肉质
抗氧化性能
Keywords
CuZnSOD
magnetic nanoparticles
transgenic pigs
meat quality
antioxidant properties
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
母猪繁殖障碍的原因分析及综合防制
被引量:
18
2
作者
王守栋
肖建森
曾勇庆
陈冰
田洪强
张自广
机构
山东农业大学动物科技学院
山东德州神牛药业有限公司
出处
《养猪》
2013年第2期45-48,共4页
基金
山东省现代农业产业技术体系生猪创新团队建设专项和山东省农业良种工程重大课题(2010LZ013-03)资助
文摘
当前,母猪繁殖障碍在规模化猪场普遍存在,已成为影响养猪生产经济效益的重要因素之一。引起母猪繁殖障碍的原因错综复杂,有非传染性因素和传染性疾病因素,有些是由单一因素所引发,而更多的则是多种因素所引发,只有采取综合性防制措施,才能使母猪繁殖障碍得到有效控制,从根本上提高规模化养猪的经济效益。本文在分析引起母猪繁殖障碍原因的基础上,提出其综合防制的技术措施。
关键词
母猪
繁殖障碍
非传染性因素
传染性因素
综合防制
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
春季养猪生产中存在的问题及饲养管理技术措施
被引量:
6
3
作者
王守栋
相伟
曾勇庆
机构
山东农业大学动物科技学院
山东省泗水县大黄沟乡兽医站
出处
《猪业科学》
2014年第3期102-104,共3页
基金
山东省现代农业(生猪)产业技术体系建设专项(SDAIT-06-011-02)
山东省农业良种工程重大项目(2011LZ013-03)资助
文摘
春季是养猪生产的最佳季节,同时也是猪流行性疾病的高发季节,此阶段气温多变、各种病原微生物大量孽生繁殖、猪体免疫能力较弱,如果饲养管理不当,猪只容易患上各种传染性疾病,严重影响种猪的繁殖与商品猪的生长发育。扼要总结了春季养猪生产中存在的问题,并提出一些饲养管理技术措施,旨在为广大养殖场(户)提供技术参考。
关键词
春季
养猪技术
存在问题
饲养管理
分类号
S828.4 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
对历史上土地集中的再评价
被引量:
1
4
作者
王守栋
机构
德州学院历史系
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007年第25期8006-8007,8020,共3页
文摘
对历史上几个典型时期的土地集中进行了再评价,重点探讨了土地集中和经济发展的关系,最后结合当前的农村改革进行了一定反思。
关键词
土地
集中
经济
发展
Keywords
Land
Concentration
Economy
Development
分类号
F329 [经济管理—产业经济]
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职称材料
题名
大学新生“磨合期”问题刍议
被引量:
1
5
作者
王守栋
机构
德州学院历史系
出处
《继续教育研究》
北大核心
2009年第4期61-62,共2页
文摘
由于当前中学教育和大学教育存在的客观差异,大学新生入校后普遍面临着学习、生活等各个方面的转型,需要一定时间的"磨合",才能适应大学生活。"磨合期"对学生来说即是对适应能力的锻炼,也是对心理承受力的一种考验。适应能力较弱的学生,"磨合期"较长,且极易出现心理问题,这就需要老师的关爱与诱导,帮助这些学生安全度过"磨合期"。
关键词
大学新生
磨合
适应
分类号
G645.5 [文化科学—高等教育学]
I04 [文学—文学理论]
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职称材料
题名
RNA干扰沉默PID1基因肉兔模型的构建
被引量:
5
6
作者
徐正刚
杨伦
曾勇庆
张哲
陈伟
杨云
房国锋
王守栋
机构
山东农业大学动物科技学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期750-756,共7页
基金
国家转基因重大专项(2011ZX08006-002
2013ZX08006-002)
+2 种基金
国家高技术研究发展计划(863计划)重点项目(2008AA101008)
山东省现代农业(生猪)产业技术体系建设专项(SDAIT-06-011-02)
山东省农业良种工程重大项目(2011LZ013-03)
文摘
为进一步研究PID1基因的功能,本试验在前期构建并筛选得到的高效PID1RNA干扰表达载体pGPU6/GFP/Neo-PID1-2的基础上,利用精子介导法制备RNA干扰PID1转基因肉兔模型。对繁殖的F1代肉兔个体进行活体荧光检测、PCR、RT-PCR和Western blot检测,并对不同组别(阳性组、阴性组和空白对照组)体重达3.0kg左右的F1代肉兔抽样屠宰进行肌内脂肪的测定。研究结果表明:外源基因和绿色荧光蛋白基因(GFP)在转基因兔后代中可成功表达,试验组得到F1代个体106只,其中阳性兔7只,转基因阳性率为6.60%。PID1基因RNAi阳性兔与阴性兔、空白对照兔相比,RT-PCR检测PID1基因mRNA表达量显著降低(P<0.05),Western blot测得PID1蛋白表达水平呈下降趋势,肌内脂肪的含量显著降低(P<0.05);综上表明,PID1基因与肌内脂肪沉积密切相关。本研究从RNAi肉兔模型构建的角度进一步验证了PID1基因对肌内脂肪沉积影响的功能,也为下一步研究制备高肌内脂肪优质PID1转基因猪奠定了基础。
关键词
新西兰肉兔
PID1基因
RNA干扰
肌内脂肪
Keywords
New Zealand rabbit
PID1gene
RNA interference
intramuscular fat
分类号
S829.1 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
猪神经元蛋白3.1基因3'侧翼区多聚腺苷酸数目多态性及其与肉质性状的关系
7
作者
杨云
曾勇庆
张哲
徐正刚
陈伟
房国锋
王守栋
机构
山东农业大学动物科技学院
出处
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期237-244,共8页
基金
国家转基因重大专项(2011ZX08006-002
2013ZX08006-002)
+2 种基金
国家高技术研究发展计划(863计划)重点项目(2008AA101008)
山东省农业良种工程重大项目(2013LZ02-015)
山东省现代农业(生猪)产业技术体系建设专项(SDAIT-06-022-02)
文摘
选取54头莱芜猪和40头鲁莱黑猪,宰后测定肉质性状,利用聚合酶链反应及单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)技术检测其神经元蛋白3.1(neuronal protein 3.1,P311)基因3'侧翼区2个多聚腺苷酸(poly A)结构的长度多态性,测序确定连续腺苷酸的数目,并与肉质性状进行关联分析,以期发现有效多态位点.结果表明:1)在莱芜猪和鲁莱黑猪中共检测出2个连续腺苷酸数目的多态位点poly A-L1和poly A-L2,两者的poly A数目分别为18、15和15、12,2个位点的3种基因型分别记为poly A-L1位点的MM型、NN型和MN型,以及poly A-L2位点的BB型、DD型和BD型;这2个多态位点在莱芜猪和鲁莱黑猪群体中均处于哈代-温伯格平衡(P>0.05),其多态性在2个猪种间的分布差异在统计学上均不显著.2)莱芜猪poly A-L1位点的3种基因型之间在肉质性状上均未表现出统计学上的显著差异,但MN型个体各项肉质性状普遍优于2个纯合型,肉质较好,鲁莱黑猪中的结果与此相同.3)莱芜猪poly A-L2位点的3种基因型之间在肉质性状上均未表现出统计学上的显著差异,但鲁莱黑猪在该位点处的失水率和烹饪损失指标在统计学上差异显著,其中DD型个体的失水率显著高于BD型个体,BB型和DD型个体的烹饪损失显著高于BD型,其余各指标的基因型间在统计学上差异不显著.总之,在这2个位点处普遍表现为杂合型的肉质性状优于纯合型,生产中应重视2个纯合型个体间的杂交利用,以产生更多肉质优良的杂合型个体.
关键词
猪
神经元蛋白3.1基因
3′侧翼区
多态性
肉质性状
Keywords
pig
neuronal protein 3 .1 gene
3′flanking region
polymorphisms
meat traits
分类号
S828.8 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
F_1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究
王守栋
房国锋
曾勇庆
陈伟
李川皓
王延东
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
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职称材料
2
母猪繁殖障碍的原因分析及综合防制
王守栋
肖建森
曾勇庆
陈冰
田洪强
张自广
《养猪》
2013
18
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职称材料
3
春季养猪生产中存在的问题及饲养管理技术措施
王守栋
相伟
曾勇庆
《猪业科学》
2014
6
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职称材料
4
对历史上土地集中的再评价
王守栋
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2007
1
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职称材料
5
大学新生“磨合期”问题刍议
王守栋
《继续教育研究》
北大核心
2009
1
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职称材料
6
RNA干扰沉默PID1基因肉兔模型的构建
徐正刚
杨伦
曾勇庆
张哲
陈伟
杨云
房国锋
王守栋
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
5
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职称材料
7
猪神经元蛋白3.1基因3'侧翼区多聚腺苷酸数目多态性及其与肉质性状的关系
杨云
曾勇庆
张哲
徐正刚
陈伟
房国锋
王守栋
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015
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