期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
1
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑猪
被引量：
1
1
作者
王娇祥
范柠粼
+5 位作者
施德佳
陈姝含
王璐璐
李莲军
李鸿辉
魏红江
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期811-819,825,共10页
【目的】建立快速筛选猪的基因编辑阳性成纤维细胞系的方法以提高利用体细胞核移植产生基因编辑克隆猪的效率。【方法】通过PCR、T7EN1酶切和Sanger测序分析不同数量的已知猪基因编辑阳性细胞(20、50、100、150和200个细胞)的基因型,确...
【目的】建立快速筛选猪的基因编辑阳性成纤维细胞系的方法以提高利用体细胞核移植产生基因编辑克隆猪的效率。【方法】通过PCR、T7EN1酶切和Sanger测序分析不同数量的已知猪基因编辑阳性细胞(20、50、100、150和200个细胞)的基因型,确定最小细胞数用于鉴定未知的基因编辑阳性细胞系以证明该方法的可行性。【结果】除20细胞组外,其他所有细胞组中均扩增出2条明显的T7EN1酶切条带(175和555 bp)。定量数据显示:20细胞组和50细胞组之间的条带灰度值存在极显著差异(P<0.01),因此50细胞可用于基因编辑阳性细胞系鉴定。利用CRISPR/Cas9系统构建IPO13打靶载体,转染猪胎儿成纤维细胞形成细胞克隆点后计数50个细胞来筛选阳性细胞系,再通过体细胞核移植快速生产了IPO13敲除猪,从而证实通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑猪的可行性。筛选基因编辑阳性细胞系的一般方法大约需要33.7 d,新建立的方法细胞筛选周期仅为18.9 d(减少15 d),获得阳性细胞系的成功率也提高了约4倍。【结论】本研究建立了一种通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑克隆猪的方法,该方法可行可靠。
展开更多
关键词
猪
基因编辑
细胞筛选
体细胞核移植
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑猪
被引量：
1
1
作者
王娇祥
范柠粼
施德佳
陈姝含
王璐璐
李莲军
李鸿辉
魏红江
机构
云南省动物基因编辑与体细胞克隆技术重点实验室
云南省异种器官移植工程研究中心
云南农业大学动物医学院
云南农业大学动物科学技术学院
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期811-819,825,共10页
基金
国家重点研发计划(2019YFA0110700)
云南省生物医药重大研发平台构建(2019ZF018)
云南省院士(专家)工作站(2018IC064)。
文摘
【目的】建立快速筛选猪的基因编辑阳性成纤维细胞系的方法以提高利用体细胞核移植产生基因编辑克隆猪的效率。【方法】通过PCR、T7EN1酶切和Sanger测序分析不同数量的已知猪基因编辑阳性细胞(20、50、100、150和200个细胞)的基因型,确定最小细胞数用于鉴定未知的基因编辑阳性细胞系以证明该方法的可行性。【结果】除20细胞组外,其他所有细胞组中均扩增出2条明显的T7EN1酶切条带(175和555 bp)。定量数据显示:20细胞组和50细胞组之间的条带灰度值存在极显著差异(P<0.01),因此50细胞可用于基因编辑阳性细胞系鉴定。利用CRISPR/Cas9系统构建IPO13打靶载体,转染猪胎儿成纤维细胞形成细胞克隆点后计数50个细胞来筛选阳性细胞系,再通过体细胞核移植快速生产了IPO13敲除猪,从而证实通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑猪的可行性。筛选基因编辑阳性细胞系的一般方法大约需要33.7 d,新建立的方法细胞筛选周期仅为18.9 d(减少15 d),获得阳性细胞系的成功率也提高了约4倍。【结论】本研究建立了一种通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑克隆猪的方法,该方法可行可靠。
关键词
猪
基因编辑
细胞筛选
体细胞核移植
Keywords
pig
gene-editing
cell selection
somatic cell nuclear transfer
分类号
S828.1 [农业科学—畜牧学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
通过微量细胞鉴定快速生产基因编辑猪
王娇祥
范柠粼
施德佳
陈姝含
王璐璐
李莲军
李鸿辉
魏红江
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
