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多重连接探针扩增-高分辨熔解法鉴别鸡血藤及其常见混伪品
1
作者
王咏懿
莫静
+3 位作者
王文斌
程华春
李小芳
汪波
《医药导报》
CAS
北大核心
2023年第3期334-339,共6页
目的采用分子生物学技术鉴别鸡血藤及其常见3种混伪品。方法根据4个物种核基因组内转录间隔区2(ITS2)序列差异设计特异性探针,结合运用多重连接探针扩增(MLPA)技术与高分辨熔解(HRM)曲线技术,根据特异性探针熔解温度(T m)差异鉴别鸡血...
目的采用分子生物学技术鉴别鸡血藤及其常见3种混伪品。方法根据4个物种核基因组内转录间隔区2(ITS2)序列差异设计特异性探针,结合运用多重连接探针扩增(MLPA)技术与高分辨熔解(HRM)曲线技术,根据特异性探针熔解温度(T m)差异鉴别鸡血藤及其常见混伪品大血藤、白花油麻藤、香花鸡血藤。结果4个物种特异性探针T m值分别为:鸡血藤(87.0±0.2)℃、大血藤(82.8±0.2)℃、白花油麻藤(85.4±0.2)℃、香花鸡血藤(80.1±0.2)℃。探针特异性考察中,交叉反应与空白组均未产生熔解峰,表明探针具有良好特异性。构建的方法可用于1.0 ng模板DNA的检测,并可有效检出鸡血藤中掺混5%大血藤、白花油麻藤或香花鸡血藤。结论基于MLPA-HRM技术建立的鸡血藤及其混伪品鉴别方法灵敏度高,特异性强,稳定性好,可有效解决市场上鸡血藤药材植物来源复杂、混伪品难以鉴别的问题。
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关键词
鸡血藤
混伪品
多重连接探针扩增技术
高分辨熔解曲线
鉴别
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题名
多重连接探针扩增-高分辨熔解法鉴别鸡血藤及其常见混伪品
1
作者
王咏懿
莫静
王文斌
程华春
李小芳
汪波
机构
中国药科大学药学院
湖北省药品监督检验研究院
湖北大学生命科学学院
湖北中医药大学药学院
国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室
出处
《医药导报》
CAS
北大核心
2023年第3期334-339,共6页
基金
湖北省青年拔尖人才培养计划
湖北中药质控标准物质研制及技术平台的建立(2020ACA007)
中国食品药品检定研究院项目(TCM2021-YJ11)。
文摘
目的采用分子生物学技术鉴别鸡血藤及其常见3种混伪品。方法根据4个物种核基因组内转录间隔区2(ITS2)序列差异设计特异性探针,结合运用多重连接探针扩增(MLPA)技术与高分辨熔解(HRM)曲线技术,根据特异性探针熔解温度(T m)差异鉴别鸡血藤及其常见混伪品大血藤、白花油麻藤、香花鸡血藤。结果4个物种特异性探针T m值分别为:鸡血藤(87.0±0.2)℃、大血藤(82.8±0.2)℃、白花油麻藤(85.4±0.2)℃、香花鸡血藤(80.1±0.2)℃。探针特异性考察中,交叉反应与空白组均未产生熔解峰,表明探针具有良好特异性。构建的方法可用于1.0 ng模板DNA的检测,并可有效检出鸡血藤中掺混5%大血藤、白花油麻藤或香花鸡血藤。结论基于MLPA-HRM技术建立的鸡血藤及其混伪品鉴别方法灵敏度高,特异性强,稳定性好,可有效解决市场上鸡血藤药材植物来源复杂、混伪品难以鉴别的问题。
关键词
鸡血藤
混伪品
多重连接探针扩增技术
高分辨熔解曲线
鉴别
Keywords
Spatholobus suberectus
Adulterants
Multiplex ligation-dependent probe amplification
High-resolution melting curve
Identification
分类号
R286 [医药卫生—中药学]
R927.1 [医药卫生—药学]
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作者
出处
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1
多重连接探针扩增-高分辨熔解法鉴别鸡血藤及其常见混伪品
王咏懿
莫静
王文斌
程华春
李小芳
汪波
《医药导报》
CAS
北大核心
2023
0
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