高效薄层色谱法评价合成寡核苷酸的质量 被引量：5

1

作者 王升启 马立人 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期146-148,共3页

由于各种因素的影响,DNA合成仪合成的每批寡核苷酸的质量难以得到绝对保证,低质量的产品将影响以后的分析结果,因此需要一个有效的方法来评价每批产品的质量。目前主要依靠聚丙烯酰胺凝胶电泳法来实现以上目的。高效液相色谱法及毛细管... 由于各种因素的影响,DNA合成仪合成的每批寡核苷酸的质量难以得到绝对保证,低质量的产品将影响以后的分析结果,因此需要一个有效的方法来评价每批产品的质量。目前主要依靠聚丙烯酰胺凝胶电泳法来实现以上目的。高效液相色谱法及毛细管电泳法也偶见使用。但这些方法均有一定的不足,如需特殊的仪器设备、操作繁琐费时等。本文介绍一种操作简便、分析速度快、无需特殊仪器设备且分析结果可靠的方法——高效薄层色谱法(HPTLC)。 展开更多

关键词 高效薄层色谱 寡核苷酸 质量评价

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毛细管凝胶电泳法测定血浆中的癌泰得 被引量：9

2

作者 张嵬 杨秉呼 +3 位作者 梁乾德 鲁丹丹 林汝仙 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期374-377,共4页

为了进行硫代反义寡核苷酸药物癌泰得的药代动力学研究,建立了毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的方法.样品经强阴离子交换柱除去血浆中的蛋白和油脂,通过反相C18柱脱盐,再通过渗滤膜除去残留盐分后,以长度为24个碱基的寡核苷酸作为... 为了进行硫代反义寡核苷酸药物癌泰得的药代动力学研究,建立了毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的方法.样品经强阴离子交换柱除去血浆中的蛋白和油脂,通过反相C18柱脱盐,再通过渗滤膜除去残留盐分后,以长度为24个碱基的寡核苷酸作为内标,采用毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得的含量.结果表明,毛细管凝胶电泳测定血浆中癌泰得含量的线性范围为12.5～400 mg/L(r=0.999 8),日内、日间的相对标准偏差分别为0.398% ～2.46% 、2.75% ～6.07% ,回收率为99.53% ～102.1% .毛细管凝胶电泳法用于血浆中反义硫代寡核苷酸的含量测定具有良好的准确性、稳定性和重现性. 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 反义寡核苷酸 癌泰得 药代动力学

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毛细管凝胶电泳法测定硫代寡核苷酸药物癌泰得的含量 被引量：10

3

作者 杨秉呼 孙偶君 +1 位作者 张敏丽 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期202-205,共4页

癌泰得为20碱基的抑制端粒酶催化亚基hTERT的硫代反义寡核苷酸,体内、体外抗肿瘤活性评价显示其有较好的抗肿瘤活性。采用固相合成仪分别制备了癌泰得及与其碱基百分组成基本相同的硫代寡核苷酸内标,并使用制备型阴离子交换色谱和反相... 癌泰得为20碱基的抑制端粒酶催化亚基hTERT的硫代反义寡核苷酸,体内、体外抗肿瘤活性评价显示其有较好的抗肿瘤活性。采用固相合成仪分别制备了癌泰得及与其碱基百分组成基本相同的硫代寡核苷酸内标,并使用制备型阴离子交换色谱和反相高效液相色谱进行纯化。采用毛细管凝胶电泳仪和单链DNA分离试剂盒测定了癌泰得的含量。所用毛细管规格为内径100μm,总长31cm,有效长度20cm;电动进样,进样电压-10kV,进样时间1s;分离电压-12 4kV;柱体温度40℃;样品储存温度为30℃;缓冲溶液为pH8 5的Tris 硼酸盐 7mol/L尿素缓冲液;紫外检测,波长为254nm。结果表明,在12 5～800mg/L时呈现良好的线性关系(r=0 99997);最低检测限为0 220mg/L;日内、日间的相对标准偏差(RSD)分别为0 449%～1 89%和1 01%～1 48%;低、中、高3种浓度的平均回收率为96 95%,RSD为6.88%。说明毛细管凝胶电泳内标法用于反义硫代寡核苷酸的含量测定结果准确、可靠。 展开更多

关键词 毛细管凝胶电泳 癌泰得 反义硫代寡核苷酸 药物

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无胶筛分毛细管电泳法测定猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得 被引量：4

4

作者 王秀中 王清清 +4 位作者 王诗鸿 李卫平 宋海峰 鲁丹丹 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期561-565,共5页

采用两步固相萃取(SPE)法结合无胶筛分毛细管电泳(NGCE)技术建立了猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得的定量分析方法。优化并确定了SPE的相关条件(阴离子交换柱,上样缓冲液pH值为9.0,上样体积及洗脱体积分别为5mL和3mL)和NGCE的分析条... 采用两步固相萃取(SPE)法结合无胶筛分毛细管电泳(NGCE)技术建立了猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得的定量分析方法。优化并确定了SPE的相关条件(阴离子交换柱,上样缓冲液pH值为9.0,上样体积及洗脱体积分别为5mL和3mL)和NGCE的分析条件(灌胶时间为30min,分离电压为24kV)。在优化的条件下,猕猴血浆中癌泰得在1.95～250mg/L范围内呈良好的线性关系,定量限(LOQ)为1.95mg/L。批内准确度为93.38%～100.71%,批内相对标准偏差<11%;批间准确度为89.46%～103.46%,批间相对标准偏差<9%。在不同条件(室温下存放4h;4℃下存放24h;反复冻融(-80℃至室温)2次;-80℃下保存1个月)下癌泰得在猕猴血浆中的稳定性良好。已将该方法成功地应用于癌泰得的猕猴药代动力学研究。 展开更多

关键词 固相萃取 无胶筛分毛细管电泳 反义寡核苷酸 癌泰得 猕猴

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基因芯片技术研究进展 被引量：13

5

作者 邹宗亮 王志清 王升启 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第5期95-98,94,共5页

基因芯片是近年出现的一种高通量、快速、平行核酸序列测定及定量分析技术。它是将大量特定序列的核酸片段有序地固定在载体上 ,与标记核酸分子进行杂交 ,检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的组成及数量 ,目前广泛应用于疾病的基... 基因芯片是近年出现的一种高通量、快速、平行核酸序列测定及定量分析技术。它是将大量特定序列的核酸片段有序地固定在载体上 ,与标记核酸分子进行杂交 ,检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的组成及数量 ,目前广泛应用于疾病的基因诊断、基因表达研究、基因组研究、药物筛选等领域 ,影响着生命科学许多领域的研究方法与途径。本文讨论了基因芯片技术应用的最近进展及存在的问题。 展开更多

关键词 基因芯片 生命科学 DNA 进展

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聚合酶链式反应微流控芯片的准分子激光制备和应用研究 被引量：5

6

作者 姚李英 祁恒 +5 位作者 陈涛 文思远 伯晓晨 陈苏红 王升启 左铁钏 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期428-431,共4页

采用价格便宜的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)代替价格昂贵的硅或玻璃作为聚合酶链式反应(PCR)微流控芯片的基片材料,采用柔性大且自动化程度高的准分子激光微加工方法代替加工工艺复杂的光刻化学腐蚀方法,在19kV和18mm/min的优化加工参数下,... 采用价格便宜的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)代替价格昂贵的硅或玻璃作为聚合酶链式反应(PCR)微流控芯片的基片材料,采用柔性大且自动化程度高的准分子激光微加工方法代替加工工艺复杂的光刻化学腐蚀方法,在19kV和18mm/min的优化加工参数下,在48mm×67mm×1mm的PMMA基片上制备出20个循环的PCR微流控芯片.芯片微通道横截面呈梯形,底面光滑.微通道宽104μm,深56μm,长2060mm,加工耗时约110min.该芯片和相同尺寸的盖片在160N和105℃条件下通过热压经20min键合在一起,键合强度为0.85MPa.键合后的芯片和温控系统集成在一起,采用比例积分微分(PID)方法得到的控温精度为±0.2℃,采用红外热像仪得到的相邻温区间的温度梯度分别为16.5和22.2℃,最后利用该芯片在对170bp的DNA片段实现了体外扩增. 展开更多

关键词 PMMA PCR微流控芯片 准分子激光

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细胞周期调控与细胞抗辐射能力 被引量：12

7

作者 代金明 林汝仙 王升启 《辐射研究与辐射工艺学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期262-265,共4页

电离辐射作用后的细胞能够启动多种信号通路,用于维持基因组的完整性。其中细胞周期调控是决定细胞抗辐射能力的一个重要因素。由电离辐射诱导的DNA损伤能最终使细胞周期产生暂时的阻滞,以利于一部分DNA损伤得到修复;或者产生不可逆的... 电离辐射作用后的细胞能够启动多种信号通路,用于维持基因组的完整性。其中细胞周期调控是决定细胞抗辐射能力的一个重要因素。由电离辐射诱导的DNA损伤能最终使细胞周期产生暂时的阻滞,以利于一部分DNA损伤得到修复;或者产生不可逆的细胞周期阻滞,使细胞走向凋亡或坏死。因此,恰当的细胞周期阻滞会给DNA损伤修复提供一定的时间,从而有利于细胞生存。对该领域的深入研究,将会为研制辐射增敏剂和辐射防护剂提供一种新的思路。 展开更多

关键词 电离辐射 细胞周期 抗辐射能力 检查点

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激光制备PMMA基PCR微流控芯片的热压键合研究 被引量：5

8

作者 姚李英 张瑜 +2 位作者 陈涛 王升启 左铁钏 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期75-77,共3页

MEMS技术的发展,使得PCR微流控芯片的制备成为了现实。本文采用波长248nm的准分子激光作为一种新型的微加工方法,在19KV电压和18mm/min的激光优化加工参数下,在40mm×63mm的PMMA基片上制备出了20个循环的PCR微流控芯片。芯片上微通... MEMS技术的发展,使得PCR微流控芯片的制备成为了现实。本文采用波长248nm的准分子激光作为一种新型的微加工方法,在19KV电压和18mm/min的激光优化加工参数下,在40mm×63mm的PMMA基片上制备出了20个循环的PCR微流控芯片。芯片上微通道的宽为104μm,深为56μm,长为1040mm,芯片加工耗时57分钟。随后采用自己搭建的热压装置,定量讨论了热压键合的温度、压力和时间对芯片键合质量的影响,得出了PMMA基微流控芯片热压键合的最佳参数:95℃,160N,20min。并在该条件下成功地将PMMA基的20个循环的PCR微流控芯片和相同尺寸的盖片键合在一起,键合后的芯片具有良好的密封性,能够承受的最大压强为0.85Mpa,能满足进行PCR反应的要求。 展开更多

关键词 准分子激光 高聚物 热压键合 PCR技术

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应用寡核苷酸芯片检测猪口蹄疫病毒的初步研究 被引量：7

9

作者 杨林 张桂红 +2 位作者 钟植文 廖明 王升启 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第12期97-100,共4页

本研究根据口蹄疫病毒(FM DV)基因组序列保守区,设计合成2对引物,通过RT-PCR方法筛选出特异引物,用Cy3标记下游引物5′端;针对这个基因片段,设计合成4条寡核苷酸探针,开展靶基因扩增和克隆、阳性质粒构建、芯片杂交与反应条件优化以及... 本研究根据口蹄疫病毒(FM DV)基因组序列保守区,设计合成2对引物,通过RT-PCR方法筛选出特异引物,用Cy3标记下游引物5′端;针对这个基因片段,设计合成4条寡核苷酸探针,开展靶基因扩增和克隆、阳性质粒构建、芯片杂交与反应条件优化以及芯片灵敏度和特异性分析等试验研究,建立FM DV的基因芯片检测方法,同时应用该芯片检测了现地标本39份,证明该芯片的灵敏度高、特异性好,可以准确检测出猪口蹄疫病毒,为建立猪病基因芯片诊断技术平台奠定基础。 展开更多

关键词 猪 口蹄疫病毒 寡核苷酸芯片

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百合病毒检测技术研究进展 被引量：9

10

作者 贾慧 王进忠 +4 位作者 陈忠斌 王升启 董金皋 赵祥云 张民照 《北京农学院学报》 2004年第4期73-76,共4页

笔者对百合病毒的检测技术作了综合评述,主要有植株直接观测法、指示植物接种鉴定法、电镜技术、血清学检测和分子生物学检测技术等,综合应用各项技术使检测更加灵敏、可靠。目前,常用的检测以血清学技术的ELISA为主、分子生物学技术的R... 笔者对百合病毒的检测技术作了综合评述,主要有植株直接观测法、指示植物接种鉴定法、电镜技术、血清学检测和分子生物学检测技术等,综合应用各项技术使检测更加灵敏、可靠。目前,常用的检测以血清学技术的ELISA为主、分子生物学技术的RT PCR为主。基因芯片检测技术是近几年发展起来高效的检测手段并在植物病毒检测上有广泛的应用前景。 展开更多

关键词 百合 病毒 检测技术 血清学检测 分子生物学检测 基因芯片

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PCR产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 被引量：2

11

作者 郑晓飞 王升启 +2 位作者 邢瑞云 朱宝珍 孙志贤 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期104-104,共1页

ＰＣＲ产物检测方法的灵敏度对临床诊断结果有较大的影响。我们对端粒酶催化亚基蛋白质（ｈＴＲＴ）ｍＲＮＡ［１］的ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物琼脂糖凝胶电泳ＥＢ染色法和聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法进行比较，以期在ＰＣＲ检测方面引起重视... ＰＣＲ产物检测方法的灵敏度对临床诊断结果有较大的影响。我们对端粒酶催化亚基蛋白质（ｈＴＲＴ）ｍＲＮＡ［１］的ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物琼脂糖凝胶电泳ＥＢ染色法和聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法进行比较，以期在ＰＣＲ检测方面引起重视。１材料和方法１．１材料ＨＬ－６０... 展开更多

关键词 聚合酶链反应 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 端粒酶

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肺癌诊断基因的初步筛选 被引量：3

12

作者 范保星 笪冀平 +4 位作者 张开泰 谢玲 项小琼 王升启 吴德昌 《循证医学》 CSCD 2002年第2期75-79,共5页

目的 筛选肺癌细胞恶性转化不同时期差异表达的基因,以期用于肺癌的诊断。方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)、测序、cDNA芯片(cDNA Microarry)、northern blot。结果 利用SSH建立了永生化人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化不同时期差异表... 目的 筛选肺癌细胞恶性转化不同时期差异表达的基因,以期用于肺癌的诊断。方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)、测序、cDNA芯片(cDNA Microarry)、northern blot。结果 利用SSH建立了永生化人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化不同时期差异表达基因的cDNA文库,其中,A消减文库(BEP2D细胞的cDNA为tester,α粒子照射BEP2D细胞后35代恶性转化细胞R15Hp35的cDNA为driver)有416个克隆,B消减文库(α粒子照射BEP2D细胞后20代转化细胞R15Hp20的cDNA为tester,BEP2D和R15Hp35细胞的cDNA混合后为driver)有301个克隆,C消减文库(R15Hp35细胞的cDNA为tester,BEP2D细胞的cDNA为driver)有586个克隆。对文库中107个克隆单向测序发现:19个克隆在GenBank中没有查到对应的同源序列,其它88个克隆共代表了76个不同的已知基因。然后,将3个文库中全部克隆的cDNA制作成cDNA芯片,用该芯片筛选了15例肺癌组织、5例肺癌旁组织和其他8种癌组织(肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、白血病、子宫内膜癌、脑神经角质瘤和结肠癌)中mRNA的表达差异。结果,获得肺癌组织高于肺癌旁组织表达的cDNA 26个,肺癌旁组织高于肺癌组织表达的31个,2者高于其他8种癌组织的分别为:肺癌旁组织中63个,肺癌组织中87个。将这208个具较大差异表达的基因重新制作成cDNA芯片, 展开更多

关键词 肺癌 诊断 基因 CDNA芯片 BEP2D细胞

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胃癌端粒酶活性及端粒酶hTRT表达的研究 被引量：2

13

作者 徐萍 厉有名 +2 位作者 王开明 王升启 郑晓飞 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2000年第2期70-72,81,共4页

目的 :探讨端粒酶活性及端粒酶hTRT表达在胃癌发生及发展中的作用。方法 :分别采用TRAP银染法和RT PCR法对胃粘膜端粒酶活性及端粒酶hTRTmRNA进行检测。结果 :胃癌组织端粒酶阳性率为 1 0 0 % (8/8) ,胃癌前状态组织端粒酶阳性率为 40 %... 目的 :探讨端粒酶活性及端粒酶hTRT表达在胃癌发生及发展中的作用。方法 :分别采用TRAP银染法和RT PCR法对胃粘膜端粒酶活性及端粒酶hTRTmRNA进行检测。结果 :胃癌组织端粒酶阳性率为 1 0 0 % (8/8) ,胃癌前状态组织端粒酶阳性率为 40 % (4/1 0 ) ,浅表性胃炎均为阴性 (0 /9)。胃癌组织hTRTmRNA阳性率为 85 .7% (6/7) ,浅表性胃炎均为阴性 (0 /5 )。结论 :端粒酶激活参与胃癌的形成和发展 ,可能有助于胃癌的早期诊断。胃粘膜端粒酶hTRT表达水平可能反映端粒酶存在和活化的程度。 展开更多

关键词 端粒酶 HTRT基因 基因表达 胃肿瘤

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微生物检测基因芯片探针的遗传优化设计 被引量：1

14

作者 刘国传 白志军 +4 位作者 舒文杰 伯晓晨 王升启 陆琳 汪嘉甬 《中国医疗器械杂志》 CAS 2008年第2期89-92,共4页

基于粗糙集理论评估SNP位点组合的分类能力,采用遗传算法进行优化搜索,提出了一种SNP位点的自动选择方法。实验结果表明,该方法具有很好的稳健性和较快的收敛速度,能够准确地寻找微生物的SNP位点组合,为大规模的检测芯片探针自动设计提... 基于粗糙集理论评估SNP位点组合的分类能力,采用遗传算法进行优化搜索,提出了一种SNP位点的自动选择方法。实验结果表明,该方法具有很好的稳健性和较快的收敛速度,能够准确地寻找微生物的SNP位点组合,为大规模的检测芯片探针自动设计提供了快速可靠的途径。 展开更多

关键词 基因芯片 探针设计 遗传算法 粗糙集

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靶向MDM2反义寡核苷酸增强肺癌细胞A549的辐射敏感性

15

作者 郭万峰 林汝仙 +1 位作者 郭国祯 王升启 《辐射研究与辐射工艺学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期307-311,共5页

放射治疗在肺癌的治疗中起着重要的作用。然而,提高肺癌的治愈率是一个重要的课题。MDM2基因在肿瘤的形成和增殖过程中起着重要的作用,可能是一个重要的靶基因。本研究自行设计了针对MDM2的反义核酸药物,通过RT-PCR和Westernblotting检... 放射治疗在肺癌的治疗中起着重要的作用。然而,提高肺癌的治愈率是一个重要的课题。MDM2基因在肿瘤的形成和增殖过程中起着重要的作用,可能是一个重要的靶基因。本研究自行设计了针对MDM2的反义核酸药物,通过RT-PCR和Westernblotting检测其抑制效率,然后通过流式细胞仪观察转染细胞受5Gy照射后的细胞死亡情况,MTT观察细胞照射后的增殖能力。结果发现通过反义治疗的策略成功降低了MDM2在肺癌细胞中A549中的表达,这导致了A549细胞辐射敏感性的增加。表明MDM2参与了A549的辐射抗性的形成,靶向MDM2的反义寡核苷酸可以增强肺癌细胞A549的辐射敏感性。 展开更多

关键词 肺癌细胞A549 辐射敏感性 反义寡核苷酸 MDM2基因

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探针杂交捕获法检测丙型肝炎病毒核糖核酸

16

作者 李向阳 金嵘 +1 位作者 李东 王升启 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期310-310,共1页

探针杂交捕获法检测丙型肝炎病毒核糖核酸李向阳金嵘李东（温州医学院检验系，浙江温州３２５００３）王升启（军事医学科学院二所）关键词聚合酶链反应丙型肝炎病毒探针丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是ＲＮＡ病毒，引起人类的丙型病毒性肝炎... 探针杂交捕获法检测丙型肝炎病毒核糖核酸李向阳金嵘李东（温州医学院检验系，浙江温州３２５００３）王升启（军事医学科学院二所）关键词聚合酶链反应丙型肝炎病毒探针丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是ＲＮＡ病毒，引起人类的丙型病毒性肝炎。由于感染后的抗－ＨＣＶ产生缓慢，... 展开更多

关键词 聚合酶链反应 丙型肝炎病毒 探针 RNA

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PCR检测泪液中乙肝病毒DNA

17

作者 孙殿兴 耿云琴 +3 位作者 王法印 孙晓燕 胡荣 王升启 《眼科新进展》 CAS 北大核心 1995年第4期52-53,共2页

ＰＣＲ检测泪液中乙肝病毒ＤＮＡ白求恩国际和平医院孙殿兴，耿云琴，王法印，孙晓燕，胡荣军事医学科学院王升启虽泪液中已检出乙肝病毒表面抗原（ＨＢＳＡｇ）的存在ｌ’］，但（ＨＢＳＡｇ）是乙肝病毒（ＨＢＶ）核衣壳，也发现血液... ＰＣＲ检测泪液中乙肝病毒ＤＮＡ白求恩国际和平医院孙殿兴，耿云琴，王法印，孙晓燕，胡荣军事医学科学院王升启虽泪液中已检出乙肝病毒表面抗原（ＨＢＳＡｇ）的存在ｌ’］，但（ＨＢＳＡｇ）是乙肝病毒（ＨＢＶ）核衣壳，也发现血液或体液中存在游离的非感染性ＨＢＳＡ... 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 DNA 泪液 聚合酶链反应

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生物芯片图像分析的研究进展

18

作者 刘国传 伯晓晨 +1 位作者 王升启 陆琳 《中国医疗器械杂志》 CAS 2007年第2期108-111,共4页

生物芯片图像分析是生物芯片中至关重要的一个环节,图像分析效果的好坏直接影响到检测结果的精度和准确性,进而影响生物芯片的推广与使用。结合生物芯片图象的特点,对生物芯片图象去噪和样点自动识别作一综述。

关键词 生物芯片 图象去噪 样点自动识别

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丝叶唐松草镇静催眠作用实验研究

19

作者 郑冰清 王升启 +2 位作者 胡晶红 王光峰 张永清 《中国医药导报》 CAS 2013年第15期22-23,27,共3页

目的研究丝叶唐松草(Thalictrum foeniculaceum Bunge)的镇静催眠活性,探讨其治疗失眠症的作用机制。方法将丝叶唐松草制成粉末、水提取物和乙醇提取物,分别灌胃给药,观察记录对小鼠自主活动及协同戊巴比妥钠小鼠入睡率、睡眠潜伏期和... 目的研究丝叶唐松草(Thalictrum foeniculaceum Bunge)的镇静催眠活性,探讨其治疗失眠症的作用机制。方法将丝叶唐松草制成粉末、水提取物和乙醇提取物,分别灌胃给药,观察记录对小鼠自主活动及协同戊巴比妥钠小鼠入睡率、睡眠潜伏期和睡眠时间的影响。结果丝叶唐松草粉末、水提取物、乙醇提取物均显示有一定的镇静催眠作用,其中乙醇提取物使小鼠自主活动次数明显减少(P<0.05),使阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间明显延长(P<0.05),但粉末及水提物的作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论丝叶唐松草具有一定的镇静催眠作用,但其治疗失眠症的作用机制尚需深入探讨。 展开更多

关键词 丝叶唐松草 药理活性 镇静催眠作用

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硫代反义寡核苷酸药物FT19有关物质的分析 被引量：3

20

作者 张宏燕 鲁丹丹 +2 位作者 吴利霞 周喆 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期540-543,共4页

为了进行硫代反义寡核苷酸药物FT19的质量控制研究,建立了用阴离子交换高效液相色谱(AX-HPLC)和毛细管凝胶电泳(CGE)分析自行合成的FT19有关物质的方法。设计合成了FT19的硫代不完全序列(P=O)1和短序列(n-x)并将它们作为已知杂质。在AX-... 为了进行硫代反义寡核苷酸药物FT19的质量控制研究,建立了用阴离子交换高效液相色谱(AX-HPLC)和毛细管凝胶电泳(CGE)分析自行合成的FT19有关物质的方法。设计合成了FT19的硫代不完全序列(P=O)1和短序列(n-x)并将它们作为已知杂质。在AX-HPLC上,使用的分析柱为DNAPacPA-100(4mm×250mm);流动相A为10mmol/LNaOH-0.1mol/LNaCl,流动相B为10mmol/LNaOH-3mol/LNaCl;梯度洗脱条件为流动相B液在8min内从60%升至100%;流速1mL/min;柱温40℃;检测波长为260nm。CGE所用毛细管规格为内径100μm,总长度为31cm,有效长度为20cm;电泳缓冲溶液为三羟甲基氨基甲烷(Tris)-硼酸-7mol/L尿素,pH8.5;采用电动进样,进样电压-10kV;分离胶为250g/L的聚丙烯酰胺;检测波长为254nm。结果表明,FT19与硫代不完全的(P=O)1序列在AX-HPLC上能够达到基线分离,与短序列(n-1)在CGE上能达到基线分离。说明AX-HPLC和CGE联合应用能够很好地分析FT19中的有关物质。 展开更多

关键词 阴离子交换高效液相色谱 毛细管凝胶电泳 硫代反义寡核苷酸 有关物质

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