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太子参多糖经Let-7d-3p下调伪狂犬病病毒感染小鼠的炎症基因转录水平
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作者 罗诗师 陈蓓蕾 +9 位作者 张蕾 冯启贤 吴瑞森 陈佳祺 王媛 简子昕 许丽惠 陈秋勇 马玉芳 王全溪 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2438-2450,共13页
本研究旨在探究太子参多糖(Radix pseudostellariae polysaccharide,RPP)调控微小核糖核酸(microRNA,miRNA)Let-7d-3p对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染引起炎症基因表达的影响及其机理。体外培养猪肾细胞(porcine kidney 15,... 本研究旨在探究太子参多糖(Radix pseudostellariae polysaccharide,RPP)调控微小核糖核酸(microRNA,miRNA)Let-7d-3p对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染引起炎症基因表达的影响及其机理。体外培养猪肾细胞(porcine kidney 15,PK-15),使用不同浓度RPP(0.5~32.0 mg·mL^(-1))处理PK-15细胞,通过细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法检测细胞存活率。接着将PK-15细胞分为空白组、PRV组、0.5 mg·mL^(-1)RPP组、1.0 mg·mL^(-1)RPP组、2.0 mg·mL^(-1)RPP组,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-17的mRNA转录水平。转染Let-7d-3p抑制物至PK-15细胞,经0或0.5 mg·mL^(-1)RPP干预后,采用qPCR检测Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。选择15只健康小鼠随机分为空白组、PRV组、RPP(10 mg·kg^(-1))组(每组5只),qPCR检测小鼠肾组织中Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。结果显示,在0~4.0 mg·mL^(-1)浓度RPP无细胞毒性。与空白组相比,PRV感染PK-15细胞会显著上调炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平(P<0.01),显著下调Let-7d-3p转录水平(P<0.01)。与PRV组相比,三个浓度的RPP作用细胞后均显著上调Let-7d-3p的转录水平(P<0.01),同时显著下调3个炎症因子的mRNA转录水平(P<0.01)。抑制Let-7d-3p后,与PRV组相比Let-7d-3p抑制组的IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平呈现显著上调(P<0.01)。而与PRV+RPP组相比,抑制Let-7d-3p后加入RPP干预,细胞炎症因子的mRNA转录水平显著上调(P<0.01)。体内试验结果表明,与空白组相比,PRV感染组小鼠肾中Let-7d-3p的转录水平显著下降(P<0.01),且炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平显著上调(P<0.01)。与PRV组相比,RPP处理小鼠后肾脏中Let-7d-3p转录水平显著上升(P<0.01),炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的转录水平显著下降(P<0.01)。体内体外结果表明,RPP可通过Let-7d-3p下调PRV感染引起的炎症基因转录水平,在mRNA水平上发现RPP具有一定的抗炎效用,为后续研究太子参多糖缓解PRV引起的炎症提供思路。 展开更多
关键词 太子参多糖 伪狂犬病病毒 Let-7d-3p 炎症
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乳酸菌素PlnJ(G5)缓解LPS诱导肠上皮细胞及小鼠肠道炎症的作用机制 被引量:1
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作者 许丽惠 严梦涵 王全溪 《福建农业科技》 CAS 2024年第10期36-42,共7页
为探索实验室前期改造保存的乳酸菌素PlnJ(G5)对脂多糖LPS诱导下肠上皮细胞IPECJ2与小鼠肠道炎症的作用机制。选取肠上皮细胞IPEC-J2及模式动物小鼠作为研究载体,利用LPS建立炎症模型,并通过添加PlnJ(G5)进行处理,采用cck-8检测细胞活... 为探索实验室前期改造保存的乳酸菌素PlnJ(G5)对脂多糖LPS诱导下肠上皮细胞IPECJ2与小鼠肠道炎症的作用机制。选取肠上皮细胞IPEC-J2及模式动物小鼠作为研究载体,利用LPS建立炎症模型,并通过添加PlnJ(G5)进行处理,采用cck-8检测细胞活力以及实时荧光定量PCR检测炎症相关细胞因子的表达变化。结果表明:5.0μg·mL^(-1)的LPS对IPEC-J2细胞活力的影响较小,且该浓度作用下IPEC-J2细胞IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-α及IFN-β的mRNA表达量显著高于空白对照组,证明LPS对IPEC-J2细胞致炎造模成功;CCK-8检测结果显示PlnJ(G5)对IPEC-J2细胞的安全添加剂量为20.0μg·mL^(-1);qPCR检测结果表明IPEC-J2细胞在经5.0μg·mL^(-1)的LPS作用4 h后,添加20.0μg·mL^(-1)未经热处理的PlnJ(G5)对IL-1、IL-6、TNF-α、IFN-α及IFN-β的mRNA表达量的抑制效果最佳;添加乳酸菌素处理对LPS诱导模式动物小鼠肠炎试验发现灌服未经热处理的PlnJ(G5),对小鼠的抗炎效果最好。 展开更多
关键词 乳酸菌素 脂多糖 诱导 肠上皮细胞 炎症
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番鸭呼肠病毒抗体间接ELISA方法的建立 被引量:6
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作者 王全溪 吴异健 +2 位作者 陈枝华 李国平 吴宝成 《动物医学进展》 CSCD 2005年第8期44-47,共4页
用硫酸铵粗提的番鸭呼肠病毒作为包被抗原,成功地建立了检测番鸭呼肠病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明,包被抗原作1∶80稀释,待检血清作1∶40稀释,酶标二抗作1∶200稀释,是最佳的工作浓度,而且该法特异性高,重复性好,质量稳定,敏感性... 用硫酸铵粗提的番鸭呼肠病毒作为包被抗原,成功地建立了检测番鸭呼肠病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明,包被抗原作1∶80稀释,待检血清作1∶40稀释,酶标二抗作1∶200稀释,是最佳的工作浓度,而且该法特异性高,重复性好,质量稳定,敏感性强,结果可靠,是一种适合于流行病血清学调查的快速、敏感、准确、特异、重复性好的方法。 展开更多
关键词 番鸭 呼肠病毒 间接ELISA 抗体
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锌与动物免疫细胞凋亡关系的研究进展 被引量:8
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作者 王全溪 李国平 姜海军 《动物医学进展》 CSCD 2007年第3期74-77,共4页
锌是机体必需的微量元素,它对免疫功能有很大影响,其在维持免疫系统的正常发育和功能方面有重要作用。锌与免疫系统的多种功能有关,对免疫系统的发育、稳定、调节有重要作用。缺锌将导致免疫器官萎缩、免疫细胞减少和抗体水平下降。研... 锌是机体必需的微量元素,它对免疫功能有很大影响,其在维持免疫系统的正常发育和功能方面有重要作用。锌与免疫系统的多种功能有关,对免疫系统的发育、稳定、调节有重要作用。缺锌将导致免疫器官萎缩、免疫细胞减少和抗体水平下降。研究表明,低锌能诱导淋巴细胞凋亡,而高锌抑制淋巴细胞凋亡;当锌浓度超过一定水平时,可产生神经毒性而诱导细胞凋亡。锌对细胞凋亡调控的可能机制和途径的研究有待进一步的研究。 展开更多
关键词 免疫细胞 细胞凋亡
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小熊猫卵巢肥大细胞与雌性生殖干细胞的初步观察 被引量:2
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作者 修云芳 王全溪 +3 位作者 邵良平 李碧春 徐素慧 陈玉村 《动物医学进展》 北大核心 2015年第6期96-99,共4页
为了解小熊猫卵巢肥大细胞分布情况,收集15只成体小熊猫的卵巢,按常规组织学技术制作组织切片。根据甲苯胺蓝染色结果,肥大细胞主要分布于血管壁与卵泡动脉外膜的结缔组织中,其数量随着发情周期呈规律性变化,发情期最高,乏情期次之,妊... 为了解小熊猫卵巢肥大细胞分布情况,收集15只成体小熊猫的卵巢,按常规组织学技术制作组织切片。根据甲苯胺蓝染色结果,肥大细胞主要分布于血管壁与卵泡动脉外膜的结缔组织中,其数量随着发情周期呈规律性变化,发情期最高,乏情期次之,妊娠期数量最少,不同时期之间肥大细胞数量差异极显著(P<0.01);阿尔新蓝-番红花红(AB-S)染色将肥大细胞可分为黏膜型、结缔组织型与混合型。肥大细胞可能对小熊猫的受精,胚胎着床,妊娠有调节作用。免疫组化染色显示,小熊猫卵巢有组胺阳性细胞,这些细胞分布也是随着发情周期呈规律性变化,卵母细胞和生殖上皮细胞呈现小鼠脉管同系物(MVH)阳性反应,说明小熊猫卵巢内存在生殖干细胞。 展开更多
关键词 小熊猫 卵巢 肥大细胞 生殖干细胞
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地塞米松对仔猪肠道黏膜形态的影响 被引量:1
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作者 潘书磊 邓红玉 +1 位作者 阮国荣 王全溪 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3670-3675,共6页
试验旨在研究地塞米松对仔猪肠道黏膜形态的影响,并初步探讨地塞米松对肠道免疫屏障功能的影响以及利用地塞米松建立仔猪肠道损伤模型的可行性,以期为今后研究其他糖皮质类激素引起的肠道损伤发生机制和防治措施提供理论和科学依据。试... 试验旨在研究地塞米松对仔猪肠道黏膜形态的影响,并初步探讨地塞米松对肠道免疫屏障功能的影响以及利用地塞米松建立仔猪肠道损伤模型的可行性,以期为今后研究其他糖皮质类激素引起的肠道损伤发生机制和防治措施提供理论和科学依据。试验选用断奶1周的健康仔猪30头,随机分为6组,每组5个重复,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别注射地塞米松1、2、3ml,对照Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别注射生理盐水1、2、3mL;采用HE染色、PAS染色和ELISA检测法分别测定肠道绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度与隐窝深度比值、杯状细胞、上皮内淋巴细胞和肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)6个指标。试验结果表明,地塞米松能抑制仔猪肠绒毛生长,使隐窝深度变深,肠绒毛高度与隐窝深度比值降低,杯状细胞、上皮内淋巴细胞数目和sIgA含量均减少,且剂量越大以上变化越明显。综合上述结果,地塞米松会影响肠绒毛的发育和肠道营养物质的吸收,破坏黏膜免疫屏障功能,且有剂量依赖性。 展开更多
关键词 地塞米松 仔猪 肠道黏膜 形态
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肉鸡小肠干细胞免疫组化定位和形态学研究
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作者 邓红玉 温亚萍 +2 位作者 梅景良 祁保民 王全溪 《农学学报》 2013年第7期36-39,共4页
观察肉鸡小肠各段肠干细胞的分布和形态结构特点,为探讨小肠干细胞与肠损伤修复之间的关系提供基础理论。采集处于生长阶段肉鸡(28日龄)的十二指肠、空肠、回肠,以Lgr5作为肠干细胞表记标记,运用免疫组织化学法研究肉鸡小肠各段中的肠... 观察肉鸡小肠各段肠干细胞的分布和形态结构特点,为探讨小肠干细胞与肠损伤修复之间的关系提供基础理论。采集处于生长阶段肉鸡(28日龄)的十二指肠、空肠、回肠,以Lgr5作为肠干细胞表记标记,运用免疫组织化学法研究肉鸡小肠各段中的肠干细胞分布和形态结构特点。结果表明,Lgr5作为肠干细胞表记标记特异性强,结果可靠。肠干细胞在肉鸡十二指肠、空肠、回肠均有分布,主要位于隐窝基底部潘氏细胞的+1~+4位置,细胞呈柱状或锥形,核椭圆形或染色不清。平均每个视野中肠干细胞数量十二指肠2个、回肠3个、空肠3个。本试验首次证实Lgr5可作为肉鸡肠干细胞的表面标记,并观察了肉鸡肠干细胞的形态结构,初步确定了肉鸡小肠中肠干细胞的数量,为进一步探讨肠干细胞在肉鸡生长发育中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 肉鸡 小肠 免疫组化 肠干细胞
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饲粮精氨酸水平对肉仔鸡免疫功能及其抗FAdV-4影响的研究 被引量:15
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作者 林智鑫 周嘉鑫 +3 位作者 陈立圳 高玉云 王全溪 王长康 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期772-782,共11页
本试验旨在研究饲粮精氨酸水平对肉仔鸡免疫功能及其抗禽腺病毒I群4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)的影响。选取1日龄罗斯(Ross)308肉仔鸡300只,随机分为5组(每组5个重复,每个重复12只),设置5个饲粮精氨酸水平组,分别为0.96%、1... 本试验旨在研究饲粮精氨酸水平对肉仔鸡免疫功能及其抗禽腺病毒I群4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)的影响。选取1日龄罗斯(Ross)308肉仔鸡300只,随机分为5组(每组5个重复,每个重复12只),设置5个饲粮精氨酸水平组,分别为0.96%、1.20%、1.44%、1.68%和1.92%,试验鸡饲养至21日龄,各重复随机选取4只测定血清免疫指标和免疫相对器官指数。随后各重复再次随机选取6只,并分为感染组和对照组,感染组肌肉注射FAdV-4 NP毒株0.2 mL(TCID50=10-6.23/0.01 mL),对照组肌肉注射等量灭菌生理盐水,感染2 d后,统计死亡率、发病率,ELISA测定肝组织iNOS水平、qPCR测定肝iNOS mRNA表达量及病毒载量。结果表明:1)饲粮精氨酸水平为1.44%、1.68%和1.92%时,均能显著提高脾脏指数(P<0.05)且精氨酸水平为1.68%能显著提高胸腺指数(P<0.05),而精氨酸水平为0.96%会显著降低脾脏、胸腺和法氏囊指数(P<0.05)。2)1.68%精氨酸水平组能显著提高血清球蛋白(GLO)、IgG水平和球蛋白/白蛋白(G/A)比值(P<0.05);精氨酸水平为0.96%显著降低血清球蛋白和IgG水平(P<0.05)。3)精氨酸水平为0.96%可显著降低肉仔鸡血清中IL-1β、TNF-α、iNOS和NO水平(P<0.05),而1.68%和1.92%精氨酸水平组均能显著提高肉仔鸡血清中IL-1β、TNF-α、IFN-γ和iNOS水平(P<0.05)。4)肉鸡感染FAdV-4后,0.96%精氨酸水平组的死亡率会显著高于1.20%、1.44%、1.68%和1.92%组(P<0.05)。5)ELISA测定结果显示,1.44%、1.68%和1.92%精氨酸水平组能显著提高感染后的肝组织iNOS水平。6)1.44%、1.68%和1.92%精氨酸水平组均能显著提高肝iNOS mRNA表达水平(P<0.05);肉鸡感染FAdV-4,iNOS mRNA水平均会显著降低(P<0.05),1.44%、1.68%和1.92%精氨酸水平组能提高感染FAdV-4后肝iNOS mRNA水平(P<0.05)并显著降低肝的病毒载量(P<0.05)。由此可见,肉仔鸡饲粮中精氨酸的不足会降低其机体的免疫功能及抗FAdV-4病毒能力。提高肉仔鸡饲粮中精氨酸水平不仅能提高免疫器官指数、血清免疫因子水平及肝iNOS mRNA表达水平,降低肝的病毒载量,从而提高机体免疫功能和抗病毒能力。 展开更多
关键词 精氨酸 免疫功能 INOS FAdV-4
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欧鳗脾和肾中黑色素巨噬细胞中心的形态学与细胞化学研究 被引量:2
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作者 罗小春 梅景良 +2 位作者 王全溪 邓红玉 温亚萍 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期401-406,共6页
应用组织化学与电镜技术对欧鳗脾脏和肾脏中黑色素巨噬细胞中心(MMCs)进行研究。结果表明:脾脏和肾脏中均存在MMCs,它们呈圆形、卵圆形或不规则形状;脾脏MMCs有邻血管分布的特点,而肾脏MMCs的分布无此特点;脾脏和肾脏中的MMCs均含有铁... 应用组织化学与电镜技术对欧鳗脾脏和肾脏中黑色素巨噬细胞中心(MMCs)进行研究。结果表明:脾脏和肾脏中均存在MMCs,它们呈圆形、卵圆形或不规则形状;脾脏MMCs有邻血管分布的特点,而肾脏MMCs的分布无此特点;脾脏和肾脏中的MMCs均含有铁血黄素、黑色素及脂褐质3种色素,但脾脏MMCs以铁血黄素为主,肾脏以黑色素和脂褐质为主;脾脏MMCs中存在色素颗粒和细胞碎片。初步推测,欧鳗脾脏MMCs与肾脏MMCs的功能有可能是不相同的。 展开更多
关键词 欧鳗 黑色素巨噬细胞中心 形态学 细胞化学 脾脏 肾脏
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我国部分省(区)猪圆环病毒3型的分子流行病学研究 被引量:11
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作者 刘晓东 杨旭兵 +7 位作者 郑庆礼 马震乾 刘红祥 王福军 杨佳丰 高丰 杜元钊 王全溪 《动物医学进展》 北大核心 2017年第11期18-21,共4页
2016年美国报道了一种可引起猪皮炎肾病综合征、母猪繁殖障碍、呼吸道及高热等多系统炎症的新型病毒猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)。为了解我国PCV-3的感染情况,针对PCV-3保守区设计一对特异性引物,对10个省106份样... 2016年美国报道了一种可引起猪皮炎肾病综合征、母猪繁殖障碍、呼吸道及高热等多系统炎症的新型病毒猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV-3)。为了解我国PCV-3的感染情况,针对PCV-3保守区设计一对特异性引物,对10个省106份样品进行PCR检测并测序分析。结果表明,10个省(区)中6个省(区)为阳性,地区阳性率60%;66个猪场中感染PCV-3的猪场为12个,猪场阳性率为18.2%;106个样品中检测PCV-3阳性的样品为19例,样品阳性率为18.0%。研究结果为更多了解PCV-3在我国感染情况提供了数据基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 PCR检测 分子流行病学
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