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海水养殖鲈鱼分离出一种hepcidin抗菌肽新基因 被引量：23
1
作者 王克坚 周红玲 杨明 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期286-287,共2页
利用分子生物学技术,从我国海水养殖鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)分离到一种hepcidin抗菌肽新基因,并在国际GenBank公布(accessionnumber为AY547281).初步研究结果表明,在我国鲈鱼分离到的hepcidin基因属于hep cidin抗菌肽基因家族的新成员.
关键词 海水养殖 鲈鱼 hepcidin抗菌肽基因 分子生物学 基因分离
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致病性鹿源坏死梭杆菌分离鉴定 被引量：11
2
作者 王克坚 张洪英 +4 位作者 陈立志 刘晓颖 程世鹏 徐敏 钱国成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第2期84-87,共4页
应用厌氧培养技术 ,从患坏死杆菌病鹿的病变坏死组织和脓汁中分离出一种主要的病原菌 ;通过细菌形态学、染色反应、培养特性、生化试验、血清学反应等鉴定方法 ,确定该病原分离株为严格厌氧性坏死梭杆菌 ,分型鉴定为A、AB和B型 ;实验动... 应用厌氧培养技术 ,从患坏死杆菌病鹿的病变坏死组织和脓汁中分离出一种主要的病原菌 ;通过细菌形态学、染色反应、培养特性、生化试验、血清学反应等鉴定方法 ,确定该病原分离株为严格厌氧性坏死梭杆菌 ,分型鉴定为A、AB和B型 ;实验动物感染证明A和AB型坏死梭杆菌为致病性菌株。 展开更多
关键词 鹿 坏死 杆菌病 坏死梭杆菌 分离 鉴定 厌氧培训
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坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB)94免疫原对鹿的初步免疫试验 被引量：3
3
作者 王克坚 陈立志 +6 位作者 刘晓颖 徐敏 崔学哲 张洪英 张洪涛 苗立光 吴建新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期32-34,共3页
本研究将坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB) 94厌氧培养后 ,裂解制备抗原 ,与等量福氏完全佐剂混合 ,制备乳化佐剂疫苗。将疫苗分别接种 4头不同年龄的健康成年鹿 (每头接种 4ml)。 3头鹿作为对照组。接种前 ,静脉采血 ,进行对流免疫电泳检查。... 本研究将坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB) 94厌氧培养后 ,裂解制备抗原 ,与等量福氏完全佐剂混合 ,制备乳化佐剂疫苗。将疫苗分别接种 4头不同年龄的健康成年鹿 (每头接种 4ml)。 3头鹿作为对照组。接种前 ,静脉采血 ,进行对流免疫电泳检查。 30天后 ,分别用 15 0～ 40 0亿菌感染试验动物 ,然后混群饲养观察 ,并定期采血检查被免鹿血清中抗体消长变化。结果对照组鹿分别于 3个月后开始出现明显的临床症状 ,而免疫组不表现任何临床症状 ,6个月仍表现临床健康。 4头免疫鹿 6个月时都能检测到血清抗体 ,3头免疫鹿血清抗体可维持到 7个月后。试验表明 ,坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB) 94疫苗接种鹿后 ,可刺激鹿产生很好的免疫力 ,从而通过本动物初步证明坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB) 94免疫原具有良好的免疫原性 ,可以用于制备坏死杆菌病疫苗。 展开更多
关键词 鹿 FN(AB)94免疫原 免疫原性 坏死梭杆菌 毒力菌株
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纤毛蛋白与绵羊白细胞介素2融合基因工程疫苗对实验动物的体液免疫应答 被引量：2
4
作者 王克坚 陈立志 +4 位作者 刘晓颖 王克波 张洪涛 苗立光 徐敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期121-124,共4页
将转化节瘤拟杆菌 (D .nodosus)纤毛蛋白 (Pili)和绵羊白细胞介素 2 (oviIL2 )融合基因表达质粒的工程菌BL_2 1,在含梭苄青霉素营养肉汤培养基中表达 ,离心获得菌体沉淀物 ,裂解后配制成Pili_oviIL2融合基因工程疫苗。用加佐剂和不加佐... 将转化节瘤拟杆菌 (D .nodosus)纤毛蛋白 (Pili)和绵羊白细胞介素 2 (oviIL2 )融合基因表达质粒的工程菌BL_2 1,在含梭苄青霉素营养肉汤培养基中表达 ,离心获得菌体沉淀物 ,裂解后配制成Pili_oviIL2融合基因工程疫苗。用加佐剂和不加佐剂的Pili_oviIL2融合基因工程疫苗分别接种 2只健康家兔 ,2 1天后接种第 2次 ;定期采血 ,用对流免疫电泳检测试验兔的体液免疫反应。结果发现 ,加佐剂和不加佐剂的Pili_oviIL2融合基因工程疫苗免疫兔 7天即可产生相应抗体 ,抗体在免疫血清中可维持 6个月以上。进一步试验将不加佐剂的Pili_oviIL2融合基因工程疫苗接种 3只健康绵羊 ,同样 2 1天后接种第 2次 ,定期采血 ,用对流免疫电泳检测试验绵羊的体液免疫反应。同时用Pili基因工程疫苗接种 2只绵羊作对照。结果 3只绵羊接种Pili_oviIL2融合基因工程疫苗后 ,分别于 7天和 14天产生相应的抗体 ,而接种Pili基因工程疫苗的绵羊于 2 8天产生相应的抗体 ;被免疫绵羊血清中的抗体可维持 6个月以上。用Pili_oviIL2融合基因工程疫苗接种兔和绵羊的免疫试验表明 ,Pili_oviIL2融合基因工程疫苗具有较好的体液免疫应答反应 。 展开更多
关键词 纤毛蛋白 绵羊IL2 基因工程疫苗 佐剂 体液免疫应答 基因融合 兔
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海洋鱼类和青蟹抗菌肽hepcidin和scygonadin的研究 被引量：12
5
作者 王克坚 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期418-424,共7页
抗菌肽或抗微生物肽因具有杀死或抑制微生物的共同特性,近年来科学家又将这些肽类称为"天然抗生素",有望在将来作为一种新型的生物药物替代现有的化学类抗生素.海洋动物中蕴藏着世界上丰富的抗菌活性物质,研究与开发应用海洋... 抗菌肽或抗微生物肽因具有杀死或抑制微生物的共同特性,近年来科学家又将这些肽类称为"天然抗生素",有望在将来作为一种新型的生物药物替代现有的化学类抗生素.海洋动物中蕴藏着世界上丰富的抗菌活性物质,研究与开发应用海洋动物抗菌肽成为近年来的研究热点.结合国内外的相关研究进展,简要总结了课题组近年来在我国海水养殖鱼类抗菌肽hepcidin和青蟹抗菌肽scygonadin的研究进展,从抗菌肽的蛋白分离、纯化、基因克隆、基因表达模式、基因工程表达以及抗菌肽合成与表达产品的抗菌活性等进行了简要细致的叙述,对深入探索海洋动物抗菌肽在我国水产养殖业的开发应用具有重要的参考价值. 展开更多
关键词 海洋鱼类 青蟹 抗菌肽 HEPCIDIN scygonadin 基因克隆 基因表达 抗菌活性 海水养殖业
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鹿坏死梭杆菌分离菌株保存试验 被引量：4
6
作者 王克坚 陈立志 +1 位作者 刘晓颖 程世鹏 《特产研究》 1998年第2期34-36,共3页
厌氧血液琼脂培养基培养的鹿坏死梭杆菌培养物加入脱纤维羊血或兔血，于－20℃下保存可存活3～4个月；于－70℃下保存，可存活2年以上。同样条件下，用含酵母的Eugonbroth培养基直接保存其鹿坏死梭杆菌培养物，也可存活2年；因此，－70... 厌氧血液琼脂培养基培养的鹿坏死梭杆菌培养物加入脱纤维羊血或兔血，于－20℃下保存可存活3～4个月；于－70℃下保存，可存活2年以上。同样条件下，用含酵母的Eugonbroth培养基直接保存其鹿坏死梭杆菌培养物，也可存活2年；因此，－70℃下保存鹿坏死梭杆菌菌株是实验室最方便的长期保存方法。并测得Eugonbroth保存的菌株于－20℃下保存可存活2～3个月；在厌氧罐中于4℃下可存活15～30天；室温条件下存活7天。冻干保存菌种可在3年以上。 展开更多
关键词 坏死梭杆菌 保存 菌株分离
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鹿坏死杆菌病病原分离培养的适宜厌氧条件 被引量：3
7
作者 王克坚 陈立志 +1 位作者 刘晓颖 张洪英 《特产研究》 1995年第4期11-12,共2页
在我国，迄今未见有关鹿坏死杆菌病的研究报道。本文在试验基础上对鹿坏死杆菌病病料运送及其病原分离培养的厌氧条件进行了选择，为鹿坏死杆菌病的深入研究建立了实验室基础。
关键词 鹿病 坏死杆菌病 病原菌 防治
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拟穴青蟹新型抗菌肽的发现、研究与应用进展 被引量：5
8
作者 王克坚 陈芳奕 彭会 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期407-416,共10页
水产养殖业长期过量使用抗生素导致的细菌耐药性增加、水产品中抗生素残留和养殖环境中抗生素污染等问题,已严重影响我国水产养殖业健康发展,因而亟需寻找抗生素的有效替代品.抗菌肽是一类生物体中普遍存在并具有广谱抗微生物活性的小... 水产养殖业长期过量使用抗生素导致的细菌耐药性增加、水产品中抗生素残留和养殖环境中抗生素污染等问题,已严重影响我国水产养殖业健康发展,因而亟需寻找抗生素的有效替代品.抗菌肽是一类生物体中普遍存在并具有广谱抗微生物活性的小分子多肽,因其不同于传统抗生素,具有不易产生耐药性等特性,被科学家誉为“天然抗生素”.海洋无脊椎动物是开发高效且抗多种病原微生物的新型抗菌肽的重要来源.本课题组自2002年起一直聚焦我国水产养殖业抗生素污染的重大科学问题,以研发抗生素的有效替代品为目标,致力于海洋动物新型抗菌肽的研发与利用研究,本综述将重点介绍拟穴青蟹(Scylla paramamosain)新型抗菌肽的发现及其应用进展. 展开更多
关键词 拟穴青蟹 抗菌肽 抗生素 水产养殖业
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雉鸡结核病菌苗免疫的研究 被引量：1
9
作者 王克坚 程世鹏 +4 位作者 林伟 钱国成 守德吉 徐海峰 徐敏 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第1期4-6,共3页
用患结核病雉鸡分离的３种不同血清型的禽结核分枝杆菌制备灭活苗。经现场试验，证明免疫效果良好．雉鸡血清中抗体可维持８～９个月，抗自然感染保护率为８６、７％。人工感染试验保护率为６６．７％。
关键词 鸡病 雉鸡 结核病 疫苗 免疫
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同向双螺杆挤出机反螺纹元件的特征 被引量：1
10
作者 王克坚 《塑料》 CAS CSCD 1991年第6期11-14,共4页
一、概述同向旋转双螺杆挤出机在我国塑料加工业中应用已日趋广泛,我国少数厂家亦开始生产这种双螺杆挤出机。为了能够设计出性能优异的双螺杆挤出机,必须了解各种螺杆元件及其组合特性。
关键词 塑料 双螺杆挤出机 反螺纹元件
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白细胞介素类细胞因子的免疫佐剂作用 被引量：1
11
作者 王克坚 殷震 《预防兽医学进展》 2000年第1期30-33,共4页
关键词 疫苗 白细胞介素 细胞因子 免疫佐剂 兽医
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应用PPA-ELISA检测雉鸡血清中抗结核抗体的研究
12
作者 王克坚 钱国成 +3 位作者 程世鹏 林伟 张立新 徐敏 《中国畜禽传染病》 CSCD 1991年第1期27-28,7,共3页
用建立的检测雉鸡血清中抗结核抗体的 PPA-ELISA法与平板凝集法同时检测216份雉鸡血清,阳性率分别为54.2%(117份)和43.1%(93份).证明 PPA-ELISA法对于雉鸡结核病诊断具有较高的敏感性和特异性.
关键词 雉鸡 PPA-ELISA 血清 结核抗体
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板、片和平膜成型机头形式的选择
13
作者 王克坚 李纹 《塑料》 CAS CSCD 1993年第2期14-17,共4页
一、概述热塑性塑料片材、板材和平膜广泛地应用于工业、农业、建筑以及人民的日常生活中。片材、板材以及平膜制品的挤出成型通常使用鱼尾机头、T型机头、衣架机头和螺杆分配机头。鱼尾机头的流道特点决定这种机头很难成型宽度超过500m... 一、概述热塑性塑料片材、板材和平膜广泛地应用于工业、农业、建筑以及人民的日常生活中。片材、板材以及平膜制品的挤出成型通常使用鱼尾机头、T型机头、衣架机头和螺杆分配机头。鱼尾机头的流道特点决定这种机头很难成型宽度超过500mm的制品,而螺杆分配机头由于其制造成本偏高仅用于一些特定的场合,且仅在日本,这种形式的机头于获得应用,西欧和国内的片、板材和平膜的生产大量使用T型机头和衣架机头,本文将重点分析和讨论这两种形式机头和特性。二、T型机头和衣架机头的特点及设计原理长时间以来。 展开更多
关键词 塑料 板材 片材 平膜 成型机头
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反刍动物腐蹄病病原菌株的分离培养与厌氧特性
14
作者 王克坚 刘晓颖 +3 位作者 陈立志 张洪涛 徐敏 苗立光 《特产研究》 2000年第1期34-36,49,共4页
反刍动物腐蹄病是由严格厌氧性病原菌节瘤拟杆菌引起的牛、羊、鹿等反刍动物的传染病 ,在我国已成为反刍动物养殖业常见且发病率较高的一种危害严重的疾病。国内近几年才对本病进行细致的研究。分离鉴定该病病原菌需要严格厌氧条件和一... 反刍动物腐蹄病是由严格厌氧性病原菌节瘤拟杆菌引起的牛、羊、鹿等反刍动物的传染病 ,在我国已成为反刍动物养殖业常见且发病率较高的一种危害严重的疾病。国内近几年才对本病进行细致的研究。分离鉴定该病病原菌需要严格厌氧条件和一些特殊的操作技术。本文就节瘤拟杆菌分离培养的厌氧培养基的选择、培养时间和温度、病料采集和运送、分离鉴定分离株及菌株保存等的原则和要求作一简单阐述 。 展开更多
关键词 反刍动物腐蹄病 厌氧特性 节瘤拟杆菌 分离 鉴定
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雉鸡结核间接血凝抗原制备方法的研究
15
作者 王克坚 钱国成 +3 位作者 程世鹏 林伟 吴玉环 邹彩云 《特产研究》 1991年第2期18-19,共2页
<正> 本文应用酚—水提取脂多糖法,制备了禽型结核杆菌脂多糖抗原。用该抗原与绵羊红血球致敏制备的致敏血球进行间接血凝试验,检测雉鸡血清中抗结核抗体取得了较满意的效果。与雉鸡阳性血清反应的凝集价可达512~—1024~x。其检... <正> 本文应用酚—水提取脂多糖法,制备了禽型结核杆菌脂多糖抗原。用该抗原与绵羊红血球致敏制备的致敏血球进行间接血凝试验,检测雉鸡血清中抗结核抗体取得了较满意的效果。与雉鸡阳性血清反应的凝集价可达512~—1024~x。其检测雄鸡阳性血清结果与病理组织学、细菌学检查相符合。现场应用效果良好。 展开更多
关键词 雉鸡 结核 抗原 制备 血凝抗体
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同向旋转双螺杆挤出机排气口溢料原因及解决方法
16
作者 王克坚 耿孝正 《塑料》 CAS CSCD 1989年第1期25-28,共4页
本文阐述了同向旋转双螺杆挤出机排气口的溢料原因,并提出了解决这一问题的方法。这些方法对于挤出机的操作和螺杆几何尺寸的设计具有直接指导作用。
关键词 挤出机 排气口 溢料 双螺杆挤出机
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家兔病毒性出血症组织灭活苗免疫效果观察
17
作者 王克坚 程世鹏 +4 位作者 吴威 张洪英 钱国成 徐敏 许德生 《特产研究》 1991年第3期19-20,共2页
应用山农88分离株免瘟毒接种健康家免,取其24～48小时死亡免的肝、脾、肾、心等实质脏器研制成组织灭活苗。试验表明,该苗安全有效,6个月以上仍具有可靠保护力,现场应用免疫效果良好。
关键词 家兔 病毒性 出血症 疫苗
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雉鸡结核间接血凝试验研究
18
作者 王克坚 钱国成 +6 位作者 程世鹏 林伟 孙福林 吴玉环 邹彩云 张立新 徐敏 《特产研究》 1990年第3期1-4,33,共5页
通过试验,首次将间接血凝试验应用于雉鸡结核的诊断。初步建立了用于雉鸡结核的间接血凝试验方法,其敏感性高于平板凝集试验,是一种较为快速、敏感的血清学检测方法。
关键词 雉鸡 结核病 血凝试验 诊断
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Chinaplas’93观后感
19
作者 王克坚 《塑料》 CAS CSCD 1993年第4期19-21,共3页
我国塑橡工业界人士普遍关注的'第八届国际塑料橡胶工业展览会Chinaplas'93'于1993年5月20～24日在上海国际展览中心举行。这次展览会云集了德国、意大利、美国、日本、香港、台湾、韩国及中国等十七个国家和地区的二百多... 我国塑橡工业界人士普遍关注的'第八届国际塑料橡胶工业展览会Chinaplas'93'于1993年5月20～24日在上海国际展览中心举行。这次展览会云集了德国、意大利、美国、日本、香港、台湾、韩国及中国等十七个国家和地区的二百多家公司。 展开更多
关键词 塑料 橡胶
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尼罗罗非鱼Hepcidin基因结构与序列分析 被引量：13
20
作者 黄文树 李少菁 +3 位作者 蔡灵 杨明 陈君慧 王克坚 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期390-395,共6页
Hepcidins是一类具有调节铁代谢功能的抗菌肽.利用RT-PCR、RACE和LA等技术,以尼罗罗非鱼[Oreochro-mis niloticus(Linnaens)]肝脏中分离和克隆到Hepcidin基因.其全长cDNA为505 bp(不包括polyA),5′端非翻译区有85 bp,3′非编码区为156 ... Hepcidins是一类具有调节铁代谢功能的抗菌肽.利用RT-PCR、RACE和LA等技术,以尼罗罗非鱼[Oreochro-mis niloticus(Linnaens)]肝脏中分离和克隆到Hepcidin基因.其全长cDNA为505 bp(不包括polyA),5′端非翻译区有85 bp,3′非编码区为156 bp,阅读框为264 bp.其编码的氨基酸包括信号肽和前体肽等,前体肽进一步酶解产生22个氨基酸的活性肽,该活性肽具有Hepcidin基因家族特有8个半胱氨酸的保守序列.罗非鱼的Hepcidin基因结构包含3个外显子和2个内含子.本研究为今后阐明Hepcidin基因表达特性、表达产物理化性质、抗菌活性及其相关功能等奠定基础. 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 HEPCIDIN 抗菌肽 基因结构 序列分析
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