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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记 被引量:10
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作者 王亭忠 马爱群 +2 位作者 蒋文慧 徐正云 席雨涛 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期431-434,共4页
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP... 目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率.方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP-N3与Lipofectamine 2000不同浓度比例转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率.结果①原代MSCs多呈纺锤形或梭形,有聚集生长的倾向,多3~5个细胞成为一个集落.传代后,细胞变为形态均一的排列有序的成纤维细胞样,长梭形,胞浆突起较少,胞体轮廓不甚清晰,胞体也相对较大;②GFP转染后24 h即可见绿色荧光蛋白表达,72 h表达最强,此后逐渐减弱,到4周时仍可见少量表达;③转染效率与质粒和脂质体的浓度比例有关,1:2到1:3最高.结论利用Percoll密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;GFP转染是一种较好的MSCs标记方法. 展开更多
关键词 大鼠 骨髓间充质干细胞 培养 绿色荧光蛋白 转染
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非人工通气下大鼠急性心肌梗死模型的建立 被引量:11
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作者 魏峰 张静 +4 位作者 韩克 刘昱 王亭忠 倪雅娟 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期699-702,共4页
目的在非人工通气条件下,以较小的创伤且简单、快速地建立大鼠急性心肌梗死模型。方法 30只成年SD大鼠麻醉后,在自主呼吸条件下,于胸骨左缘第4肋间钝性分离肋间肌,暴露心脏,迅速结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立心肌梗死模型。同时记录术... 目的在非人工通气条件下,以较小的创伤且简单、快速地建立大鼠急性心肌梗死模型。方法 30只成年SD大鼠麻醉后,在自主呼吸条件下,于胸骨左缘第4肋间钝性分离肋间肌,暴露心脏,迅速结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立心肌梗死模型。同时记录术前、术中及术后1、3 d,1、2周的心电图变化;术后2周开胸,观察心脏大体形态的改变,LAD供血区出现明显发白的梗死区即为模型建立成功;同时取8只模型的心脏标本行组织病理学HE染色以证实模型建立。结果 25只大鼠成功建立心肌梗死模型,模型存活率为83.33%。心电图监测显示LAD结扎后出现R波峰减低,随即出现ST段抬高和ST-T融合,30 min后可见病理性Q波。术后2周开胸,可见缺血区心肌颜色发白,室壁运动减弱。HE染色可见心肌梗死区心肌细胞消失,代之大量纤维和胶原组织增生,梗死周边区残存心肌排列紊乱、肌丝断裂,间质结构破坏、纤维组织增生。结论本方法可在非人工通气条件下,快速、简单、有效地建立大鼠急性心肌梗死模型。 展开更多
关键词 非人工通气 心肌梗死 动物模型 大鼠
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卡托普利对心衰大鼠左心室钾通道表达的影响 被引量:11
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作者 任京婷 王贺 +2 位作者 王亭忠 卢群 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期50-53,63,共5页
目的观察容量超负荷心力衰竭大鼠左心室钾通道的表达情况及ACEI类药物卡托普利对其干预作用。方法成年雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组(n=16)、心衰组(n=20)、心衰+卡托普利干预组(n=20)。用腹主动脉-下腔静脉造瘘术制造容量超负荷心衰... 目的观察容量超负荷心力衰竭大鼠左心室钾通道的表达情况及ACEI类药物卡托普利对其干预作用。方法成年雄性SD大鼠随机分为3组,假手术组(n=16)、心衰组(n=20)、心衰+卡托普利干预组(n=20)。用腹主动脉-下腔静脉造瘘术制造容量超负荷心衰模型;术后12周根据心动超声、血清脑钠肽水平评价心功;用Real-timePCR技术检测瞬时外向钾电流(Ito,由Kv4.2、Kv4.3编码)、背景内向整流钾电流(Ik1,由Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3编码)α亚基的mRNA表达情况。结果①与假手术组相比,心衰组大鼠心动超声结果显示左室结构改变明显,收缩、舒张功能明显减低(P<0.01);血清脑钠肽含量明显升高(P<0.01)。②与假手术组相比,心衰组大鼠的Kv4.2、Kv4.3的mRNA表达量分别下降了31%、39%;Kir2.1、Kir2.2的mRNA表达量分别下降了53%、33%。③与心衰组相比,卡托普利干预组大鼠的Kv4.2、Kv4.3的mRNA表达量分别升高了13%、16%;Kir2.1、Kir2.2的mRNA表达量分别升高了23%、16%;但与假手术组相比,其表达量还是减低的。④各组大鼠的Kir2.3α亚基mRNA表达量无显著差异。结论心力衰竭大鼠左心室Ito、Ik1钾通道α亚基在mRNA水平上表达下降可能是心力衰竭时易发生心律失常的内在分子机制;而卡托普利对其逆转作用可能是其抗心律失常作用的潜在机制。 展开更多
关键词 心力衰竭 大鼠 左心室 钾通道 卡托普利
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自发性高血压大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BK_(Ca)通道的活性及表达改变 被引量:9
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作者 胡志 马爱群 +3 位作者 田红燕 席雨涛 范力宏 王亭忠 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期424-428,共5页
目的观察自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rats,SHR)与Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated po-tassiumchannel,BK... 目的观察自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rats,SHR)与Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated po-tassiumchannel,BKCa)电流及通道α亚单位表达的差异。方法实验采用16~18周龄SHR(N=20)及WKY(N=20)大鼠,尾套法测量大鼠尾动脉血压;胶原酶分离VSMCs,全细胞膜片钳技术记录全细胞总钾电流密度及BKCa电流;激光共聚焦观察BKCaα亚单位在VSMCs胞膜及胞质内的分布。结果 SHR较WKY大鼠的收缩压与舒张压均有显著升高(P<0.05);全细胞外向钾电流密度及BKCa电流密度均有显著性增加(P<0.05);SHR的BKCaα亚单位在胞膜及胞质内均有广泛分布,SHR大鼠VSMCs胞质与胞膜的荧光强度较WKY大鼠均有显著性升高(P<0.05)。结论 BKCa电流密度增加可能与BKCa通道α亚单位的表达增多有关,SHR大鼠VSMCs的BKCa电流密度增加引起血管的舒张,不能抵消平滑肌细胞的肌源性收缩可能是导致高血压的发生机制之一。 展开更多
关键词 高血压 膜片钳 大电导钙激活钾通道 血管平滑肌细胞
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慢病毒载体介导GFP标记大鼠骨髓间充质干细胞 被引量:10
5
作者 魏峰 马爱群 +1 位作者 王亭忠 张静 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期288-292,共5页
目的探究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)的理想条件,以获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。方法慢病毒载体介导GFP以25、50、100、200和400的感染复数(m... 目的探究慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记大鼠骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)的理想条件,以获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。方法慢病毒载体介导GFP以25、50、100、200和400的感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别作用12 h和24 h感染MSCs,倒置荧光显微镜及流式细胞术检测各组的感染效率和荧光强度,MTT法评价感染对MSCs增殖的影响,从而确定理想的感染条件。平皿克隆套环法挑选理想条件下感染的MSCs单克隆。结果MOI为100、200和400作用24 h时,感染效率较高,分别为88.94%、99.65%、99.42%;MOI为100和200时,感染对MSCs增殖无影响,MOI为400时,感染的MSCs增殖减慢。挑选MOI为200、作用24 h感染组的单克隆细胞,其1月时感染效率为99.95%,且荧光均一、强度很强。结论MOI为200作用24 h是慢病毒载体介导GFP标记MSCs的理想条件;通过细胞单克隆技术可获得稳定高表达GFP的MSCs亚群。 展开更多
关键词 间充质干细胞 慢病毒载体 绿色荧光蛋白 单克隆
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超容量负荷与压力负荷对新西兰兔心功能的影响及评价 被引量:6
6
作者 李溪 王亭忠 +4 位作者 卢群 韩克 卓小桢 王贺 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期282-285,共4页
目的探讨超容量负荷联合压力负荷条件下新西兰兔心衰模型的建立,并评价超容量负荷与压力负荷对新西兰兔心功能的影响。方法将37只新西兰兔随机分为联合组、腹窄组、主闭组和对照组。术后8周分别采用心动超声图、血流动力学及血浆B型钠尿... 目的探讨超容量负荷联合压力负荷条件下新西兰兔心衰模型的建立,并评价超容量负荷与压力负荷对新西兰兔心功能的影响。方法将37只新西兰兔随机分为联合组、腹窄组、主闭组和对照组。术后8周分别采用心动超声图、血流动力学及血浆B型钠尿肽(BNP)测定来评价心功能。结果①血流动力学结果显示联合组心率、主动脉收缩压、主动脉舒张末压、脉压、左室收缩末压、左室舒张末压明显高于对照组、主闭组、腹窄组(P<0.05)。②心动超声显示联合组左室舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室后壁厚度、室间隔厚度、短轴缩率、E/A比值均明显高于对照组,左室射血分数明显低于对照组、主闭组、腹窄组(P<0.05)。③联合组BNP水平较对照组、主闭组、腹窄组明显升高(P<0.05)。④联合组心脏/体重、湿肺/体重明显高于对照组、主闭组、腹窄组(P<0.05)。结论可通过超容量负荷联合压力负荷建立新西兰兔心衰模型;超容量负荷和压力负荷对心功能的影响不同。 展开更多
关键词 压力超负荷 容量超负荷 心力衰竭 动物模型 心功能 心动超声图 血流动力学 B型钠尿肽
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骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定 被引量:6
7
作者 蒋文慧 马爱群 +5 位作者 董安平 冯敏 郑小璞 王亭忠 耿涛 许正云 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期224-227,共4页
目的建立兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为MSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础。方法抽取兔胫骨骨髓,密度梯度离心,得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置显微镜下... 目的建立兔骨髓间质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增和鉴定的方法,为MSCs的进一步诱导分化和应用奠定基础。方法抽取兔胫骨骨髓,密度梯度离心,得到骨髓单个核细胞,接种后形成单层贴壁细胞,经胰蛋白酶消化后传代培养扩增,倒置显微镜下观察原代和传代细胞的生长特性。通过免疫荧光组织化学、流式细胞分析和透射电镜鉴定细胞。结果分离培养的骨髓MSCs贴壁、呈梭形,原代细胞呈集落生长,7~10d达到融合,传代后增殖速度加快;骨髓MSCs表达CD90,反复传代后表达效率增高,不表达CD34;透射电镜可见细胞表面有大量的绒毛突起,胞浆中有丰富的粗面内质网和线粒体,核大,形态不规则。结论密度梯度离心结合贴壁法,以及消化传代能有效分离纯化和扩增骨髓MSCs,分离培养的细胞具有骨髓MSCs的基本表型和特性。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 分离培养 鉴定
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比索洛尔对心衰大鼠心室肌瞬时外向钾通道蛋白表达的影响 被引量:7
8
作者 王建丽 马爱群 +1 位作者 王贺 王亭忠 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第10期1379-1383,共5页
目的观察比索洛尔对容量超负荷心衰大鼠左室心肌瞬时外向钾通道(I to)蛋白表达的影响。方法成年雄性SD大鼠(180-200 g)随机分为假手术组(n=16)、心衰组(n=20)和比索洛尔干预组(n=20),采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制作容量超负荷心... 目的观察比索洛尔对容量超负荷心衰大鼠左室心肌瞬时外向钾通道(I to)蛋白表达的影响。方法成年雄性SD大鼠(180-200 g)随机分为假手术组(n=16)、心衰组(n=20)和比索洛尔干预组(n=20),采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制作容量超负荷心衰模型。术后8周,比索洛尔干预组给予比索洛尔(1 mg/kg,1次/d)灌胃,干预4周后,检测血流动力学及血清脑钠肽(BNP)以评价心功能,采用免疫荧光染色和Western blot测定各组大鼠左室心肌I to通道的亚型K v1.4、K v4.2、K v4.3的蛋白表达量。结果心衰组与假手术组大鼠比较,血流动力学状况明显下降,BNP明显升高(P<0.01)。假手术组K v1.4、K v4.2、K v4.3在细胞膜及细胞浆中均表达,以K v4.3表达为主,心衰组K v1.4、K v4.3的蛋白表达量较假手术组明显下降(P<0.01);比索洛尔干预可明显改善心功能及血流动力学状况,增加K v1.4、K v4.3的蛋白表达量(P<0.01或P<0.05)。结论比索洛尔干预可改善慢性心衰大鼠的心功能,增加I to通道的亚型K v1.4、K v4.3的蛋白表达量。 展开更多
关键词 比索洛尔 心力衰竭 瞬时外向钾通道 蛋白表达
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比索洛尔对心力衰竭兔心房肌细胞钾通道表达的影响 被引量:5
9
作者 李溪 马爱群 +4 位作者 任京婷 王亭忠 韩克 卢群 卓小桢 《山西医科大学学报》 CAS 2011年第10期787-792,共6页
目的观察容量负荷联合压力超负荷心力衰竭兔左房心肌细胞K+通道表达的变化及比索洛尔的干预作用,以探讨心衰时房性心律失常发生的机制和比索洛尔抗心律失常的分子机制。方法实验分为3组,假手术组(SO,n=10)、心衰组(HF,n=15)和比索洛尔... 目的观察容量负荷联合压力超负荷心力衰竭兔左房心肌细胞K+通道表达的变化及比索洛尔的干预作用,以探讨心衰时房性心律失常发生的机制和比索洛尔抗心律失常的分子机制。方法实验分为3组,假手术组(SO,n=10)、心衰组(HF,n=15)和比索洛尔干预组(BF,n=14)。用容量负荷联合压力超负荷诱导形成心力衰竭兔模型;用心动超声、血清脑钠肽(BNP)、心体比评价心力衰竭模型;用real-time PCR法测定瞬时外向钾电流(Ito)、快激活延迟整流钾电流(IKr)、慢激活延迟整流钾电流(IKs)、内向整流钾电流(IK1)亚基的mRNA表达水平。结果①与假手术组相比,心衰组兔心动超声结果显示左房、左室增大,心脏收缩功能和舒张功能减低(P<0.01);血清BNP水平明显升高(P<0.01);心体比明显增大(P<0.01)。②与心力衰竭组相比,比索洛尔干预6周后明显改善心衰兔的心功能,使左房和左室缩小(P<0.05);BNP水平显著降低(P<0.01);心体比明显降低(P<0.01)。③心力衰竭时左房心肌细胞Kv4.3和Kv1.4(编码Ito的α亚基)mRNA分别下降了60%和30%,KvLQT1和minK(分别编码IKs的α和β亚基)的mRNA分别下降了32%%和29%,Kir2.1(编码IK1的α亚基)的mRNA分别下降了22%。④比索洛尔干预后Kv4.3和Kv1.4 mRNA表达比心衰组增加了20%和15%,KvLQT1和minK的mRNA表达比心衰组增加了20%和14%,Kir2.1的mRNA增加了11%。⑤三组间心房肌细胞ERG的表达没有差异。结论心力衰竭兔左房心肌Kv4.3、Kv1.4、KvLQT1、minK和Kir2.1的mRNA表达明显下降可能是心力衰竭房性心律失常发生的分子基础。比索洛尔干预后逆转心衰兔Kv4.3、Kv1.4、KvLQT1、minK和Kir2.1 mRNA表达的下调可能是其抗心律失常的分子机制。 展开更多
关键词 心力衰竭 动物模型 钾通道 Β受体阻滞剂 比索洛尔
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比索洛尔对心衰大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响 被引量:5
10
作者 王建丽 马爱群 +2 位作者 王贺 王亭忠 韩克 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第5期401-405,共5页
目的观察比索洛尔对容量超负荷心衰大鼠左室心肌细胞内向整流钾电流((I_(K1))的影响。方法成年雄性SD大鼠(180-200 g)随机分为假手术组、心衰组和比索洛尔干预组,采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制作容量超负荷心衰模型。术后8周,比索... 目的观察比索洛尔对容量超负荷心衰大鼠左室心肌细胞内向整流钾电流((I_(K1))的影响。方法成年雄性SD大鼠(180-200 g)随机分为假手术组、心衰组和比索洛尔干预组,采用腹主动脉-下腔静脉穿刺造瘘法制作容量超负荷心衰模型。术后8周,比索洛尔干预组给予比索洛尔(1 mg/kg,1次/d)灌胃,干预4周后,检测血清脑钠肽(BNP)及超声心动图以评价心功能。急性酶解法分离大鼠左室心肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录动作电位及I_(K1)电流,并绘制I-V曲线。结果心衰组与假手术组大鼠比较,心功能明显下降,血清BNP水平(pmol/L)明显升高(1 562.89±153.26 vs 225.57±63.62,P<0.01),动作电位时程(APD,ms)延长(APD_(90):324.85±21.66 vs 137.80±15.24,P<0.01),I_(K1)电流密度减小(-140 m V:-23.20±2.10 vs-35.55±2.78,P<0.01)。比索洛尔干预可明显改善心功能,缩短APD,增加I_(K1)电流密度(-140 m V:-27.16±2.62vs-23.20±2.10,P<0.01)。结论比索洛尔干预可改善慢性心衰大鼠的心功能,增加I_(K1)电流密度。 展开更多
关键词 比索洛尔 心力衰竭 内向整流钾电流 大鼠
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体内心肌缺血微环境下大鼠骨髓间充质干细胞钾离子通道的表达 被引量:1
11
作者 张静 魏峰 +2 位作者 王亭忠 倪雅娟 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期287-290,312,共5页
目的动态观察在体内心肌缺血微环境下,大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化过程中主要钾离子通道的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急... 目的动态观察在体内心肌缺血微环境下,大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化过程中主要钾离子通道的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型(n=60),将绿色荧光蛋白(green fluorescent pro-tein,GFP)标记的MSCs,心外膜下注射移植到心肌梗死周边区;免疫荧光染色观察移植后3d(MI-3d组)、5d(MI-5d组)、7d(MI-7d组)、9d(MI-9d组)MSCs的存活情况及其主要钾离子通道(Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3、Kca1.1)蛋白的表达;应用激光捕获显微切割技术分离以上各组心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用Real-time PCR测定其Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3、Kca1.1的mRNA表达。结果免疫荧光染色观察到移植的MSCs于移植后第3天开始持续表达Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3,不表达Kca1.1,于移植后第9天几乎未观察到MSCs;Real-time PCR结果显示移植后3、5、7d,移植的MSCs上Kv1.4和Kir2.1表达呈逐步增多趋势,差异具有统计学意义(P<0.05),Kv4.3的表达无此变化趋势,但高于未移植MSCs,未见明显差异。结论移植的MSCs在大鼠体内心肌缺血微环境下向心肌细胞分化的过程中能够表达部分钾离子通道表型,但其不能长时间、有效的存活。 展开更多
关键词 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 移植 钾离子通道 Kv1.4 KIR2.1 Kv4.3 Kca1.1
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容量超负荷大鼠左室内向整流钾通道蛋白表达的研究 被引量:1
12
作者 王建丽 王贺 +3 位作者 王亭忠 韩克 杜媛 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期173-176,共4页
目的观察容量超负荷心衰大鼠左室心肌内向整流钾通道(IK1)各亚型的蛋白表达。方法通过腹主动脉-下腔静脉造瘘法建立容量超负荷大鼠心衰模型,同时设立假手术组。术后8周后用心动超声、血清脑钠肽(BNP)、心体比等评价心衰模型,采用免疫荧... 目的观察容量超负荷心衰大鼠左室心肌内向整流钾通道(IK1)各亚型的蛋白表达。方法通过腹主动脉-下腔静脉造瘘法建立容量超负荷大鼠心衰模型,同时设立假手术组。术后8周后用心动超声、血清脑钠肽(BNP)、心体比等评价心衰模型,采用免疫荧光染色和Western blot测定两组大鼠左室心肌IK1的亚型Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3的蛋白表达。结果心衰组与假手术组大鼠相比,心动超声示心脏收缩与舒张功能均明显减低(P<0.01),血清BNP水平明显升高(P<0.01),心体比明显增大(P<0.01),IK1通道的亚型Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3在细胞膜与细胞质均表达,其蛋白表达量均明显下降(P<0.01),分别下降了13.2%、24.7%、8.9%。结论慢性心力衰竭大鼠左室心肌IK1通道各亚型的蛋白表达量均明显降低。 展开更多
关键词 心力衰竭 容量超负荷 大鼠 内向整流钾通道 蛋白表达 血清脑钠肽
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二代测序技术检测房颤伴高度房室传导阻滞患者致病基因分析 被引量:1
13
作者 杜媛 王娅 +3 位作者 韩秀 韩克 马爱群 王亭忠 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第10期1150-1154,共5页
目的利用高通量二代测序技术检测房颤伴高度房室传导阻滞致病基因。方法收集1个房颤伴高度房室传导阻滞家系的临床资料,同时采集外周血进行高通量测序筛查致病基因,发现可疑致病基因后采用多种生物信息学软件预测该突变的致病性。结果... 目的利用高通量二代测序技术检测房颤伴高度房室传导阻滞致病基因。方法收集1个房颤伴高度房室传导阻滞家系的临床资料,同时采集外周血进行高通量测序筛查致病基因,发现可疑致病基因后采用多种生物信息学软件预测该突变的致病性。结果发现先证者及其1个女儿均携带心脏缓慢延迟整流钾通道编码基因KCNQ1 c. 407G> T(p. C136F)突变,而家系内其余成员均无该突变。c. 407G> T(p. C136F)突变位于KCNQ1通道的S1段,生物信息学软件预测该突变位点是有害突变,可能通过影响通道蛋白功能而致病。结论采用二代测序技术发现房颤伴高度房室传导阻滞患者携带KCNQ1 c. 407G> T(p. C136F)突变,该突变可能通过影响通道蛋白功能而致病。 展开更多
关键词 房颤 房室传导阻滞 KCNQ1 p.C136F突变 二代测序技术
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同种异体骨髓间充质干细胞在大鼠体内心肌缺血微环境中Nav1.5的表达 被引量:1
14
作者 张静 王亭忠 +2 位作者 魏峰 倪雅娟 马爱群 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第10期907-910,1001,共5页
目的观察大鼠同种异体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体内心肌缺血微环境中向心肌细胞分化过程中Nav1.5的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心... 目的观察大鼠同种异体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体内心肌缺血微环境中向心肌细胞分化过程中Nav1.5的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型(n=50),将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转染标记MSCs,并贴壁培养,用心外膜下注射的方法将GFP标记的MSCs移植到心肌梗死周边区;通过免疫荧光染色观察移植后3,5,7 d移植的MSCs上Nav1.5蛋白的表达;应用激光捕获显微切割技术分离移植后3,5,7 d心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用realtime PCR测定移植后3,5,7 d Nav1.5及未移植MSCs mRNA的相对表达量;对移植后9 d的移植区域行TUNEL凋亡染色。结果免疫荧光染色观察移植的MSCs于移植后3,5,7 d均不表达Nav1.5;real-time PCR测定显示Nav1.5相对表达量在移植后3,5,7 d之间比较及分别与未移植的MSCs相比均无明显变化(P>0.05);移植的MSCs于移植后9 d在心肌组织中几乎观察不到,TUNEL凋亡染色显示移植的MSCs发生了凋亡。结论在大鼠体内心肌缺血微环境中移植的同种异体MSCs不表达Nav1.5且不能长期存活。 展开更多
关键词 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 移植 NAV1.5
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贝那普利对心力衰竭兔心房肌细胞钾通道mRNA水平的影响 被引量:1
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作者 李溪 马爱群 +2 位作者 王亭忠 韩克 卢群 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第11期1005-1009,共5页
目的观察容量负荷联合压力超负荷心力衰竭兔左房心肌细胞K+通道mRNA水平的变化,并探讨贝那普利对心房肌细胞K+通道mRNA水平的影响。方法实验分为3组:假手术组(SO,n=10),心力衰竭组(HF,n=15),贝那普利干预组(BHF,n=13)。用容量负荷联合... 目的观察容量负荷联合压力超负荷心力衰竭兔左房心肌细胞K+通道mRNA水平的变化,并探讨贝那普利对心房肌细胞K+通道mRNA水平的影响。方法实验分为3组:假手术组(SO,n=10),心力衰竭组(HF,n=15),贝那普利干预组(BHF,n=13)。用容量负荷联合压力超负荷诱导形成心力衰竭兔模型;用超声心动指标、心体比、脑钠肽(BNP)评价心衰模型;用real-time PCR法测定瞬时外向钾电流(Ito)、快激活延迟整流钾电流(IKr)、慢激活延迟整流钾电流(IKs)、内向整流钾电流(IK1)亚基的mRNA水平。结果 1与假手术组相比,心衰组兔超声心动指标显示左房、左室增大,心脏收缩功能、舒张功能明显减低(P<0.01);血清BNP水平明显升高(P<0.01);心体比明显增大(P<0.01)。2与心衰组比较,贝那普利组干预6周提高了心衰兔的心功能,使BNP下降,扩大的左室和左房明显回缩。3与假手术组比较,心衰组左房心肌细胞Kv4.3和Kv1.4(均编码Ito的α亚基)mRNA水平下降了59%(P<0.01)和47%(P<0.01);Kv LQT1(编码IKs的α亚基)和min K(编码IKs的β亚基)的mRNA水平分别下降了29%(P<0.01)和32%(P<0.01);Kir2.1(编码IK1的α亚基)的mRNA水平降低了22%(P<0.01)。4贝那普利干预6周后,与心衰组比,Kv4.3、Kv LQT1和min K的mRNA水平上调了29%(P<0.01)、18%(P<0.01)和14%(P<0.01);Kv1.4和Kir2.1的mRNA水平没有明显变化(P>0.05)。5ERG(编码IKr的α亚基)的mRNA水平在三组兔中无变化。结论心力衰竭兔左房扩大,Kv4.3、Kv1.4、Kv LQT1、min K和Kir2.1的mRNA水平明显下降,ERG mRNA水平不变。贝那普利干预后心衰兔左房、左室缩小并部分逆转Kv4.3、Kv LQT1、min K mRNA水平的下调。 展开更多
关键词 心力衰竭 动物模型 钾通道 贝那普利
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大鼠骨髓间充质干细胞在心肌缺血微环境中Cav1.2的表达 被引量:1
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作者 张静 马爱群 +1 位作者 魏峰 王亭忠 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第11期1092-1095,共4页
目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在心肌缺血微环境中向心肌细胞分化过程中Cav1.2的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocard... 目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在心肌缺血微环境中向心肌细胞分化过程中Cav1.2的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型(n=52),并行心电图检查。将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记MSCs,贴壁培养,用心外膜下注射法将GFP标记的MSCs移植到心肌梗死周边区域;移植后7 d开胸取心脏组织,HE染色观心肌梗死区域病理变化。将移植后3,5,7 d的大鼠分为3 d组、5 d组、7 d组,每组10只动物,免疫荧光染色观察各组移植的MSCs上Cav1.2蛋白的表达;激光捕获显微切割技术分离各组心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用real-time PCR测定各组心肌组织中Cav1.2及未移植大鼠MSCs mRNA的相对表达量;移植后9 d,对移植区域行TUNEL凋亡染色。结果免疫荧光染色观察3 d组、5 d组、7 d组心肌组织中移植的MSCs均不表达Cav1.2;real-time PCR测定显示,3 d组、5 d组、7 d组中Cav1.2相对表达量与未移植的MSCs相比均无明显变化(P>0.05),移植后9 d未观察到MSCs的表达,TUNEL凋亡染色显示移植的MSCs发生了凋亡。结论在大鼠心肌缺血微环境中移植的MSCs不表达Cav1.2且不能长期存活。 展开更多
关键词 心肌梗死 骨髓间充质干细胞 移植 Cav1.2
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汉麻纤维脱胶技术研究进展 被引量:1
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作者 王亚非 吴韶华 +3 位作者 陈韶娟 丁洪亮 冯震 王亭忠 《丝绸》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期70-79,共10页
汉麻纤维是近年来备受关注的具有较高比刚度和强度的天然纤维,其韧皮纤维具有生物可降解性,且在汽车工业、结构复合材料、制浆和纺织等领域具有广阔的应用前景。文章对汉麻纤维的物理、化学、生物和综合脱胶工艺的优缺点,以及汉麻纤维... 汉麻纤维是近年来备受关注的具有较高比刚度和强度的天然纤维,其韧皮纤维具有生物可降解性,且在汽车工业、结构复合材料、制浆和纺织等领域具有广阔的应用前景。文章对汉麻纤维的物理、化学、生物和综合脱胶工艺的优缺点,以及汉麻纤维脱胶工艺的最新研究进展进行了梳理和分析。研究认为:物理脱胶法适用于预处理及后处理;化学脱胶法需要与其他方法联合以减少环境污染及能源损耗,其是目前工业化脱胶最主要的手段;有机溶剂、电化学及微波法等新型脱胶方法尚处于探究阶段,很难应用于生产实践;生物脱胶法可有效降低能耗和环境污染,且对纤维的损伤小,具有广阔的发展前景。 展开更多
关键词 汉麻纤维 脱胶工艺 化学脱胶 生物脱胶 联合脱胶 绿色脱胶
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比索洛尔对大动脉水平左向右分流大鼠窦房结HCN2、HCN4通道mRNA表达及固有心率的影响
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作者 张军波 牛小麟 +8 位作者 吕颖 田红燕 杜媛 黄欣 王亭忠 席雨涛 韩克 孙玉晓 马爱群 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期189-193,213,共6页
目的以大动脉水平左向右分流SD大鼠心衰模型为研究对象,观察固有心率、窦房结起搏电流HCN2及HCN4亚型mRNA在心脏重构过程中的变化,以及选择性β1-受体阻滞剂比索洛尔对它们的影响。方法通过腹腔动静脉造瘘术建立慢性大动脉水平左向右分... 目的以大动脉水平左向右分流SD大鼠心衰模型为研究对象,观察固有心率、窦房结起搏电流HCN2及HCN4亚型mRNA在心脏重构过程中的变化,以及选择性β1-受体阻滞剂比索洛尔对它们的影响。方法通过腹腔动静脉造瘘术建立慢性大动脉水平左向右分流心力衰竭模型,并以假手术组动物为对照。共同饲养2月后,随机分别给予安慰剂或比索洛尔。4周后再次行超声心动检查;测定血流动力学改变及固有心率;提取RNA进行实时定量RT-PCR测定各组HCN通道各亚型mRNA的表达水平。结果造模后2月,超声心动图显示,手术组大鼠心脏扩大,左室厚度显著增高,射血分数则显著降低(P<0.01)。比索洛尔干预4周后未能逆转大动脉水平左向右分流引起的心腔扩大(P>0.05),但可改善心脏功能(P<0.05)并提高固有心率(P<0.01)。HCN通道蛋白mRNA检测显示:①大鼠窦房结组织中HCN2表达占优势,HCN4相对较少(79%、21%);②安慰剂组HCN4mRNA水平较假手术组明显下降(0.09±0.02 vs.1.04±0.13,P<0.01),而HCN2mRNA表达在各组间没有统计学差异;③比索洛尔治疗后,HCN4基因mRNA水平明显回升(0.99±0.15 vs.0.09±0.02,P<0.01)。结论①比索洛尔干预在改善心衰大鼠心脏功能的同时,可以降低基础心率、升高固有心率;②大动脉水平左向右分流导致心衰大鼠窦房结HCN4通道mRNA的表达降低,比索洛尔治疗可以逆转该通道的重构。这是其影响固有心率、改善心功能的可能机制。 展开更多
关键词 左向右分流 HCN通道 比索洛尔 窦房结 固有心率 心衰
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成年大鼠心室肌细胞表达多种电压门控钠通道α亚型
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作者 杜媛 罗玲 +3 位作者 李涛 席雨涛 马爱群 王亭忠 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期796-802,共7页
目的观察成年大鼠心室肌细胞上电压门控钠通道不同亚型的表达情况。方法采用酶解消化法分离成年大鼠心室肌细胞,利用免疫荧光染色结合激光共聚焦技术检测心室肌细胞钠通道α亚型Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7的表达... 目的观察成年大鼠心室肌细胞上电压门控钠通道不同亚型的表达情况。方法采用酶解消化法分离成年大鼠心室肌细胞,利用免疫荧光染色结合激光共聚焦技术检测心室肌细胞钠通道α亚型Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7的表达及分布情况,采用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞钠电流。结果成年大鼠心室肌细胞除表达心脏型钠通道亚型Nav1.5之外,还表达神经型钠通道亚型Nav1.1、Nav1.6和Nav1.7,不表达Nav1.2和Nav1.3。Nav1.5分布于横小管周围,Nav1.1和Nav1.7亦呈点状分布于横小管区域。Nav1.6表达稍弱,沿心室肌细胞长轴纵向分布,闰盘处未见钠通道各α亚型的表达。膜片钳结果显示成年大鼠心室肌细胞表达快钠电流(INa,T)及晚钠电流(INa,L)。结论成年大鼠心室肌细胞表达心脏型钠通道亚型(Nav1.5)和多种神经型钠通道亚型(Nav1.1、Nav1.6和Nav1.7),这可能有助于维持心肌细胞的正常电生理活动。 展开更多
关键词 心室肌细胞 电压门控钠通道 亚型 快钠电流 晚钠电流
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伏立康唑对HEK-293细胞中快速延迟整流钾通道及电压门控钠通道表达和功能的影响
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作者 宁菲菲 罗玲 +3 位作者 吴燕 王娅 马爱群 王亭忠 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第1期51-58,共8页
目的观察伏立康唑对快速延迟整流钾通道(hERG)及电压门控钠通道(Nav1.5)表达和功能的影响。方法分别用浓度为0,2.5,5,10,50μmol/L伏立康唑干预稳定表达hERG通道蛋白及Nav1.5通道蛋白的HEK-293细胞24 h,Western blot检测hERG及Nav1.5的... 目的观察伏立康唑对快速延迟整流钾通道(hERG)及电压门控钠通道(Nav1.5)表达和功能的影响。方法分别用浓度为0,2.5,5,10,50μmol/L伏立康唑干预稳定表达hERG通道蛋白及Nav1.5通道蛋白的HEK-293细胞24 h,Western blot检测hERG及Nav1.5的表达水平。用5μmol/L伏立康唑干预稳定表达Nav1.5的HEK-293细胞,分别干预0,2,4,8,16,24 h,Western blot检测Nav1.5的表达水平。用0,5,10μmol/L伏立康唑干预稳定表达hERG通道及Nav1.5通道的HEK-293细胞24 h,全细胞膜片钳技术检测hERG通道及Nav1.5通道的电流密度。以0μmol/L伏立康唑组为对照组,比较不同浓度伏立康唑对hERG及Nav1.5蛋白表达和通道功能的影响。结果与0μmol/L相比,2.5,5,10,50μmol/L伏立康唑干预24 h,Nav1.5蛋白表达水平增加(P<0.05),hERG蛋白的表达水平不受影响(P>0.05)。随着5μmol/L伏立康唑干预时间延长,Nav1.5蛋白的表达水平增加(P<0.05)。与0μmol/L相比,5μmol/L和10μmol/L的伏立康唑干预24 h,峰值钠电流及晚钠电流水平增加(P<0.05),但快速延迟整流钾电流水平没有明显变化(P>0.05)。结论伏立康唑干预可以浓度及时间依赖性增加Nav1.5的表达水平,增加峰值钠电流及晚钠电流水平,但不影响hERG蛋白的表达及快速延迟整流钾电流水平。 展开更多
关键词 伏立康唑 电压门控钠通道 快速延迟整流钾通道 晚钠电流 心律失常
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