以小球藻为载体生产兔防御素的研究 被引量：27

1

作者 王义琴 陈颖 +3 位作者 白琴华 赵世民 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第9期1-5,共5页

本研究以单细胞的真核藻类小球藻 (Chlorellaellipsoidea)作为受体 ,将兔防御素 (NP 1)的基因转入后 ,经抗生素筛选和分子及活性检测 ,获得了稳定表达NP 1的转基因藻株。进行了转基因小球藻扩繁的研究 ,并从扩繁的转基因小球藻中提取纯... 本研究以单细胞的真核藻类小球藻 (Chlorellaellipsoidea)作为受体 ,将兔防御素 (NP 1)的基因转入后 ,经抗生素筛选和分子及活性检测 ,获得了稳定表达NP 1的转基因藻株。进行了转基因小球藻扩繁的研究 ,并从扩繁的转基因小球藻中提取纯化了具有正常的生物活性NP 1。本文是通过基因工程的途径生产防御素的首例报道 。 展开更多

关键词 兔防御素 小球藻 分子检测 抑菌活性 基因工程 抗生素 NP-1

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天麻抗真菌蛋白(GAFP)的N端序列测定及cDNA基因克隆 被引量：9

2

作者 王义琴 李文彬 +4 位作者 LamHonming 张秀海 陈潜 郭顺星 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第1期10-14,共5页

从新鲜天麻次生块茎中将天麻抗真菌蛋白(GAFP)提纯,然后测得其N端的30个氨基酸,根据氨基酸序列设计了一段30bp的核酸探针,从cDNA文库中筛选到了编码该蛋白的基因,为这一新型蛋白在抗真菌基因工程中的应用奠定了基础。

关键词 天麻 CDNA文库 N端序列 抗真菌蛋白基因

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生物素-亲合素系统及其应用 被引量：9

3

作者 王义琴 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第3期95-97,共3页

概述了生物素 亲合素系统在生物学领域中的应用及其研究进展。生物素 -亲合素系统的应用日益广泛 ,不但在免疫组织化学领域中占有了重要的位置 ,而且在标记核酸探针、细胞和物质分离方面显示了明显的优越性 ,特别是与生物磁珠技术相结... 概述了生物素 亲合素系统在生物学领域中的应用及其研究进展。生物素 -亲合素系统的应用日益广泛 ,不但在免疫组织化学领域中占有了重要的位置 ,而且在标记核酸探针、细胞和物质分离方面显示了明显的优越性 ,特别是与生物磁珠技术相结合后 ,更是产生了诱人的发展前景。 展开更多

关键词 生物素 亲合素 维生素 糖蛋白 生物活性

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GUS基因在杜氏盐藻细胞中的瞬间表达 被引量：36

4

作者 耿德贵 王义琴 +1 位作者 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期35-39,共5页

利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的... 利用电激法将GUS基因转入杜氏盐藻细胞内进行瞬间表达 ,研究了盐藻的生长状态和电激转化条件对转化率的影响 ,并比较了CaMV35S、Ubil、Ubil Ω、CaMV35S U bil和CaMV35S Ubil Ω 5种启动子的转化效率。结果表明 ,培养 5d的盐藻在 6kV的脉冲电压、0 .0 5s的脉冲持续时间和 2 10的脉冲次数下电激可获得较高的转化率 ,为转化最佳条件。 5种启动子中 ,Ubil Ω启动子的转化效率最高 。 展开更多

关键词 杜氏盐藻细胞 转化率 杜氏盐藻 GUS基因 电激法 瞬间表达 转基因 基因表达

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基因枪轰击法将蜘蛛丝蛋白基因(ADF3)转入海岛棉的研究 被引量：10

5

作者 黄全生 刘霞 +4 位作者 王义琴 王冬梅 杨克锐 李建平 葛峰 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第4期248-250,共3页

用海岛棉茎尖作为基因枪转化的靶材料,建立了可重复的海岛棉转化系统。将海岛棉茎尖分生组织经过3～6周的诱导、继代培养生长后,可以形成足够量的再生植株。用含有Npt-Ⅱ基因和蜘蛛丝蛋白基因的质粒轰击新疆海岛棉4个品种茎尖分生组织,... 用海岛棉茎尖作为基因枪转化的靶材料,建立了可重复的海岛棉转化系统。将海岛棉茎尖分生组织经过3～6周的诱导、继代培养生长后,可以形成足够量的再生植株。用含有Npt-Ⅱ基因和蜘蛛丝蛋白基因的质粒轰击新疆海岛棉4个品种茎尖分生组织,在含有70～100mg/l卡那霉素的培养基上筛选、预再生、再生及生根培养,获得的24株抗卡那霉素转基因再生植株。所获得的转基因植株经卡那霉素筛选,再生植株总DNA提取,Southern点杂交分子检测,初步证明有2株转化植株目的基因已整合到海岛棉基因组中,同时也已得到种子。研究为通过植物基因工程的方法以期改良棉花纤维品质提供了一条新的途径。 展开更多

关键词 基因枪轰击法 蜘蛛丝蛋白基因 海岛棉 转基因 茎尖分生组织

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在大肠杆菌中表达蜘蛛拖丝融合蛋白 被引量：6

6

作者 牛恒尧 王义琴 +2 位作者 萨其拉 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第11期5-7,共3页

蜘蛛丝凭借其优良的理化性质倍受人们青睐 ,但是蜘蛛本身难以高密度养殖给应用造成巨大的障碍。由此利用基因工程的手段来开发利用蜘蛛拖丝蛋白目前成为各国研究的热点。以往的研究表明 ,不同的编码蛛丝蛋白的cDNA片段在表达中的稳定性... 蜘蛛丝凭借其优良的理化性质倍受人们青睐 ,但是蜘蛛本身难以高密度养殖给应用造成巨大的障碍。由此利用基因工程的手段来开发利用蜘蛛拖丝蛋白目前成为各国研究的热点。以往的研究表明 ,不同的编码蛛丝蛋白的cDNA片段在表达中的稳定性各不相同。在应用中存在适宜片段的筛选问题。本文从该角度出发 ,首次建立了从Ara neusdiadematu克隆的拖丝蛋白基因ADF3与GST融合产物的稳定原核表达系统。为今后进一步开发利用蜘蛛拖丝蛋白的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 蜘蛛丝 Araneusdiadematu 原核表达 基因工程 大肠杆菌 丝类纤维 蜘蛛拖丝融合蛋白

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新疆陆地棉转基因抗病品系材料的获得 被引量：4

7

作者 危晓薇 师维军 +4 位作者 葛峰 徐利民 王义琴 黄全生 吾买尔江 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第4期402-407,共6页

天麻抗真菌蛋白(gastrodia antifungal protein简称GAFP)是从我国传统中药天麻(Gastrodia elata Bl.)中分离得到的一种具有广谱抗真菌活性的蛋白质,它对许多植物真菌病的致病菌离体具有很强的抑制作用。研究将所获得的转GAFP基因的陆地... 天麻抗真菌蛋白(gastrodia antifungal protein简称GAFP)是从我国传统中药天麻(Gastrodia elata Bl.)中分离得到的一种具有广谱抗真菌活性的蛋白质,它对许多植物真菌病的致病菌离体具有很强的抑制作用。研究将所获得的转GAFP基因的陆地棉经Southern点杂交,证实得到了2株高抗枯、黄萎病的转基因植株。其后代经过进一步的抗病性筛选、PCR鉴定、选育和扩繁,发现转基因陆地棉后代具有稳定的、较强抗枯、黄萎病能力。研究为新疆陆地棉通过植物抗病基因工程的方法进行抗病品种选育提供了一条新的途径。 展开更多

关键词 天麻抗真菌蛋白 转基因抗病陆地棉 棉花枯萎病和黄萎病

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基于Visio的图形化建模可测性分析软件设计 被引量：4

8

作者 高旭 龙兵 +1 位作者 杨兴霁 王义琴 《中国测试》 CAS 2011年第4期49-53,共5页

通过研究基于多信号模型的可测性建模和分析方法,提出一种基于Visio控件构建图形化建模系统的设计方法。结合具体示例给出了多信号模型的建模方法和故障测试依赖矩阵的求法,并分析了示例的模糊组、未检测故障、冗余测试、隐藏故障、掩... 通过研究基于多信号模型的可测性建模和分析方法,提出一种基于Visio控件构建图形化建模系统的设计方法。结合具体示例给出了多信号模型的建模方法和故障测试依赖矩阵的求法,并分析了示例的模糊组、未检测故障、冗余测试、隐藏故障、掩盖故障、故障检测率和隔离率等可测性指标,其结果与应用TEAMS软件的分析结果一致。实践证明:该方案是可行的,对开发可测性辅助分析软件具有参考价值。 展开更多

关键词 图形化 多信号模型 可测性分析 VISIO二次开发 依赖矩阵

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色素基因工程与棉花纤维色泽改良 被引量：3

9

作者 宋晶 王义琴 +2 位作者 张利明 孙勇如 李文彬 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第7期103-107,共5页

介绍了植物色素基因研究的最新进展及如何利用基因工程转化棉花的方法

关键词 色泽改良 黑色素 靛蓝 酷氨酸酶 吲哚双加氧酶 基因工程 棉花纤维 植物色素

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激发子诱导植物基因表达研究进展

10

作者 王建设 萨其拉 +1 位作者 王义琴 孙勇如 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第11期101-106,共6页

介绍了基因诱导表达调控的研究方法 ,并概述了与ABA、乙烯、真菌激发子诱导表达相关的顺式作用元件 (G box、GT 1结合位点、GCC box、W box) ,以及与这些顺式作用元件相互作用的转录因子 (GBFS、GT 1、EREBPS、WRKY)。

关键词 基因表达 研究进展 激发子 诱导表达 顺式作用元件 反式作用因子 分子机制 植物基因工程

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转GAFP基因对彩色棉性状的影响

11

作者 刘丰疆 李仁敬 +3 位作者 张振南 王义琴 曹燕燕 焦明钰 《中国棉花》 北大核心 2006年第3期13-14,共2页

关键词 AFP基因 彩色棉 天麻抗真菌蛋白基因 棉花研究所 新彩棉1号 主栽品种 遗传结构 发育生物学 天然彩色 外源基因

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利用自剪切融合蛋白在大肠杆菌中表达并纯化兔防御素

12

作者 李霞 沈昕 +4 位作者 王义琴 张利明 赵世民 李文彬 孙勇如 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期67-70,共4页

将源自兔嗜中性细胞的防御素基因NP-1插入原核表达载体pTYB2,并将重组质粒pTYB2-NP1转入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导使防御素以融合蛋白的形式表达.然后,通过亲和层析利用自剪切融合蛋白分离提纯目的蛋白.蛋白电泳检测到以二聚体形式存... 将源自兔嗜中性细胞的防御素基因NP-1插入原核表达载体pTYB2,并将重组质粒pTYB2-NP1转入大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导使防御素以融合蛋白的形式表达.然后,通过亲和层析利用自剪切融合蛋白分离提纯目的蛋白.蛋白电泳检测到以二聚体形式存在的防御素,但此蛋白没有对大肠杆菌的抑菌活性.同时,对该表达纯化系统的特点和用原核生物大肠杆菌表达真核生物防御素的问题进行了分析和讨论. 展开更多

关键词 融合蛋白 兔防御素 剪切 原核表达载体 大肠杆菌表达 防御素基因 NP-1 重组质粒 IPTG 目的蛋白 分离提纯 亲和层析 电泳检测 抑菌活性 真核生物 原核生物 纯化系统 性细胞 体形

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武汉国家基本气象观测站的雷电防护探讨 被引量：2

13

作者 王义琴 王凯峰 +1 位作者 刘学春 金敏 《安徽农业科学》 CAS 2015年第6期218-219,共2页

近年来随着观测业务的拓展,在武汉国家基本气象观测站安装的观测仪器越来越多,为了保障这些仪器的正常运行,避免遭受雷电灾害,对这些仪器采取了一些雷电防护措施。通过调查武汉国家基本气象观测站的相关情况,对其采取的雷电防护措施进... 近年来随着观测业务的拓展,在武汉国家基本气象观测站安装的观测仪器越来越多,为了保障这些仪器的正常运行,避免遭受雷电灾害,对这些仪器采取了一些雷电防护措施。通过调查武汉国家基本气象观测站的相关情况,对其采取的雷电防护措施进行评估,给出提高其防御雷电灾害能力的建议,从而保障观测站仪器设备的安全、可靠运行。 展开更多

关键词 雷电防护 直击雷 防护措施 观测站

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黄葵胶囊治疗IgA肾病、糖尿病肾病及膜性肾病疗效比较 被引量：18

14

作者 邢增辉 张一绚 +16 位作者 韩冰 李思晨 王义琴 刘超 林洪丽 倪兆慧 占永立 蔡广研 陈钦开 王小琴 张佩青 李鹏 汪年松 苗里宁 王涌 陈香美 孙雪峰 《中国中西医结合肾病杂志》 2023年第3期207-212,共6页

目的:评估黄葵胶囊治疗IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病的疗效差异。方法:基于多中心、前瞻性、单臂、开放式队列研究(NCT02231138)数据进行二次分析,倾向性评分匹配平衡基线差异后,比较IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病临床疗效。以尿蛋... 目的:评估黄葵胶囊治疗IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病的疗效差异。方法:基于多中心、前瞻性、单臂、开放式队列研究(NCT02231138)数据进行二次分析,倾向性评分匹配平衡基线差异后,比较IgA肾病、膜性肾病及糖尿病肾病临床疗效。以尿蛋白下降率≥30%定义为治疗有效,尿蛋白下降率<30%定义为无效,分析影响黄葵胶囊降低尿蛋白的危险因素。结果:共纳入964例患者,其中IgA肾病患者745例,膜性肾病患者96例,糖尿病肾病患者123例。IgA肾病、膜性肾病和糖尿病肾病组黄葵胶囊治疗后尿蛋白水平均较基线显著降低,但6个月尿蛋白降低率和有效率3组间无明显差别;基线尿蛋白、体重指数、血肌酐和血清白蛋白是黄葵胶囊降低尿蛋白的独立危险因素,尿蛋白每增加100 mg,尿蛋白降低率增加3.6%;血清白蛋白每增加1 g/L,尿蛋白降低率增加5.9%;而血肌酐每增加1μmmol/L,尿蛋白降低率减少0.7%,体重指数每升高1 kg/m^(2),尿蛋白降低率减少6.7%。结论:黄葵胶囊治疗6个月,降低IgA肾病、膜性肾病和糖尿病肾病尿蛋白的疗效无明显差别;合理选择黄葵胶囊为治疗慢性肾脏病患者提供了参考。 展开更多

关键词 黄葵胶囊 IGA肾病 糖尿病肾病 膜性肾病 疗效

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转兔防御素基因小球藻生物反应器异养培养工艺研究

15

作者 韩兴梅 李元广 +4 位作者 李兴武 万俊芬 魏晓东 孙勇如 王义琴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期73-77,共5页

根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器... 根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器中培养133h的细胞密度可达34.2g/L,平均生长速率为0.257g/(L·h),比5L生物反应器中培养131h的细胞密度27.8g/L和平均生长速率0.21g/(L·h)分别提高了23%和22%.研究结果证实了转NP-1基因小球藻放大培养的可行性,为实现高密度、高表达的大规模培养奠定了基础. 展开更多

关键词 生物反应器 异养培养 小球藻 兔防御素基因 工艺研究 NP-1 细胞密度 生长速率 大规模培养 过程特征 KNO3 工艺放大 放大培养 研究结果 高密度 高表达 平均

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牛尾山药块茎形态遗传稳定性和选择效果分析

16

作者 王义琴 韩曙 龙雯虹 《浙江农业科学》 2025年第5期1120-1125,共6页

牛尾山药生产中存在块茎长度、直径及芦头长度等不整齐的现象,为研究其块茎性状遗传稳定性并选择优良种系,以牛尾山药为研究对象,研究了其地下块茎形态特征的遗传规律。结果表明:无性系内变异系数大小排序为块茎柱形指数(18.84%)>块... 牛尾山药生产中存在块茎长度、直径及芦头长度等不整齐的现象,为研究其块茎性状遗传稳定性并选择优良种系,以牛尾山药为研究对象,研究了其地下块茎形态特征的遗传规律。结果表明:无性系内变异系数大小排序为块茎柱形指数(18.84%)>块茎上段均匀指数(14.44%)>块茎下段均匀指数(12.30%)>块茎膨大指数(10.65%),遗传变异系数大小排序为块茎柱形指数(11.10%)>块茎膨大指数(8.49%)>块茎上段均匀指数(7.22%)>块茎下段均匀指数(6.02%),块茎上段均匀指数和块茎下段均匀指数的广义遗传力分别为16.09%和16.48%;无性系后代优化程度大小排序为块茎柱形指数(59.85%)>块茎下段均匀指数(27.16%)>块茎上段均匀指数(20.98%)>块茎膨大指数(0.97%)。因此,建议选择块茎膨大部分长、粗度均匀的山药植株育成优良品种。 展开更多

关键词 牛尾山药 块茎 形态特征 变异系数 遗传力 选择效果

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