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果糖基转移酶在酿酒酵母中异源表达及酶学性质分析
被引量：
4
1
作者
王一恬
张玲
+1 位作者
沈微
杨海麟
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期24-28,共5页
采用RT-PCR方法,获得编码黑曲霉YZ59果糖基转移酶的基因fwt,并在酿酒酵母中实现了异源表达。发酵48 h后,果糖基转移酶最高酶活力可达19.8 U/m L。纯化后,测定分析了果糖基转移酶的酶学性质。结果显示,果糖基转移酶FWT的最适温度为55℃,...
采用RT-PCR方法,获得编码黑曲霉YZ59果糖基转移酶的基因fwt,并在酿酒酵母中实现了异源表达。发酵48 h后,果糖基转移酶最高酶活力可达19.8 U/m L。纯化后,测定分析了果糖基转移酶的酶学性质。结果显示,果糖基转移酶FWT的最适温度为55℃,在低于50℃稳定。果糖基转移酶FWT的最适p H为5.5,稳定p H范围为4.0~9.0。果糖基转移酶FWT的Km和Vmax分别为169.5 g/L和0.7 g/(L·min)。Ni2+和Mg2+可显著激活果糖基转移酶FWT。
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关键词
黑曲霉
果糖基转移酶
酿酒酵母
性质
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职称材料
一种来源于克劳氏芽孢杆菌的高碱性尿酸氧化酶的异源表达及重组酶性质分析
被引量：
3
2
作者
王一恬
沈微
+2 位作者
陈献忠
樊游
王正祥
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第2期1-4,共4页
以碱性蛋白酶生产菌克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)基因组DNA为模板PCR扩增获得尿酸氧化酶基因(BcU),插入原核表达载体pET28α中,构建表达载体pET-BcU,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-BcU。经IPTG诱导,重组菌...
以碱性蛋白酶生产菌克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)基因组DNA为模板PCR扩增获得尿酸氧化酶基因(BcU),插入原核表达载体pET28α中,构建表达载体pET-BcU,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-BcU。经IPTG诱导,重组菌BL21(DE3)/pET-BcU表达出有活性的尿酸氧化酶,含空质粒的重组菌在同样条件下没有酶活。酶学性质分析显示,重组酶最适pH值为9.0,在pH值9.0～11范围内酶活几乎不变,是一种高碱性尿酸氧化酶。
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关键词
克劳氏芽孢杆菌
尿酸氧化酶
高碱性
异源表达
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职称材料
题名
果糖基转移酶在酿酒酵母中异源表达及酶学性质分析
被引量：
4
1
作者
王一恬
张玲
沈微
杨海麟
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学生物工程学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期24-28,共5页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51402A)
文摘
采用RT-PCR方法,获得编码黑曲霉YZ59果糖基转移酶的基因fwt,并在酿酒酵母中实现了异源表达。发酵48 h后,果糖基转移酶最高酶活力可达19.8 U/m L。纯化后,测定分析了果糖基转移酶的酶学性质。结果显示,果糖基转移酶FWT的最适温度为55℃,在低于50℃稳定。果糖基转移酶FWT的最适p H为5.5,稳定p H范围为4.0~9.0。果糖基转移酶FWT的Km和Vmax分别为169.5 g/L和0.7 g/(L·min)。Ni2+和Mg2+可显著激活果糖基转移酶FWT。
关键词
黑曲霉
果糖基转移酶
酿酒酵母
性质
Keywords
Aspergillus niger
fructosyltransferase
Saccharomyces cerevisiae
characterization
分类号
TS261.2 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
一种来源于克劳氏芽孢杆菌的高碱性尿酸氧化酶的异源表达及重组酶性质分析
被引量：
3
2
作者
王一恬
沈微
陈献忠
樊游
王正祥
机构
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013年第2期1-4,共4页
基金
国家自然科学基金(项目编号:21006039)
文摘
以碱性蛋白酶生产菌克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)基因组DNA为模板PCR扩增获得尿酸氧化酶基因(BcU),插入原核表达载体pET28α中,构建表达载体pET-BcU,并转化大肠杆菌BL21(DE3)获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-BcU。经IPTG诱导,重组菌BL21(DE3)/pET-BcU表达出有活性的尿酸氧化酶,含空质粒的重组菌在同样条件下没有酶活。酶学性质分析显示,重组酶最适pH值为9.0,在pH值9.0～11范围内酶活几乎不变,是一种高碱性尿酸氧化酶。
关键词
克劳氏芽孢杆菌
尿酸氧化酶
高碱性
异源表达
Keywords
Bacillus clausii
urate oxidase
high alkaline
heterologous expression
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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出处
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1
果糖基转移酶在酿酒酵母中异源表达及酶学性质分析
王一恬
张玲
沈微
杨海麟
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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职称材料
2
一种来源于克劳氏芽孢杆菌的高碱性尿酸氧化酶的异源表达及重组酶性质分析
王一恬
沈微
陈献忠
樊游
王正祥
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2013
3
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